蘆曉燕，黃陸良

（廣西中醫(yī)藥大學，廣西 南寧 530001）

扁桃（Mangifera persiciforma C.Y.Wu et T.L.Ming）系漆樹科植物，主要分布在云南、貴州和廣西等省［1］。目前對扁桃的研究多集中在葉的部位，研究表明其葉中含有芒果苷，具有明顯的鎮(zhèn)咳、祛痰等作用［2-3］。廣西扁桃資源相當豐富，韋松等［4］對扁桃樹皮的化學成分進行研究，從石油醚提取物和乙酸乙酯提取物中分得沒食子酸乙酯、沒食子酸、芒果苷等化合物。筆者從化學成分預試驗中得知，扁桃樹皮含有黃酮類化合物。由于黃酮類化合物具有較廣泛的藥理作用，為進一步開發(fā)利用扁桃，擴大其藥用范圍，本文運用紫外分光光度法測定扁桃樹皮中總黃酮的含量，為進一步研究該藥材的物質(zhì)基礎提供參考。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

UV8453型可見-紫外分光光度計（美國Agilent公司）；扁桃樹皮采于廣西南寧，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學藥學院廖月葵高級實驗師鑒定為漆樹科植物扁桃（Mangifera persiciforma C.Y.Wu et T.L.Ming）的樹皮。蘆丁對照品（批號：100080-200306；購自中國食品藥品檢定研究院）；顯色劑為5%NaNO2溶液，10%Al（NO3）3溶液，5%NaOH溶液。

2 實驗方法與結果

2.1 溶液的制備

2.1.1 蘆丁對照品溶液的制備 稱取蘆丁對照品約19 mg，精密稱定，用甲醇溶解，轉移入100 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得蘆丁對照品溶液，濃度為0.197 mg/ml。

2.1.2 扁桃樹皮供試品溶液的制備 取扁桃樹皮粗粉約4 g，精密稱定，加95%乙醇50 ml，加熱回流提取2 h，濾過，濾液減壓回收乙醇至稠膏狀，稠膏加少量蒸餾水成懸浮液，在分液漏斗中加石油醚萃取除去葉綠素等脂溶性雜質(zhì)，加乙醇使含醇量為70%，轉移至100 ml量瓶中，并用70%乙醇定容至刻度，即得扁桃樹皮供試品溶液。

2.2 波長的選擇 精密吸取1.0 ml供試液于10 ml量瓶中，依次加入5%NaNO2溶液1 ml，搖勻；10%Al（NO3）3溶液1 ml，搖勻；5%NaOH溶液2 ml，搖勻；最后用70%乙醇定容至刻度，靜置10 min，以試劑為空白對照液，用紫外分光光度計在波長400～800 nm范圍測定吸光度，結果于506 nm波長處有最大吸收，其他成分在此波長處對測定無干擾，色譜圖見圖1，故測定時選擇506 nm作為測定波長。

圖1 波長選擇UV圖譜

2.3 方法學考察

2.3.1 標準曲線的繪制 分別精密吸取蘆丁對照品溶液（0.197 mg/ml）1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml于 5 個 10 ml量瓶中，分別按“2.2波長的選擇”項下顯色方法操作，以試劑作空白對照，于506 nm波長處測定吸光度。依據(jù)測定結果繪制標準曲線，見圖2。得出回歸方程為：A=1.846C-0.0018，相關系數(shù)r=0.9993，結果顯示蘆丁對照品在0.0197～0.0985 mg/ml濃度范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關系。

圖2 蘆丁標準曲線圖

2.3.2 精密度試驗 精密吸取1.0 ml供試品溶液于10 ml量瓶中，按“2.2波長的選擇”項下顯色方法操作，在506 nm處測定吸光度，連續(xù)測定6次，計算扁桃樹皮總黃酮含量，RSD=4.57%（n=6），表明該儀器精密度良好。

2.3.3 穩(wěn)定性試驗 精密吸取1.0 ml供試品溶液于10 ml量瓶中，按“2.2波長的選擇”項下顯色方法操作，分別放置0，10，20，30，60 min 后在 506 nm 處測定吸光度，RSD=3.91%（n=5），結果顯示樣品在1 h內(nèi)測定穩(wěn)定。

2.3.4 重復性試驗 精密量取6份供試品溶液，各1.0 ml，按“2.2波長的選擇”項下顯色方法操作，在506 nm處測定吸光度，依據(jù)吸光度計算出扁桃樹皮中總黃酮含量，總黃酮含量平均值為 23.46 mg/g，RSD=4.14%（n=6）。

2.3.5 加樣回收率試驗 取6份扁桃樹皮（已知總黃酮含量為23.46 mg/g），每份約4 g，精密稱定，按2.1.2方法制備供試品溶液，分別加入蘆丁對照品溶液1.0 ml，按“2.2波長的選擇”項下顯色方法操作，在506 nm處測定吸光度，并計算加樣回收率，結果平均加樣回收率為98.52%，RSD為6.67%。實驗結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果 （n=6）

2.4 樣品測定 取不同批次扁桃樹皮粗粉約4 g，共3份，精密稱定，按“2.1.2扁桃樹皮供試品溶液的制備”項下制備樣品溶液，各精密吸取樣品溶液1.0 ml，分別置于3個10 ml量瓶中，按“2.2波長的選擇”項下顯色方法操作，在506 nm處測定吸光度，根據(jù)回歸方程計算扁桃樹皮中總黃酮的含量，結果扁桃樹皮中總黃酮的平均含量為23.85 mg/g，見表2。

表2 扁桃樹皮中總黃酮的含量測定結果 （n=3）

3 小 結

目前總黃酮類化合物的測定多通過顯色劑顯色，然后采用紫外分光光度法測定。本實驗以蘆丁為對照品，在堿性條件下以NaNO2-Al（NO3）3為顯色劑，用紫外分光光度法測定扁桃樹皮中總黃酮的含量，結果表明該法操作簡便快速，穩(wěn)定可靠，可為進一步研究該植物的物質(zhì)基礎提供理論依據(jù)。

［1］中國科學院中國植物志編委會.中國植物志.四十五卷.第一分冊［M］.北京：科學出版社，1980：75.

［2］黃海濱，戴航，李學堅，等.RP-HLPC法測定不同產(chǎn)地扁桃葉中芒果苷的含量［J］.廣西中醫(yī)藥，2004，27（2）：51-52.

［3］林啟云，王建如，周芳，等.扁桃葉的藥理實驗［J］.廣西中醫(yī)藥，1981，5（5）：37-41.

［4］韋松，楊小良，趙衛(wèi)峰，等.扁桃樹皮化學成分研究［J］.中成藥，2008，30（9）：1399-1400.