鄧尚 陳竹綜述 馮剛 審校

(1.四川醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院骨科，四川 瀘州 646000; 2. 南充市中心醫(yī)院·川北醫(yī)學(xué)院第二臨床醫(yī)學(xué)院組織工程與干細(xì)胞研究所， 四川 南充 637000)

關(guān)節(jié)軟骨退行性變基因治療研究進展*

鄧尚1,2陳竹2綜述 馮剛2審校

(1.四川醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院骨科，四川 瀘州 646000; 2. 南充市中心醫(yī)院·川北醫(yī)學(xué)院第二臨床醫(yī)學(xué)院組織工程與干細(xì)胞研究所， 四川 南充 637000)

關(guān)節(jié)軟骨退行性變是臨床的常見病和多發(fā)病，缺損后依靠自身修復(fù)的能力很低?；蛑委煘檐浌峭诵行宰兊娜睋p修復(fù)提供了新的方向，基因轉(zhuǎn)染技術(shù)能使靶細(xì)胞大量表達軟骨生長調(diào)控因子，有效地促進軟骨生長和基質(zhì)合成，達到修復(fù)軟骨的目的。本文就基因治療技術(shù)中的目的基因、基因運載體及其在軟骨退變?nèi)睋p區(qū)作用的研究進展進行綜述。

關(guān)節(jié)軟骨退行性變; 基因治療; 目的基因; 載體

關(guān)節(jié)軟骨退行性變屬于骨科的常見多發(fā)病。由于正常的關(guān)節(jié)軟骨沒有血管及神經(jīng)的支持，軟骨細(xì)胞增殖能力低，營養(yǎng)支持主要依靠滑膜的彌散機制，損傷后難以自行修復(fù)，因此即使比較小的軟骨損傷也可能產(chǎn)生比較顯著的癥狀如進行性疼痛 、腫脹、功能障礙，最終發(fā)生關(guān)節(jié)的退行性變，導(dǎo)致骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)生[1]。軟骨修復(fù)是一個極其復(fù)雜的過程，目前有許多方法應(yīng)用于軟骨修復(fù)[2]，主要分為手術(shù)治療以及保守治療，前者包括軟骨下骨鉆孔術(shù)、鏡下清理和微骨折術(shù)、骨軟骨移植術(shù)、骨膜軟骨膜移植術(shù)等，后者包括口服藥物和局部注射。其效果主要暫時緩解疼痛，但關(guān)節(jié)軟骨的生物學(xué)性能不能完全恢復(fù)，且存在與手術(shù)、治療費用、長期預(yù)后等有關(guān)的問題[3]。隨著生物醫(yī)學(xué)工程的發(fā)展，基因治療技術(shù)逐漸引起人們重視，且重組基因成功轉(zhuǎn)導(dǎo)至軟骨細(xì)胞治療軟骨退變已應(yīng)用于臨床實驗中[4]。其基本原理是將目的基因修飾相關(guān)細(xì)胞，使其表達某些具有治療作用的基因產(chǎn)物，促進缺損處軟骨細(xì)胞的修復(fù)和增殖分化，并且可以在軟骨再生過程中持續(xù)、高效地分泌生長因子，完成修復(fù)過程。轉(zhuǎn)導(dǎo)的方式包括體內(nèi)途徑和體外途徑兩種方式[5]。本文就與軟骨退變損傷修復(fù)有關(guān)的生長因子基因、載體等相關(guān)問題展開綜述。

1 目的基因的選擇

軟骨細(xì)胞與軟骨退變?nèi)睋p有著相似的演變過程，而大量研究證實生長因子在自分泌和旁分泌機制的下通過信號或信使系統(tǒng)，作用于靶細(xì)胞受體，影響軟骨細(xì)胞的增殖、分化和基質(zhì)代謝活動，從而促進軟骨缺損的修復(fù)[6，7]。而這些調(diào)控生長因子的基因，結(jié)構(gòu)和作用機制不盡相同。

