張偉明

廣東省佛山市南海區(qū)第六人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 佛山 528248

乙型肝炎病毒DNA定量與乙肝兩對(duì)半及血清酶ALT的關(guān)系

張偉明

廣東省佛山市南海區(qū)第六人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 佛山 528248

目的：探討乙型肝炎病毒DNA定量與乙肝兩對(duì)半及血清酶ALT的關(guān)系。方法：對(duì)135例乙型肝炎病毒陽性的患者血清采用FQ－PCR定量法測(cè)定HBV－DNA含量，酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定乙肝兩對(duì)半，并采用全自動(dòng)生化分析儀定量檢測(cè)血清酶活性。結(jié)果：小三陽與大三陽妊娠期婦女的HBV－DNA量比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；HBsAg＋、抗－HBc＋模式的HBV－DNA定量與大三陽患者相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但與小三陽患者相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），而且HBV－DNA定量檢測(cè)不同范圍中的血清酶檢測(cè)的結(jié)果比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）。結(jié)論：乙肝兩對(duì)半檢測(cè)中主要為大三陽及小三陽模式，而且乙型肝炎病毒DNA定量與乙肝兩對(duì)半及血清酶含量具有一定的相關(guān)性。

乙型肝炎；HBV－DNA定量；乙肝兩對(duì)半；血清酶ALT

我國將乙型肝炎疫苗預(yù)防納入國家計(jì)劃免疫范疇以來，乙型肝炎表面抗原攜帶率特別是5歲以內(nèi)兒童的HBsAg攜帶率明顯下降至0.96%，達(dá)到WHO要求標(biāo)準(zhǔn)［1］。本文通過采用熒光定量多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)HBV－DNA的復(fù)制量，研究乙型肝炎病毒DNA量與乙肝兩對(duì)半及血清酶ALT的關(guān)系對(duì)發(fā)病機(jī)制進(jìn)行初步探討，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取135例2012年8月至2014年6月在我院就診的乙型肝炎病毒感染患者作為研究對(duì)象，其中男76例，女59例，年齡12～72歲，平均年齡（38.54± 6.42）歲。所有患者經(jīng)過乙肝兩對(duì)半檢測(cè)有1項(xiàng)及1項(xiàng)以上陽性，且半年內(nèi)未接受抗乙型肝炎病毒治療［2］。

1.2 檢驗(yàn)方法

1.2.1 血清HBV－DNA定量 采用熒光定量PCR法，通過熒光定量多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)檢測(cè)HBV－DNA的復(fù)制量。本實(shí)驗(yàn)室為通過廣東省PCR實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)認(rèn)證的基因診斷先進(jìn)實(shí)驗(yàn)室，所有操作人員均為持有PCR實(shí)驗(yàn)室上崗證的專業(yè)人員［3］。

1.2.2 乙肝兩對(duì)半檢測(cè) 乙肝兩對(duì)半定性檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），采用試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，操作參照試劑盒說明，采用酶標(biāo)儀（TECANSPECTRA）讀取并記錄檢測(cè)結(jié)果。

1.2.3 血清酶ALT檢測(cè) 血清酶（ALT）能催化谷氨酸和丙氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)棣粒於岷捅?，廣泛存在于肝、心、腦等組織內(nèi)，以肝臟含量最高，是最敏感的肝功能檢測(cè)指標(biāo)之一。本研究采用奧林巴斯AU5800全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，試劑購自中生北控生物技術(shù)有限公司，ALT參考值為0～55 U／L，本觀察組設(shè)定ALT≥110 U／L為肝炎活動(dòng)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS17.0對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，將血清HBV－DNA量經(jīng)對(duì)數(shù)處理轉(zhuǎn)換成log10 IU／ml，統(tǒng)計(jì)結(jié)果以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜0.01為差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其中血清HBVDNA量與乙肝兩對(duì)半之間的關(guān)系采用卡方檢驗(yàn)，HBVDNA量與血清酶ALT的關(guān)系采用趨勢(shì)檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 血清HBV－DNA量與乙肝兩對(duì)半之間的關(guān)系 大三陽組患者，共有32例，占23.7%，HBV－DNA量總陽性率即HBV－DNA定量＞3log10IU／m l的患者比率為96.9%，且其中HBV－DNA量＞5 log10IU／ml有29例占90.6%。

