黃娟

【摘要】 目的 探討腫瘤壞死因子α（TNF-α）在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥（ICP）發(fā)病機(jī)制中的作用。方法 66例剖宮產(chǎn)術(shù)分娩的妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥產(chǎn)婦作為A組， 隨機(jī)抽取同期行單純剖宮產(chǎn)術(shù)的70例健康產(chǎn)婦作為B組。對A、B兩組臨床資料進(jìn)行對比分析。結(jié)果 A組與B組相比， 新鮮的胎盤組織滋養(yǎng)細(xì)胞中TNF-α mRNA的表達(dá)水平分別為（2.24±0.27）和（1.10±0.09）；兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；培養(yǎng)并處理后胎盤組織滋養(yǎng)細(xì)胞中TNF-α mRNA的表達(dá)水平分別為（3.97±0.35）和（1.07±0.12）；兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。結(jié)論 TNF-α與妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥發(fā)生關(guān)系密切， 應(yīng)引起臨床治療的注意。

【關(guān)鍵詞】 腫瘤壞死因子α；妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥；TNF-α mRNA

妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥（ICP）是妊娠期比較常見的一種并發(fā)癥， 主要表現(xiàn)為血清膽汁酸水平升高和肝臟酶學(xué)指標(biāo)異常。妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥嚴(yán)重危害胎兒， 早產(chǎn)、胎兒窘迫、胎死宮內(nèi)的發(fā)生率很高。胎盤是胎兒和母體直接接觸的界面， 胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞的變化是直接影響胎兒的。目前， 膽汁酸直接形成的危害是研究的重點(diǎn)， 為防治胎兒不良反應(yīng)的發(fā)生， 揭示妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥的發(fā)病機(jī)制， 具有重要的臨床意義。本研究通過檢測妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥患者胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中腫瘤壞死因子α（TNF-α）的表達(dá)水平來探討TNF-α在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥發(fā)病機(jī)制中的作用。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2011年7月～2013年7月收治的剖宮產(chǎn)術(shù)分娩產(chǎn)婦136例， 孕周為37～40周。66例妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥產(chǎn)婦作為A組， 妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥（ICP）診斷標(biāo)準(zhǔn)如下：①妊娠期出現(xiàn)無法解釋的皮膚瘙癢， 排除皮膚疾??；②血清膽紅素約在1.1～5.0 mg/dl， 血清SGPT或SGOT約60～100 U， 更高者少見；③排除肝臟疾病、膽道疾病、需用抗生素的感染。隨機(jī)抽取同期行單純剖宮產(chǎn)術(shù)的70例健康產(chǎn)婦為B組， 比較兩組間術(shù)中出血量、術(shù)后24 h血紅蛋白下降、術(shù)后排氣時(shí)間、產(chǎn)后病率、手術(shù)時(shí)間以及手術(shù)后住院時(shí)間的情況。兩組患者年齡、孕周、產(chǎn)次差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 在胎盤娩出后無菌條件下進(jìn)行取材， 置于DMEM培養(yǎng)液中送細(xì)胞培養(yǎng)室， 并制備新鮮的胎盤組織冰凍切片。先應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測A、B兩組新鮮的胎盤組織滋養(yǎng)細(xì)胞中TNF-α mRNA的表達(dá)水平；再對滋養(yǎng)細(xì)胞體外培養(yǎng)72 h后， A組滋養(yǎng)細(xì)胞加入膽酸混合物， B組滋養(yǎng)細(xì)胞加入等體積的乙醇， 6 h后應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測兩組滋養(yǎng)細(xì)胞中TNF-α mRNA的表達(dá)水平。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本研究所得數(shù)據(jù)通過SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 A組與B組新鮮的胎盤組織滋養(yǎng)細(xì)胞中TNF-α mRNA的表達(dá)水平分別為（2.24±0.27）和（1.10±0.09）；兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。

2. 2 A組與B組培養(yǎng)并處理后胎盤組織滋養(yǎng)細(xì)胞中TNF-α mRNA的表達(dá)水平分別為（3.97±0.35）和（1.07±0.12）；兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。