1.1 轉(zhuǎn)化生長因子-β(Transforming growth factor beta,TGF-β)基因 TGF-β是分子量25kDa，由二硫鍵鏈接的二聚體蛋白。通過TGF-β受體及其細(xì)胞內(nèi)信號系統(tǒng)將信號傳遞到細(xì)胞核內(nèi)而起到多種不同的生理調(diào)節(jié)作用[8]。TGF-β超家族常用于誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞分化為軟骨,也是體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化成軟骨方向的關(guān)鍵生長因子，在沒有加入TGF-β的定向培養(yǎng)基中骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞未能向軟骨方向轉(zhuǎn)化[9]。TGF-β能夠促進軟骨分化、增殖，并且阻止軟骨細(xì)胞的肥大，并能抑制軟骨膠原酶的表達[10]。Cheng Man等人[11]將轉(zhuǎn)染TGF-β基因到兔的右側(cè)下頜關(guān)節(jié)缺損處，左側(cè)注射生理鹽水對照，24周時實驗組可見一層結(jié)構(gòu)良好的纖維軟骨覆蓋缺損表面。RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染后12、24周實驗組合成代謝基因、蛋白聚糖、II型膠原蛋白表達較對照組明顯增加，但兩組的分解代謝基因表達無明顯差別。說明TGF-β主要作用是通過促進合成代謝因子的表達上調(diào)促使軟骨的修復(fù)，而對IL-1和蛋白聚糖酶等分解代謝因子的抑制作用并不明顯。Tchetina等[12]用TGF-β2、FGF-2和胰島素轉(zhuǎn)導(dǎo)至關(guān)節(jié)炎患者的膝關(guān)節(jié)軟骨培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)膠原酶降解作用明顯下調(diào)，而FGF-2和胰島素單獨使用不能抑制膠原蛋白的分解，TGF-β2卻能在低濃度下可抑制膠原的分解，且促使上調(diào)因子PGE2的表達增強，可見TGF具有選擇性抑制分解代謝的因子的作用，TGF-β2能作為II型膠原降解的治療手段之一，但是TGF誘導(dǎo)軟骨的安全性以及殘存的免疫原性等問題有待進一步的研究與證實。

1.2 骨形態(tài)發(fā)生蛋白(Bone morphogenetic protein,BMP)系列基因 BMP是一組分泌性、疏水性、酸性的糖蛋白，能誘導(dǎo)成骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞的分化成熟，在維持關(guān)節(jié)軟骨的形成以及軟骨缺損后的修復(fù)起著重要作用，其中起主要誘導(dǎo)作用的是骨形態(tài)發(fā)生蛋白2，4，7。Chubinskya[13]通過比較BMP-2、BMP-4、BMP-6和BMP-7及CDMP-1、CDMP-2等因子在人正常關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中的作用后,發(fā)現(xiàn)BMP家族刺激蛋白聚糖增殖的能力均比其他因子強，其中BMP-7作用最強，且具有抗白細(xì)胞介素1β分解蛋白聚糖的能力。Kakudo等[14]發(fā)現(xiàn)，BMP-2可誘導(dǎo)未分化的間充質(zhì)干細(xì)胞分化為軟骨細(xì)胞或者成骨細(xì)胞，提高細(xì)胞內(nèi)骨鈣蛋白、堿性磷酸酶、II型膠原mRNA的表達，并且通過表達VEGF，為骨組織內(nèi)的血管形成創(chuàng)造良好的生長環(huán)境。雖然BMP表現(xiàn)出較強的骨誘導(dǎo)活性，但是BMP進入體內(nèi)后易隨體液流失降解，半衰期短，且BMP具有強大的調(diào)控未分化間充質(zhì)細(xì)胞向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化的功用，在臨床應(yīng)用中使用BMP高劑量會提高關(guān)節(jié)腫脹、血腫及癌癥的風(fēng)險[15]。因此如何提高BMP在細(xì)胞中的作用持續(xù)時間、調(diào)控定向分化的能力，且選擇合適的治療劑量，將是一個值得繼續(xù)研究的方向。

