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        眠安方對小鼠鎮(zhèn)靜催眠作用的實驗研究

        2015-02-01 06:24:46李靜楊文明陳幸生
        世界睡眠醫(yī)學(xué)雜志 2015年4期
        關(guān)鍵詞:鎮(zhèn)靜

        李靜 楊文明 陳幸生

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        眠安方對小鼠鎮(zhèn)靜催眠作用的實驗研究

        李靜楊文明陳幸生

        【摘要】目的觀察眠安方灌胃給藥后對小鼠的鎮(zhèn)靜催眠作用。方法采用閾上和閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠的方法,觀察眠安方不同劑量對小鼠自主活動及睡眠時間等影響。結(jié)果眠安方能明顯減少小鼠自主活動次數(shù),增加閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠只數(shù),改善閾上劑量戊巴比妥鈉致小鼠睡眠時間。結(jié)論眠安方有明顯的鎮(zhèn)靜催眠作用。

        【關(guān)鍵詞】眠安方;鎮(zhèn)靜;催眠

        失眠是指患者對睡眠時間和(或)質(zhì)量不滿足,并影響白天社會功能的一種主觀體驗。輕者入睡困難,或入睡后易被驚醒,醒后不能再入睡;嚴(yán)重者可徹夜不眠,常伴有頭痛、頭暈、健忘等。2011年美國調(diào)查資料顯示,成人和青少年中睡眠障礙發(fā)病率高達(dá)20%左右[1],而在我國,隨著社會發(fā)展,生活節(jié)奏加快,失眠的發(fā)病率呈逐年上升趨勢。失眠已成為全球性日益嚴(yán)重的社會和醫(yī)學(xué)問題。治療失眠的西藥易產(chǎn)生耐藥性、戒斷性、成癮性等不良反應(yīng),發(fā)揮中醫(yī)藥特色,尋求安全高效的藥物治療,具有重要的研究價值和現(xiàn)實意義,我們在長期的臨床工作中,根據(jù)中醫(yī)傳統(tǒng)理論,總結(jié)出治療失眠的中藥復(fù)方藥――眠安方,取得較好的臨床療效。為進(jìn)一步研究該方的藥物效應(yīng),我們開展了眠安方對小鼠鎮(zhèn)靜催眠作用進(jìn)行實驗研究,以期為該方的臨床干預(yù)提供實驗依據(jù)。

        1材料與方法

        1.1實驗動物昆明種小鼠,雌雄各半,體重(20±2)g,安徽中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供。

        1.2實驗用藥眠安方組成:黃連6 g、牡丹皮12 g、山梔子10 g、郁金12 g、酸棗仁30 g、茯神12 g、珍珠母30 g等,由安徽中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院提供,珍珠母先煎20 min,再與方中其他藥物按常規(guī)方法(以上方藥加5倍于藥材的溫水,浸泡20 min后,微火煎煮30 min,文火煎20 min,濾出藥渣),將藥液濃縮成每毫升含生藥0.5 mg和1 mg的藥液,滅菌后4 ℃保存?zhèn)溆?。地西泮片研碎配成相?yīng)濃度的混懸液備用[2]。

        1.3儀器設(shè)備ZYC-1小鼠自由活動儀,由安徽省濉溪正華教學(xué)實驗器械廠生產(chǎn)。

        1.4分組及給藥方法小鼠在實驗室內(nèi)適應(yīng)4 d后,隨機分為正常組、眠安方低劑量組、眠安方中劑量組、眠安方高劑量組、地西泮組共5組,每組12只。正常組予以蒸餾水,眠安方低劑量組予以5 g/kg灌胃給藥,眠安方中劑量組予以10 g/kg,眠安方高劑量組予以20 g/kg[3],地西泮組予以地西泮水溶液(0.2 mg/kg)灌胃給藥,連續(xù)給藥7 d。

        1.5小鼠自主活動小鼠分組同上,灌胃藥物劑量及體積同上,連續(xù)給藥7 d。末次給藥后1 h,將小鼠放入自主活動儀中,待小鼠適應(yīng)5 min后,記錄2 min內(nèi)自主活動的次數(shù),連續(xù)2次,取平均值進(jìn)行結(jié)果的統(tǒng)計分析。