3 討論

妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥可導(dǎo)致早產(chǎn)、胎兒宮內(nèi)窘迫增加圍生兒死亡率， 發(fā)病機(jī)制及臨床過程復(fù)雜， 母嬰死亡率較高。本文對妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥發(fā)病機(jī)制進(jìn)行探討。妊娠時(shí)胎盤作為內(nèi)分泌器官產(chǎn)生大量重要的細(xì)胞因子， 這些細(xì)胞因子進(jìn)入母體及胎兒血液循環(huán)， 對代謝、免疫、血管等系統(tǒng)發(fā)揮多種作用。在整個(gè)妊娠期， 這些細(xì)胞因子進(jìn)行著復(fù)雜的平衡調(diào)節(jié)， 維持了正常妊娠的過程。近年來研究表明， 細(xì)胞因子作為參與免疫反應(yīng)的重要介質(zhì)， 在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥的發(fā)生、發(fā)展過程中起重要的作用[1]。TNF-α主要是由單核-巨噬細(xì)胞分泌， 其他類型的細(xì)胞， 如淋巴細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等在一定條件下也具有產(chǎn)生和釋放TNF-α的能力， 妊娠期TNF-α主要由胎盤和脂肪組織合成和分泌。TNF-α是一種由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子， 在妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥的發(fā)生、發(fā)展過程中起重要的作用， 參與了滋養(yǎng)細(xì)胞的凋亡過程。TNF-α的主要生化作用有：直接殺傷細(xì)胞， 損壞肝細(xì)胞；刺激氧自由基產(chǎn)生， 導(dǎo)致肝細(xì)胞過氧化損傷；促進(jìn)胎盤合成、分泌雌激素[2]。其主要通過受體發(fā)揮作用，參與多種生理與免疫過程。腫瘤壞死因子1受體（TNFR1）介導(dǎo)了TNF-α的主要生物學(xué)效應(yīng)， TNFR1含死亡結(jié)構(gòu)域， 可觸發(fā)信號(hào)傳導(dǎo)級(jí)聯(lián)反應(yīng)而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡或通過激活核轉(zhuǎn)錄因子——核因子кB（NFкB）促使細(xì)胞增殖、分化[3]。子宮內(nèi)膜和胎盤組織中存在大量的巨噬細(xì)胞， 適量的TNF-α參與胎兒與胎盤組織的生長、分化調(diào)節(jié)， 刺激滋養(yǎng)細(xì)胞合成和分泌孕酮及HCG， 防止母體對胎兒的排斥反應(yīng)。有研究提示， TNF-α可以提高超氧離子水平及超氧離子激活NO的能力， 使血管內(nèi)皮功能失調(diào)， 使胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生凋亡。

本研究顯示妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥組滋養(yǎng)細(xì)胞中TNF-α mRNA的表達(dá)水平明顯高于健康產(chǎn)婦組， 在高濃度膽酸的作用下， TNF-α水平明顯升高， 導(dǎo)致胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡的增加， 引起的胎盤功能障礙， 盡而出現(xiàn)胎兒發(fā)育遲緩、胎兒窘迫、早產(chǎn)、死胎等不良現(xiàn)象。結(jié)論與杜巧玲等[4]一致， 高膽汁酸環(huán)境導(dǎo)致胎盤組織TNF-α水平增高， 導(dǎo)致滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡增加， 引起不良妊娠結(jié)局。說明TNF-α與妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥關(guān)系相當(dāng)密切， 抑制TNF-α的分泌或許會(huì)減輕對產(chǎn)婦和胎兒的危害， 對妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥治療達(dá)到新的切入點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)

[1] 黎智彪.肝功能檢測與妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥的臨床研究.當(dāng)代醫(yī)學(xué)， 2013（18）：43-44

[2] 曹麗瓊，曲廣第，王冬梅.妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥IL-10、TNF-α表達(dá)變化及其與肝功能變化的關(guān)系.免疫學(xué)雜志， 2012（5）：424-426.

[3] 李晶媛，李樹臣，楊維良.TNF-α誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡機(jī)制的回顧與展望.世界華人消化雜志， 2007（6）：606-611.

[4] 杜巧玲，段濤.妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥患者胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞中TNF-α mRNA的表達(dá)及其與膽汁酸水平變化的關(guān)系.中華婦產(chǎn)科學(xué)雜志， 2013， 9（48）：687-688.

[收稿日期：2014-08-21]endprint