1.3 胰島素樣生長因子( Insulin-like Growth Factor,IGF)基因 IGF-1和IGF-3是成骨細(xì)胞分化的正調(diào)節(jié)因子，可促進多種骨誘導(dǎo)因子分泌，促進骨鈣素分泌和骨結(jié)節(jié)的形成，主要在骨的礦物化過程中發(fā)揮重要作用。IGF-1是由70個基酸殘基組成的多肽，編碼IGF-1的基因位于16號染色體。Henning Madry等人[16]將lacZ和IGF-1基因分別轉(zhuǎn)染至軟骨細(xì)胞培養(yǎng)，體外培養(yǎng)后IGF-1轉(zhuǎn)染組細(xì)胞重量明顯較lacZ組多。再將培養(yǎng)的細(xì)胞經(jīng)聚乙醇酸支架轉(zhuǎn)導(dǎo)至兔軟骨缺損處。HE染色可見IGF-1組軟骨細(xì)胞比lacZ組多50%左右。免疫染色和免疫熒光檢測到II型膠原蛋白IGF-1組的表達強度為lacZ組的1.6倍。該實驗證明IGF-1基因的調(diào)控促進了軟骨的修復(fù)。

1.4 生長分化因子-5(growth differentiation factor-5,GDF-5)基因 GDF-5屬TGF-β超家族中的GDF亞家族，也稱BMP-14。GDF-5在軟骨發(fā)育初期主要是促進間充質(zhì)和前軟骨細(xì)胞在特定部位的聚集，在后期則促進軟骨細(xì)胞的分化、肥大。劉康[17]等人采用攜帶GDF-5的腺病毒誘導(dǎo)分化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,被感染的BMSCs細(xì)胞外基質(zhì)糖胺聚糖和蛋白聚糖的含量顯著增加,軟骨細(xì)胞具有特異性的Aggrecan和CollagenⅡ基因蛋白表達升高，說明了GDF-5能明顯促進骨髓間充質(zhì)細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化。Wulsten D[18]研究發(fā)現(xiàn)，GDF-5比BMP-2有更強的促軟骨分化能力，但是成骨分化能力較BMP-2弱。Coleman M[19]等人應(yīng)用GDF-5加入人骨髓間充質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)其促軟骨分化能力與劑量呈依賴效應(yīng)，當(dāng)劑量100ng/ml時軟骨分化能力最強。同時發(fā)現(xiàn)GDF-5能促進SMADs 1-5-8的磷酸化作用，而SMADs 1-5-8細(xì)胞內(nèi)的信號分子通路能促進后期的軟骨細(xì)胞肥大和礦化。此外，李戰(zhàn)梅等[20]在促脂肪干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞分化實驗中發(fā)現(xiàn)，100ng/ml的GDF-5濃度比常用的10ng/mlTGF-I的促分化作用更強。

2 載體的選擇

基因載體是指能將外源基因?qū)氚屑?xì)胞，并使其在靶細(xì)胞內(nèi)表達的病毒或DNA結(jié)構(gòu)。目前載體被分為病毒載體和非病毒載體兩大類[21]，病毒載體(viral vectors)病毒載體相比非病毒載體轉(zhuǎn)染率高、持續(xù)時間長的優(yōu)點，但是有插入突變及病毒感染的危險，且重組體進入宿主基因組產(chǎn)生激活不良腫瘤基因的可能性，影響基因治療效果[22]。

2.1 腺相關(guān)病毒 (Adeno-associatedvirus, AAV) AAV是一種非致病原，有較低的免疫源性，現(xiàn)已有多種AAV血清型，其不僅提高裝載率，同時能中和體液免疫反應(yīng)產(chǎn)生的抗體。AAV已被廣泛應(yīng)用于軟骨細(xì)胞基因治療的研究。Gang Feng等人[23]采用腺病毒介導(dǎo)的GDF-5轉(zhuǎn)入脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)Ⅱ型膠原和蛋白聚糖的表達增加，細(xì)胞外基質(zhì)增多，證實了脂肪干細(xì)胞具有向軟骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化的潛能。Kang等[24]通過腺病毒將 BMP-7轉(zhuǎn)入脂肪干細(xì)胞培養(yǎng)，有效轉(zhuǎn)染率高達99%，再將轉(zhuǎn)染后的脂肪干細(xì)胞植入大鼠體內(nèi)，并于3周后即形成新生骨。腺病毒感染細(xì)胞后，初期可獲得高效表達，但由于病毒DNA并不整合到宿主基因染色體上，隨著時間的增長，表達量會逐漸下降，其編碼的病毒蛋白有誘導(dǎo)免疫反應(yīng)的可能，并且重組過程復(fù)雜，限制了其在基因治療中的應(yīng)用。