        1.6對閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠入睡只數(shù)的影響[4]分組同上,灌胃體積及劑量同上,連續(xù)給藥7 d。于末次給藥1 h后,小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉20 mg/kg(預(yù)實驗測得使90%~100%的小鼠翻正反射不消失的最大劑量),觀察30 min內(nèi)有多少動物翻正反射消失達(dá)1 min以上,如超過1 min即為發(fā)生睡眠。計算各給藥組入睡率。

        1.7對閾上劑量戊巴比妥鈉睡眠時間的影響分組同上,灌胃體積及劑量同上,連續(xù)給藥7 d。于末次給藥60 min后,小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉38 mg/kg(預(yù)實驗測得引起100%小鼠睡眠的最小閾劑量)。觀察動物給藥后是否會出現(xiàn)活動減少、安靜、嗜睡或睡眠,睡眠以翻正反射消失為指標(biāo),觀察小鼠的入睡潛伏時間(翻正反射消失時間)及睡眠持續(xù)時間(翻正反射消失至恢復(fù)的時間)[5]。

        2結(jié)果

        2.1眠安方對小鼠自主活動的影響眠安方對小鼠自主活動的影響:眠安方中劑量組、眠安方高劑量組與地西泮組均能降低小鼠2 min內(nèi)活動次數(shù)。眠安方高劑量組與地西泮組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),表明眠安方高劑量組與地西泮組療效相當(dāng)。見表1。

        表1 眠安方對小鼠自主活動次數(shù)的影響±s)

        注:與正常組比較,aP<0.05,bP<0.01;與地西泮組比較,cP>0.05。

        2.2眠安方對閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠入睡只數(shù)的影響與正常組比較,眠安方中劑量組、眠安方高劑量組、地西泮組均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01),表明眠安方中劑量組、眠安方高劑量組、地西泮組均能提高小鼠入睡率。與地西泮組比較,眠安方中劑量組在提高小鼠入睡率與地西泮組差別無統(tǒng)計學(xué)意義,而高劑量組作用優(yōu)于地西泮組(P<0.05)。眠安方對閾下劑量戊巴比妥鈉致小鼠入睡只數(shù)的影響,見表2。

        表2 眠安方對閾下劑量戊巴比妥鈉小鼠入睡的影響

        注:與正常組比較,aP<0.05,bP<0.01;與地西泮組比較,cP<0.05。

        2.3眠安方對閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠睡眠時間的影響與正常組比較,眠安方中劑量組、眠安方高劑量組、地西泮組均能縮短小鼠入睡潛伏時間,延長睡眠持續(xù)時間,并有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01),表明眠安方中劑量組、高劑量組、地西泮組均能改善小鼠閾上劑量戊巴比妥鈉睡眠時間。地西泮組優(yōu)于眠安方低、中劑量組,而眠安方高劑量組與地西泮組無差別。見表3。