小三陽組56例，占41.5%，HBV－DNA定量檢測(cè)總陽性率為39.3%，HBV－DNA量＞5log10IU／ml有10例，占17.9%。與大三陽組的HBV－DNA定量相比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

HBsAg＋、抗－HBc＋組共25例，HBV－DNA定量檢測(cè)總陽性率為36%，與大三陽組的HBV－DNA定量情況相比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），與小三陽組的HBVDNA定量情況相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

2.2 血清HBV－DNA定量與血清酶ALT的關(guān)系 將HBV－DNA定量檢測(cè)不同范圍中血清酶檢測(cè)的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)比較，統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表2。

3 討論

本研究結(jié)果顯示，大三陽組以及HBsAg＋、抗－HBs＋、HbeAg、抗－HBc＋組患者的HBV－DNA量＞5log10IU／m l患者所占比例均很高，表明患者體內(nèi)HBV復(fù)制很活躍，說明HBV前C區(qū)基因發(fā)生突變但復(fù)制仍活躍［3］。小三陽中有HBV－DNA量在3～5 log10 IU／ml之間的有12例，占21.4%，HBV－DNA量＞5log10IU／m l有10例，占17.9%，說明有部分HBV前C區(qū)基因產(chǎn)生變異，使得HbeAg不表達(dá)，但是HBV病毒復(fù)制仍比較活躍?？梗璈be＋、抗－HBc＋組和抗－HBs＋、抗－HBc＋組患者中均有16.7%的患者HBV－DNA量在3～5 log10 IU／m l之間的，表明了HbeAg陰性及HbsAg陰性時(shí)血清中仍然存在一些HBV病毒，推測(cè)其原因可能是因?yàn)镠BV病毒的S區(qū)發(fā)生了點(diǎn)突變，導(dǎo)致HBsAg抗原性發(fā)生改變，從而使得濃度較低的HbsAg抗原不能被檢測(cè)出來［5］，因此應(yīng)予以重視。

本研究顯示HBV－DNA定量與血清酶ALT的關(guān)系，在HBV－DNA量＜3log10 IU／ml時(shí)，血清酶ALT異常的比例為21.4%，HBV－DNA量在3～5 log10 IU／ml之間時(shí)，血清酶ALT異常的比例為55.0%，而HBV－DNA量＞5log10IU／ml，血清酶ALT異常的比例為68.9%，差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明HBV病毒的復(fù)制活性及載量嚴(yán)重影響乙肝活動(dòng)，從而證明了乙型肝炎病毒復(fù)制活躍是導(dǎo)致肝功能指標(biāo)發(fā)生異常的重要原因，乙型肝炎的重要治療措施是抗病毒治療。

［1］溫慶輝，哈明昊，黎鳳英，等.妊娠合并慢性乙型肝炎患者的相關(guān)血液指標(biāo)變化及臨床意義［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志.2011，32（10）：1607－1608.

［2］楊勇，王占科，陳鑫，等.乙肝病毒DNA定量水平和乙型肝炎病毒標(biāo)志物定量檢測(cè)指標(biāo)相關(guān)性研究［J］.解放軍醫(yī)藥雜志，2014，26（10）：78－80.

［3］羅獻(xiàn)偉，王建軍.安徽省2006年1－59歲人群乙型病毒性肝炎感染狀況的血清流行病學(xué)調(diào)查［J］.中華疾病控制雜志，2013，17（2）：156－159.

［4］劉惠媛，李晶.妊娠婦女乙型肝炎病毒感染的臨床特征 ［J］.中華臨床醫(yī)師雜志，2013，7（23）：10473－10475.

［5］張文，張紅玉，曾年偉.HbeAg定量陽性和乙肝DNA的相關(guān)性研究及臨床價(jià)值［J］.現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2011，27：338－339.

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1007－8517（2015）11－0130－02

2015.03.14）