2.2 慢病毒載體 (Lentiviral vector，LV) 多數(shù)慢病毒載體是基于I型人免疫缺陷病毒(HIV)基因改造產(chǎn)生的，其最大的特點是可以感染非分裂期細(xì)胞，如神經(jīng)細(xì)胞、造血干細(xì)胞、肝細(xì)胞等，整合到宿主基因組，實現(xiàn)基因穩(wěn)定長效表達，感染效率高，容納外源性目的基因的片段大，免疫原性小，生物安全性好。Yongchang Yao等人[25]通過慢病毒載體攜帶TGF-β3基因聯(lián)合膠原蛋白-I的沉默基因shRNA，成功促進對豬的軟骨細(xì)胞再分化的三維培養(yǎng)，該結(jié)果說明慢病毒載體可攜帶基因通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)治療關(guān)節(jié)軟骨的退變。慢病毒還具有操作簡便等優(yōu)點，使其成為體內(nèi)、外基因轉(zhuǎn)移的一種有效工具，但有引起插入突變的風(fēng)險,且該病毒的特殊來源亦是潛在危險因素之一。

2.3 非病毒載體(Non-viral vectors) 非病毒基因載體轉(zhuǎn)移包括顯微注射法、電穿孔法、微粒轟擊法(基因槍)、脂質(zhì)體法或者使用未結(jié)合的裸DNA法等。改良陽離子脂質(zhì)體和FuGene6是兩種已被用于軟骨修復(fù)重建的基因傳遞的兩種載體，非病毒載體不會出現(xiàn)重組體復(fù)制出活性病毒而引起其他疾病的可能，重復(fù)使用不會引起免疫反應(yīng)或者僅有較弱的反應(yīng)，制作較病毒載體容易[26]。但是非病毒類載體的轉(zhuǎn)染效率常較病毒類載體低，轉(zhuǎn)染后以游離形式存在于目的細(xì)胞中，基因持續(xù)表達時間較短，一定程度上限制了其應(yīng)用。

2.4 微球載體 (Microspheres Vectors) 近年來可生物降解的微球載體因為其治療藥物的靶向運輸傳導(dǎo)，且對人體更弱的毒副作用受到組織工程的極大關(guān)注[27]。通過酸的冷凍干燥制得多孔殼聚糖微球以其特有的聚陽離子性、安全無毒和多功能性，應(yīng)用于各個領(lǐng)域[28]。其在軟骨退變?nèi)睋p修復(fù)的實驗研究中也廣泛使用，Sukarto A等[29]人利用殼聚糖復(fù)合水凝膠微球材料裝載BMP-6、TGF-β3和人脂肪干細(xì)胞在軟骨基礎(chǔ)培養(yǎng)基中培育，發(fā)現(xiàn)微球裝載生長因子聯(lián)合培養(yǎng)脂肪干細(xì)胞的分化軟骨細(xì)胞的能力明顯強于直接加生長因子于培養(yǎng)基中的脂肪干細(xì)胞的分化能力。Zhao J等人[30]將殼聚糖納米微球結(jié)合針對沉默MMP-3和-13DNA的shRNA，再將微球-質(zhì)粒結(jié)合體轉(zhuǎn)染至軟骨細(xì)胞中，觀察MMP-3和-13促進軟骨細(xì)胞的去分化影響得到明顯抑制，軟骨細(xì)胞的生長能力進一步增強。

3 小結(jié)與展望

目前關(guān)節(jié)軟骨退變?nèi)睋p的基因治療無論在實驗和臨床階段，修復(fù)組織的質(zhì)量與穩(wěn)定性比原生的軟骨組織的仍有差距。關(guān)節(jié)軟骨損傷修復(fù)的影響因素眾多，就生長因子來說，往往是多種因子共同作用而不是單一因子單獨作用導(dǎo)致病變的發(fā)生。多基因聯(lián)合轉(zhuǎn)導(dǎo)以及根據(jù)不同目的去調(diào)控基因的表達時間和量是將來基因治療的發(fā)展方向，未來的挑戰(zhàn)將是根據(jù)修復(fù)的具體的方面選擇最合適高效的組合[31]。隨著對基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng)的深入研究，更高的安全性及高效率的轉(zhuǎn)染表達的載體將會提高基因的治療效果。就現(xiàn)有成果來看，基因治療對于關(guān)節(jié)軟骨退變?nèi)睋p修復(fù)具有一定的可行性。隨著對關(guān)節(jié)軟骨病理生理研究的逐步深入，治療基因、基因遞送系統(tǒng)和載體以及轉(zhuǎn)染調(diào)控的進一步發(fā)展完善。雖然基因治療短期內(nèi)不能用于臨床，但是對于治療因子長期轉(zhuǎn)染作用于缺損處的治療將會有著重大的突破和光明的前景[32]，為臨床的治療提供一個更加令人滿意的未來。

