王新征 劉金彪 侯永強(qiáng) 王寧 王明軍

PDGF-B在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)及意義

王新征 劉金彪 侯永強(qiáng) 王寧 王明軍

目的 探討血小板源性生長因子B鏈(PDGF-B)在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)及其意義。方法 免疫組織化學(xué)染色檢測甲狀腺乳頭狀癌組織(甲狀腺乳頭狀癌病例組, n=35)和正常的甲狀腺組織中(正常甲狀腺組)PDGF-B的表達(dá)差異。結(jié)果 甲狀腺乳頭狀癌病例組(HSCORE中位數(shù)=1.92, SEM=0.46)與正常甲狀腺組(HSCORE中位數(shù)=0.38, SEM=0.05)PDGF-B鏈的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。PDGF-B鏈在甲狀腺乳頭狀癌病例組中較正常甲狀腺組明顯過度表達(dá)。甲狀腺乳頭狀癌組陽性率68.6%, 而正常甲狀腺組陽性率僅為17.1%。結(jié)論 PDGF-B在甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)病和發(fā)展中起到了一定的作用, PDGF很有希望成為甲狀腺乳頭狀癌的一個(gè)潛在輔助診斷因子及治療靶點(diǎn)。

血小板源性生長因子；甲狀腺乳頭狀癌；免疫組織化學(xué)

甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid cancer, PTC)是最常見的甲狀腺惡性甲狀腺腫瘤［1］, 盡管其特征性腫瘤呈乳頭狀排列,毛玻璃樣核、核溝、核內(nèi)包涵體等對診斷具有重要價(jià)值,但是臨床工作中常出現(xiàn)甲狀腺微小乳頭狀癌及濾泡上皮乳頭狀增生難以鑒別的病例,成為目前診斷的難點(diǎn),本實(shí)驗(yàn)的目的是通過免疫組化技術(shù)檢測甲狀腺乳頭狀癌組織中血小板源性生長因子B鏈(platelet-derived growth factor-B, PDGF-B)蛋白的表達(dá), 初步探討PDGF與甲狀腺乳頭狀癌的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 35例甲狀腺乳頭狀癌組織標(biāo)本取自河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院2008～2012年行甲狀腺癌根治術(shù)患者存檔的石蠟塊, 其中男9例, 女26例, 年齡11～74歲, 患者術(shù)前均未經(jīng)過任何抗腫瘤治療, 術(shù)后經(jīng)病理檢驗(yàn)證實(shí)為甲狀腺乳頭狀癌。35例正常的甲狀腺組織標(biāo)本取自中山大學(xué)第一附屬醫(yī)院2008～2012年甲狀腺腺瘤或節(jié)結(jié)性甲狀腺腫手術(shù)患者切除標(biāo)本的存檔石蠟塊中相對正常的甲狀腺組織, 其中男6例, 女29例, 年齡16～73歲。

1.2 試劑及染色方法 兔抗人血小板源性生長因子B鏈多克隆抗體購自武漢博士德公司；二抗選用DAKO公司GK50075 EnVision兩步法試劑盒。所有標(biāo)本均5 μm厚連續(xù)切片。切片常規(guī)脫臘后行常規(guī)HE染色, 鏡下觀察鑒定病變性質(zhì)及部位, 以確定所采用的標(biāo)本的正確性。免疫組化染色檢測按EnVision兩步法試劑盒說明操作, 用TBS液代替一抗作為陰性對照。

1.3 分析方法 先在10×10倍光鏡下觀察免疫組化玻片染色結(jié)果, 隨機(jī)選取10個(gè)細(xì)胞分布較均勻的視野, 每個(gè)視野在4×100下隨機(jī)計(jì)數(shù)50個(gè)細(xì)胞。根據(jù)細(xì)胞棕黃色著色的強(qiáng)度按下列記分方法分為4個(gè)等級：0分=無著色, 1分=輕度著色, 2分=中度著色, 3分=強(qiáng)著色, 然后按公式HSCORE=Σ(i+1)Pi(這里i=1, 2, 3, Pi=評分為i的細(xì)胞/該例標(biāo)本總觀察細(xì)胞×100%)計(jì)算得到的HSCORE (histochemical score)得分［2,3］代表該張切片PDGF-B鏈蛋白表達(dá)的水平進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,該評分法考慮到了單個(gè)細(xì)胞是否陽性及其強(qiáng)弱,更具體更全面的反應(yīng)細(xì)胞的蛋白表達(dá)情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SAS8.1統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