        表3 眠安方對閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠

        注:與地西泮組比較,aP<0.01,bP<0.05;與正常組比較,cP<0.01,dP<0.05。

        3結(jié)論

        《內(nèi)經(jīng)》將失眠稱為“目不瞑”“不得眠”“不得臥”。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為失眠病機總屬營衛(wèi)失和,陽不入陰;精虧血虛,臟不藏神;病有虛實之分,虛乃五臟精氣虧虛,臟不藏神;實為邪氣阻滯,陽不入陰;致使陽盛陰衰,陰陽失交,其中虛證為多。并明確指出“陽不入陰”是失眠癥的總病機,“氣血虛弱”是失眠癥發(fā)病的內(nèi)在因素,“邪氣侵襲”是導(dǎo)致失眠的外在因素。我們通過大量的臨床研究發(fā)現(xiàn),失眠涉及心肝二臟,病機關(guān)鍵在火,為心肝火旺所致,心肝火旺是引起失眠的關(guān)鍵病機,從心肝二臟治療失眠癥,往往能夠取得較為滿意的臨床療效。眠安方為楊文明教授經(jīng)驗方,是針對失眠心肝火旺病機而設(shè),可起到清肝瀉火,寧心安神的作用。在臨床應(yīng)用多年,療效較好。本方主要由黃連、牡丹皮、山梔子、郁金、酸棗仁、茯神、珍珠母等藥組成。方中黃連泄中焦之火,清心經(jīng)之熱,為君藥;牡丹皮、山梔為清肝瀉火之要藥;重用酸棗仁以其性甘平,入心肝二經(jīng),養(yǎng)血補肝,寧心安神,與牡丹皮、山梔共為臣藥;郁金疏肝解郁;肝病又最易傳脾,脾胃不和而臥不安,佐以茯神健脾寧心安神;珍珠母鎮(zhèn)驚安神,平肝潛陽。諸藥合用,肝火得清,肝郁得解,心神得寧,失眠自愈。我們在臨床研究基礎(chǔ)上,開展了對該的藥效學(xué)研究,結(jié)果顯示,眠安方能顯著減少小鼠自主活動次數(shù),增加閾上劑量戊巴比妥鈉所致小鼠睡眠只數(shù),縮短閾上劑量戊巴比妥鈉小鼠入睡潛伏時間,延長睡眠持續(xù)時間。表明眠安方具有顯著的鎮(zhèn)靜、催眠作用,為失眠從心肝火旺診治提供了實驗依據(jù)。

        參考文獻(xiàn)

        [1]Thomas Roth,Catherine Coulouvrat,Goeran Hajak,et al.Prevalence and perceived health associated with insomnia based on DSM-IV-TR; International Statistical Classification of Diseases and Related Health Problems,Tenth Revision; and Research Diagnostic Criteria/International Classification of Sleep Disorders,Second Edition criteria:results from the America Insomnia Survey[J].Biological Psychiatry,2011,69(6):592-600.

        [2]新世紀(jì)全國高等中醫(yī)藥院校規(guī)劃教材.中藥藥理學(xué)[M].上海:上海科技出版社,2008:193-196.

        [3]徐叔云,卞如濂,陳修.藥理實驗方法學(xué)[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2001:459-464.

        [4]方福德,周呂,丁濂,等.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實驗技巧全書(下冊)[M].北京:北京醫(yī)科大學(xué)中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社,1995:158-162.

        [5]胡文婷,董梅,李廷利.刺五加水煎液合并DA受體拮抗劑改善小鼠睡眠作用的實驗研究[J].中醫(yī)藥學(xué)報,2012,40(3):29-32.

        ·基礎(chǔ)研究·

        作者單位:02215哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院,Beth Israel Deaconess Medical Center,交叉醫(yī)學(xué)與生物技術(shù)部,美國馬薩諸塞州波士頓(馬彥、Chung-Kang Peng);100053北京,中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院耳鼻喉(孫書臣)

        Experimental study of Miananfang on sedative and hypnotic effects of mice

        LI Jing,YANG Wenming,CHEN Xingsheng.The second affiliated hospital of Anhui University of Traditional Chinese Medicine,hefei 230061,China(LI Jing,CHEN Xingsheng); The first affiliated hospital of Anhui University of Traditional Chinese Medicine,hefei 230031,China(YANG Wenming)

        Corresponding author:YANG Wenming,E-mail:yangwenming8810@sina.com

        【Abstract】ObjectiveTo observe sedative and hypnotic effects of mice given intragastric administration with Miananfang.MethodsUse threshold and subthreshold dose of pentobarbital sodium to make the mice sleep,observing the effects on autonomic activities and sleeping time of mice with different dose of Miananfang.ResultsMiananfang can decrease the autonomic activities of mice significantly,increase the number of mice which were made to sleep by subthreshold dose of pentobarbital sodium,and improve the sleeping time of mice with threshold dose of pentobarbital sodium.ConclusionMiananfang has a significantly effect of sedation and hypnosis.

        【Key Words】Miananfang; Sedative; Hypnotic

        通信作者:馬彥,E-mail:dr.yan.ma@gmail.com;sunsc@163.com

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