[1]Li LC, Chang SJ. Repair of Chondral Defects With Allogenous Chondrocyte-Seeded Hyaluronan/Collagen II Microspheres in a Rabbit Model[J]. Artif Organs, 2012, 36(4):102-109.

[2]McAlindon T, Zucker NV, Zucker MO. 2007 OARSI recommendations for the management of hip and knee osteoarthritis: towards consensus[J]? Osteoarthritis Cartilage, 2008, 16(6):636-637.

[3]Berenbaum F. New horizons and perspectives in the treatment of osteoarthritis[J]. Arthritis Res Arthritis Res Ther, 2008, 10 (2)2: S1.

[4]Cucchiarini M, Madry H.Gene therapy for cartilage defects[J]. J Gene Med, 2005, 7(12): 1495-1509.

[5]Richter W. Mesenchymal stem cells and cartilage in situ regeneration[J]. J Intern Med, 2009, 266(4): 390-405.

[6]Shi S, Mercer S. Growth Factor Transgenes Interactively Regulate Articular Chondrocytes[J]. J Cell Biochemistry, 2013, 114(4): 908-919.

[7]Forriol F. Growth factors in cartilage and meniscus repair[J]. Injury, 2009, 40(3):12-16.

[8]Cui L, Wu Y, CenLian,etal. Repair ofarticular catri-lagedefectin non-weightbearing are asusing adipose deirved stem cells loaded polyglycolic acid mesh[J]. Biomateirals, 2009, 30(14): 2683-2693.

[9]Huang AH, Motlekar NA, Stein A, et al. High-throughput screening for modulators of mesenchymal stem cell chondrogenesis[J]. Ann Biomed Eng, 2008, 36(11): 1909-1921.

[10] Fan J, Gong Y, Ren L, et a1. In vitro engineered cartilage sing synovium-derived mesenehymal stemcells with injectable gellan hydrogels[J]. ActaBiomater，2010, 6(3): 1178-1185.

[11] Man C, Zhu S, Zhang B,etal. Protection of articular cartilage from degeneration by injection of transforming growth factor-beta in temporomandibular joint osteoarthritis[J]. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod, 2009, 108(3):335-340.

[12] Tchetina EV, Antoniou J, Tanzer M,etal. Transforming growth factor-beta2 suppresses collagen cleavage in cultured human osteoarthritic cartilage, reduces expression of genes associated with chondrocyte hypertrophy and degradation, and increases prostaglandin E(2)production[J]. Am J Pathol, 2006, 168(1): 131-140.

[13] Chubinskya S，Segalite ED，Pikovsky D，etal. Effects induced by BMPS in cultures of human articular chondrocytes: Comparative studies[J]. Growth Factors, 2008, 26( 5) : 275-283.

[14] Kakudo N, Kusumoto K, Wang YB,etal. Immunolocalization of vascular endothelial growth factor on intramuscular ectopic osteoinduction by bone morphogenetic protein-2[J]. Life Sci, 2006, 79(19): 1847 -1855.

[15] Carreira AC, Lojudice FH, Halcsik E,etal. Bone Morphogenetic Proteins: Facts, Challenges, and Future Perspectives[J]. J Dent Res, 2014 Jan 3.

[16] Madry H, Kaul G, David Zurakowskietal. Cartilage constructs engineered from chondrocytes overexpressing IGF-I improve the repair of osteochondral defects in a rabbit model[J]. Eur Cell Mater, 2013, 25:229-247.

[17] 劉康，白亦光，馮 剛.生長分化因子5誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨細(xì)胞的實驗研究[J].西部醫(yī)學(xué)，2013, 8(25): 1128-1131.

[18] Wulsten D, Glatt V, Ellinghaus A,etal.Time kinetics of bone defect healing in response to BMP-2 and GDF-5 characterised by in vivo biomechanics[J]. Eur Cell Mater, 2011, 21: 177-192.