PDGF-B鏈主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞的胞漿中, 在細(xì)胞膜上也有表達(dá), 而在癌旁的間質(zhì)中很少表達(dá)。甲狀腺乳頭狀癌病例組(HSCORE中位數(shù)=1.92, SEM=0.46)與正常甲狀腺組(HSCORE中位數(shù)=0.38, SEM=0.05)PDGF-B鏈的表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。PDGF-B鏈在甲狀腺乳頭狀癌病例組中較對照組明顯過度表達(dá)。設(shè)定HSCORE得分≥0.6分者為陽性, 則病例組陽性率68.6%, 而對照組陽性率僅為17.1%。

3 討論

甲狀腺乳頭狀癌發(fā)病率約占全身惡性腫瘤的1%～2%,且呈逐年上升趨勢,尤其以女性明顯增加,對人類健康危害極大［4-6］。甲狀腺癌的具體病因尚不明確,臨床研究及流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)射線輻射、激素影響、攝入碘量等因素與其發(fā)病有關(guān)。但這些因素如何作用于細(xì)胞導(dǎo)致腫瘤發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制目前尚不清楚。

PDGF是目前人們研究較多的一種生長因子。目前國外的研究結(jié)果顯示PDGF促進(jìn)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化和腫瘤生長的作用很可能是通過腫瘤細(xì)胞中形成的PDGF的自分泌回路等機(jī)制過度激活PDGF受體介導(dǎo)的受體酪氨酸蛋白激酶細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路從而引起細(xì)胞的增殖轉(zhuǎn)化。另外越來越多的資料顯示PDGF與腫瘤新生血管的形成關(guān)系密切［7］。PDGF及其受體在腫瘤組織間液高壓的形成中起著重要作用, 而組織間液壓力(interstitial fluid pressure, IFP)較正常組織升高是許多實(shí)體性腫瘤共有的特點(diǎn)。這些都提示了PDGF在多種惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中所起的重要作用, 是很有前途的分子水平腫瘤治療干預(yù)措施的靶向。但目前PDGF與甲狀腺乳頭狀癌的關(guān)系仍不明了, 試驗(yàn)結(jié)果顯示PDGF-B在甲狀腺乳頭狀癌中存在過度表達(dá), 其表達(dá)在甲狀腺乳頭狀癌與正常甲狀腺組織之間的差異明顯, 提示PDGF-B在甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)病和發(fā)展中起到了一定的作用。聯(lián)系到PDGF在其他多種惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中所起的重要作用, PDGF很有希望成為甲狀腺乳頭狀癌的一個(gè)潛在輔助診斷因子及治療靶點(diǎn)。

［1］ 夏宏才, 張佃乾, 陳叢緒, 等.甲狀腺乳頭狀癌并頸淋巴結(jié)廣泛轉(zhuǎn)移的外科治療.中國普通外科雜志, 1995(6):39.

［2］ 凌啟柏.放療后發(fā)生的甲狀腺乳頭狀癌的治療.國際外科學(xué)雜志, 1981(2):78.

［3］ 袁維堂,范正軍,王慶兆.分化型甲狀腺癌再次手術(shù)的評價(jià).中國醫(yī)刊, 1997(11):156.

［4］ 佟杰,羅杰,笪冀平,等. 甲狀腺乳頭狀增生活躍與微小乳頭狀癌的診斷與鑒別診斷.診斷病理學(xué)雜志, 2011, 18(3):173-177.

［5］ 李琦,陳麗華,宋朝君,等.甲狀腺球蛋白免疫組織化學(xué)在甲狀腺癌診斷中的應(yīng)用.中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志, 2008 , 17(4):375-376.

［6］ 張立海,王嬌,孟凡石,等.MTA1基因在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)及其臨床意義.黑龍江醫(yī)藥科學(xué), 2006, 29(6):55-56.

［7］ 陳云新,沈丹華,孫昆昆,等. 甲狀腺微小乳頭狀癌中Galectin-3、CK19、HBME-1和CD56的表達(dá)及意義.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志, 2010, 26(4):425-428.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.03.023

2014-09-23］

471000 河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院普外三科