文 / 樊玉芬，劉 琳， 匡彥蓓，劉曉風(fēng)

（1. 甘肅銀河食品集團(tuán)有限責(zé)任公司，甘肅張掖 734000， 2. 蘭州理工大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院，甘肅蘭州 730050 3. 華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣東廣州 510630）

黃參多糖的提取及其活性的測定

文 / 樊玉芬1，劉 琳2， 匡彥蓓3，劉曉風(fēng)2

（1. 甘肅銀河食品集團(tuán)有限責(zé)任公司，甘肅張掖 734000， 2. 蘭州理工大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院，甘肅蘭州 730050 3. 華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，廣東廣州 510630）

本文用水提醇沉法提取多糖，苯酚-硫酸法測定多糖含量，并結(jié)合單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)法確定最佳提取工藝。結(jié)果表明，黃參多糖的最佳提取工藝為：料液比 1∶20 g/mL，提取溫度 80℃，浸提時(shí)間 60min，浸提2次，在此條件下，多糖得率為30.0%。

黃參多糖；水提醇沉；苯酚-硫酸法

黃參作為藥食兩用植物，其中含有多種對人體有益的成分，蛋白質(zhì)、多糖、類胡蘿卜素和氨基酸含量豐富，有良好的營養(yǎng)價(jià)值和保健作用[1,2]。黃參多糖是黃參中最重要的生物活性成分之一[3]。本實(shí)驗(yàn)對黃參多糖的研究主要集中在黃參多糖的提取和抗氧化活性[4,5]。本文用水提醇沉法提取多糖，苯酚-硫酸法測定多糖含量，并結(jié)合單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)法確定最佳提取工藝[6]。

1 、材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

黃參(甘肅省張掖市山丹縣）,貯存于陰涼干燥處。

1.2 方法

1.2.1 對照品溶液的制備

精密稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的無水葡萄糖611.2mg，置于1000mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得611.2 mg/L的葡萄糖溶液。再精密吸取此溶液15 mL定容至25 mL，即得366.72mg/L的對照品溶液。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

精密吸取葡萄糖對照品溶液0.0， 0.3，0.6，0.9，1.2，1.5，1．8mL，分別置于25 mL比色管中，體積不足2 mL的用蒸餾水補(bǔ)足至2 mL，分別精密加入5%的苯酚溶液1 mL，濃硫酸3 mL，搖勻，置于沸水中加熱15 min，取出，放置于冷水冷卻5min，取出，于491.0nm波長處測定吸收度。以吸收度A為縱坐標(biāo)，以葡萄糖的濃度c為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為A=0.0047c-0.1025，R=0.9993。結(jié)果表明葡萄糖在55.008-330.048mg/L之間線性關(guān)系好。

1.2.3 黃參多糖的提取與精制

取產(chǎn)地為張掖的黃參樣品，經(jīng)60℃烘干，粉碎后，過3號篩，再于60℃烘干至恒重，精密稱取黃參粉末209紙包好置于索氏提取器中，經(jīng)石油醚回流提取脫脂、色素2次(3 h，3h)，棄去提取液，藥渣揮去溶媒后，經(jīng)80%的乙醇回流提取2次(4h，4h)。藥渣揮去溶媒后，加蒸餾水經(jīng)100℃水浴提取3次(250mL，200mL，200mL)，每次2h，合并藥液，抽濾濃縮后，用Sevage法離心脫蛋白(3000r/min)，得多糖液，裝入半透膜，滴水透析24h，加入無水乙醇使乙醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到80%，放置24h(4℃冰箱中)，取出離心(3000r/min)得多糖沉淀，再用丙酮、氯仿及無水乙醇洗滌2次，定容至100 mL。

1.2.4 黃參多糖的測定

取樣品溶液2mL，分別精密加入5%的苯酚溶液1mL，濃硫酸3mL，搖勻，置于沸水中加熱15min，取出，放置于冷水冷卻5min，取出，于491.0nm波長處測定吸收度。

2、 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 不同料液比對多糖提取率的影響

表1 不同料液比對多糖提取率的影響

由表1可知，料液比為1：20時(shí)多糖提取率最高，所以選取料液比1：20。

2.1.2 不同提取溫度對多糖提取率的影響

表2 不同提取溫度對多糖提取率的影響

由表2可知，浸提溫度為80℃時(shí)多糖提取率最高，所以選取浸提溫度為80℃。

2.1.3 不同提取時(shí)間對多糖提取率的影響

表3 不同提取時(shí)間對多糖提取率的影響

由表3可知，浸提時(shí)間為60min時(shí)多糖提取率最高，所以選取浸提時(shí)間為60min。

2.2 正交試驗(yàn)結(jié)果

表4 多糖提取正交試驗(yàn)因素水平

表5 正交試驗(yàn)結(jié)果

正交試驗(yàn)結(jié)果表明，黃參多糖提取的最佳組合水平為A1B2C2，即料液比1：20，提取溫度80℃，提取時(shí)間60min，經(jīng)實(shí)驗(yàn)得知在此組合下黃參多糖為30.0%。極差R的大小決定因素影響的主次順序?yàn)椋篟B＞RC＞RA，即提取溫度＞提取時(shí)間＞料液比。

3 、結(jié)論

黃參多糖的最佳提取工藝為：料液比 1∶20 g/mL，提取溫度 80℃，浸提時(shí)間 60min，浸提2次，在此條件下，多糖得率為 30.0%。黃參多糖也被視為極具開發(fā)利用潛力和應(yīng)用前景的多糖之一，但目前對黃參多糖的研究主要停留在對其提取純化工藝和簡單的抗氧化方面及藥理活性方面，而對其修飾工藝方法及修飾后產(chǎn)物的活性研究未見報(bào)道，這些問題還有待深入的研究。

[1] 闞建全主編.食品化學(xué)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社

[2] 李云雁主編.食品化學(xué)[M]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社

[3] 陳葉，陳天仁，羅光宏.黃參營養(yǎng)價(jià)值及加工工藝技術(shù)研究[J]．食品科技，2003 (11)：96-100.

[4] 李勇.生物活性肽研究現(xiàn)況和進(jìn)展[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè)，2007，33（1）：3-9.

[5] 郝果，田呈瑞.黃參的研究發(fā)展現(xiàn)狀[J]. 農(nóng)產(chǎn)品加工.學(xué)刊，2012（9）：82-86.

[6]扶慶權(quán)，華春，周峰，周泉澄.正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化馬蘭頭葉蛋白的提取工藝研究[J ]食品工業(yè)，2012,33（7）：48-49