[19] Coleman M, Vaughan EE, Browe DC,etal. Growth Differentiation Factor-5 Enhances In Vitro Mesenchymal Stromal Cell Chondrogenesis and hypertrophy[J]. Stem Cells Dev, 2013, 22(13): 1968-1976.

[20] 李戰(zhàn)梅，劉康，馮剛, 等. 生長分化因子5促進脂肪干細(xì)成軟骨分化的實驗研究[J]. 西部醫(yī)學(xué), 2010，8(22)t1380- 1384.

[21] Steinert AF, N?th U, Tuan RS,etal. Concepts in gene therapy for cartilage repair[J]. Injury, 2008, 39(1): 97-113.

[22] Madry H, Cucchiarini M. Clinical potential and challenges of using genetically modified cells for articular cartilage repair[J]. Croat Med J, 2011, 52(3):245-261.

[23] Gang F, Yuqing W, Gary B,etal. Adenovirus-mediated expression of growth and differentiation factor-5 promotes chondrogenesis of adipose stem cells[J]. Growth Factors, 2008, 26(3): 132-142.

[24] Kang Y, Liao WM, Yuan ZH,etal. In vitro and in vivo induction of bone formation based on adeno-associated virus -mediated BMP-7 gene therapy using human adipose-derived mesenchymal stem Cells[J]. Acta Pharmacol Sin, 2007, 28(6): 839 -849.

[25] Yao Y, Zhang F, Pang PX,etal. In vitro study of chondrocyte redifferentiation with lentiviral vector-mediated transgenic TGF-β3 and shRNA suppressing type I collagen in three-dimensional culture[J]. J Tissue Eng Regen Med, 2011, 5(8): 219-227.

[26] Madry H, Kaul G, Cucchiarini M,etal. Enhanced repairof articular catrilage defects in vivo by transplanted chondrocytes overexpressing insulin-likegrowth factor I (IGF-I)[J]. Gene Ther, 2005, 12(15): 1171-1179.

[27] Pisal DS, Kosloski MP, Balu-Iyer SV. Delivery of therapeutic proteins[J]. Pharm Sci, 2010, 99(6): 2557-2575.

[28] Lu GY, Sheng BY, Wei YJ,etal. Collagen nanofiber-covered porous biodegradable carboxymethyl chitosan microcarriers for tissue engineering cartilage[J]. Eur Polym J, 2008, 44(9): 2820-2829.

[29] Sukarto A, Yu C, Flynn LE, Amsden BG,etal. Co-delivery of adipose-derived stem cells and growth factor-loaded microspheres in RGD-grafted N-methacrylate glycol chitosan gels for focal chondral repair[J]. Biomacromolecules, 2012, 13(8): 2490-2502.

[30] Zhao J, Fan X, Zhang Q, Sun Fetal. Chitosan-plasmid DNA nanoparticles encoding small hairpin RNA targeting MMP-3 and -13 to inhibit the expression of dedifferentiation related genes in expanded chondrocytes[J]. J Biomed Mater Res A, 2014, 102(2):373-380.

[31] Steinert AF, N?th U, Tuan RS. Concepts in gene therapy for cartilage repair[J]. Injury, 2008, 39(1): 97-113.

[32] Demange MK, Sisto M, Rodeo S. Future trends for unicompartmental arthritis of the knee: injectables & stem cells[J]. Clin Sports Med, 2014, 33(1):161-174.

職稱晉升對醫(yī)學(xué)論文“論著”的認(rèn)定標(biāo)準(zhǔn)介紹

參照四川省衛(wèi)生和計劃生育委員會川衛(wèi)辦發(fā)[2015]104號文件中關(guān)于“衛(wèi)生專業(yè)技術(shù)人員申報高級專業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格……”的通知精神及國家標(biāo)準(zhǔn)對科技學(xué)術(shù)論文的要求，現(xiàn)就醫(yī)學(xué)論文“論著”的認(rèn)定標(biāo)準(zhǔn)介紹于下：

