文 / 樊玉芬，劉琳，匡彥蓓，劉曉風（. 甘肅銀河食品集團有限責任公司，甘肅張掖 74000，

2. 蘭州理工大學生命科學與工程學院，甘肅蘭州 730050 3. 華南師范大學生命科學學院，廣東廣州 510630）

水飛薊殘渣中蛋白質(zhì)的制備工藝優(yōu)化及性能評價

文 / 樊玉芬1，劉琳2，匡彥蓓3，劉曉風2（1. 甘肅銀河食品集團有限責任公司，甘肅張掖 734000，

2. 蘭州理工大學生命科學與工程學院，甘肅蘭州 730050 3. 華南師范大學生命科學學院，廣東廣州 510630）

本實驗用堿提法提取蛋白質(zhì)，并結(jié)合單因素實驗和正交實驗法確定最佳提取工藝。結(jié)果表明，水飛薊分離蛋白的最佳提取工藝為：料液比1∶12，浸提時間60 min，提取液pH 9，提取溫度 50℃。

水飛薊粕；可溶性蛋白質(zhì)；提取工藝

近年來國內(nèi)對水飛薊的研究利用大都以提取水飛薊素為主，水飛薊素是從水飛薊籽中提取的，其副產(chǎn)品水飛薊粕一般用作飼料或肥料，利用的附加值較低[1,2]。本文以水飛薊粕為原料，研究水飛薊分離蛋白的工藝[3,4]，以期為水飛薊分離蛋白資源的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1、 材料與方法

1.1 試驗材料與試劑

水飛薊粕：實驗室提供，經(jīng)低溫加壓溶劑萃取技術(shù)脫脂，將脫脂水飛薊粕過80目篩備用?？捡R斯亮藍G-250（生化試劑）（取考納斯亮藍G-250試劑100mg溶于50ml 95%的乙醇溶液中，然后加100ml 85%的磷酸，加蒸餾水稀釋至1L）。牛血清蛋白，其他試劑均為分析純。

1.2 試驗方法

本實驗采取堿溶法提取蛋白質(zhì)，考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)含量[5]。

1.2.1 牛血清蛋白標準曲線的建立以牛血清蛋白標準溶液（0-200μg/mL）制作標準曲線。

1.2.2 水飛薊分離蛋白提取的工藝優(yōu)化

1.2.2.1 單因素試驗

選取料液比1∶12，浸提時間 60 min，提取液pH 9，提取溫度50 ℃為蛋白質(zhì)提取單因素的基本參數(shù)。確定一項最優(yōu)條件后，后續(xù)實驗操作均按前面最優(yōu)條件進行下一個試驗。

1.2.2.2 正交試驗設計

在單因素試驗基礎上，對影響水飛薊分離蛋白提取率的主要因素pH，溫度，料液比和水解時間進行了L9(34)試驗。

2 、結(jié)果與分析

2.1 標準曲線

2.2 單因素試驗結(jié)果

從圖2，3，4，5可以看出，料液比1∶12，浸提時間 60 min，提取液pH 9，提取溫度50℃為蛋白質(zhì)提取的最佳單因素條件。

2.3 正交試驗結(jié)果

正交試驗結(jié)果見表1。

表1 正交試驗結(jié)果

由表1的極差分析可知，各因素對水飛薊蛋白提取率的影響順序依次為pH＞溫度＞料液比＞浸提時間。表2直觀分析可知，堿提法提取水飛薊蛋白的最佳工藝條件為D2B2C2A1，即pH為9.0，浸提溫度為50℃，料液比為1∶12，水解時間為60min，此條件下，提取水飛薊蛋白濃度為12.48mg/mL。

3、結(jié)論

正交實驗法優(yōu)化水飛薊蛋白提取工藝，最佳提取條件為：提取液pH為9.0，溫度為50℃，料液比為1∶12，浸提時間60min，并提取最多的水飛薊蛋白12.48mg/ mL。

[1] 徐德峰，張衛(wèi)明，史勁松，顧龔平，孫達峰.國內(nèi)水飛薊資源利用現(xiàn)狀與展望[J ].食品研究與開發(fā)，2007,128（02）：157-160

[2] 劉合生，胡瑞斌，戚向陽.響應面法優(yōu)化的水飛薊可溶性蛋白質(zhì)提取工藝[J ].湖北農(nóng)業(yè)科學，2011,20（50）：44-49

[3] 宋寶生，柏愛云，李吉芬，段立英.水飛薊籽油及其制取工藝[J ].中國油脂，1999,24（2）：53-54

[4] 朱淑云，董英，陳曉東，周越.水飛薊粕蛋白氨基酸組成及加工功能特性研究[J ].中國糧油學報，2011,26（8）:71-74

[5] 扶慶權(quán)，華春，陳全戰(zhàn). 正交實驗法優(yōu)化紅小豆蛋白提取工藝[J ]江蘇農(nóng)業(yè)科學，2012,40（6）:248-250