1 “論著”是醫(yī)學(xué)論文體裁中常見的一種表現(xiàn)形式(以下簡稱醫(yī)學(xué)“論著”)，具有特定的概念，它是作者將自己在科研、臨床、教學(xué)中的科學(xué)發(fā)現(xiàn)和技術(shù)創(chuàng)新的成果、經(jīng)驗、體會，以嚴(yán)密的邏輯論證、規(guī)范形成的文字作品，是醫(yī)學(xué)論文中最具典型性和代表性的文體。

2 醫(yī)學(xué)“論著”應(yīng)具有四大特點：①在寫作的格式上有比較規(guī)范的要求，包括：中英文文題、作者姓名(拼音)、作者單位、屬地、郵編，符合文題內(nèi)容要求的結(jié)構(gòu)式摘要(包括：目的、方法、結(jié)果、結(jié)論四項)、關(guān)鍵詞(3～8個)；正文包括前言(引言)、資料(材料、實驗、對象)與方法、結(jié)果、討論和結(jié)論及參考文獻(本刊要求15條以上)等各項內(nèi)容；“論著”字?jǐn)?shù)應(yīng)在4000字以上(含表、圖所占的版面相應(yīng)字?jǐn)?shù)，本刊要求6000字以上)。②醫(yī)學(xué)“論著”是作者從自己已占有的基本素材(第一性資料)出發(fā)，經(jīng)過科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)卣?、加工、分析、論證，得出論點并形成規(guī)范性的文字作品。③醫(yī)學(xué)“論著”所表達的結(jié)論比較明確、可信，論文質(zhì)量與學(xué)術(shù)價值較高。④醫(yī)學(xué)“論著”應(yīng)為一次性文獻(含循證醫(yī)學(xué)的系統(tǒng)評價)。

3 醫(yī)學(xué)“論著”的認(rèn)定：論文的文體結(jié)構(gòu)具備“論著”所要求的各項規(guī)范內(nèi)容及特點，同時刊載于公開發(fā)行的合法主流期刊(非增刊、內(nèi)刊或?qū)W術(shù)會議的論文集)上，不論刊載期刊是否設(shè)置“論著”欄，均認(rèn)定該論文體裁屬“論著”。如果該論文不具備“論著”所要求的各項規(guī)范內(nèi)容及特點，即使該論文被編排于“合法”刊物的“論著”欄目內(nèi)，也不能認(rèn)定該論文屬“論著”。

《西部醫(yī)學(xué)》2007年第6期1218～1221頁上刊發(fā)有一篇專論：《關(guān)于醫(yī)學(xué)論文的“論著”界定原則與晉升職稱申報中對“論著”要求的探討》及《西部醫(yī)學(xué)》“讀者·作者·編者”欄目和網(wǎng)站www.xbyxqk.cn等對“論著”撰寫格式與基本項目的要求等介紹均極具學(xué)習(xí)、借鑒價值，特推薦讀者、作者參閱。

(本刊編輯部)

Research progress of gene therapy on articular cartilage degeneration

DENG Shang1,2,CHEN Zhu2reviewingFENG Gang2cheking

(1.TheAffiliatedHospitalofSichuanMedicalUniversity,Luzhou646000,Sichuan,China; 2.InstituteofTissueEngineeringandStemCells,NanchongCentralHospitalandTheSecondClinicalInstituteofNorthSichuanMedicalCollege,Nanchong637000,Sichuan,China)

Articular cartilage degeneration is a common disease, but self repair capacity is very low. Gene therapy provides a new direction for repairing cartilage degeneration, gene transfection technology can make the target cell expression of cartilage growth regulating factor, effectively promote the growth and repair of cartilage matrix synthesis of cartilage to achieve the purpose. In this paper, The aim of this review is to summarize the target gene, gene vector and the appropriate role in the degeneration of cartilage defect areas in gene therapy.Currently cartilage degeneration gene therapy is still in the experimental stage. To repair cartilage gene transfection technology promotes target cells to express cartilage growth regulatory factor and results in cartilage growth and matrix synthesis. Gene therapy provides a new method for the cartilage defect repairment.

Articular cartilage degeneration; Gene therapy; Target gene; Carrier

國家自然科學(xué)基金項目(81201407，81171472)

馮剛，教授，《西部醫(yī)學(xué)》副主編，E-mail:fenggangncch@gmail.com

R 684.3

A

10.3969/j.issn.1672-3511.2015.06.052

2014-05-22； 編輯： 張文秀)