冒樹泉 鄒明妤 王春生 宋理平 王秉利 許 鵬

(1.山東省淡水漁業(yè)研究院，濟南 250013;2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，雅安 625014)

投喂頻率是影響水產(chǎn)養(yǎng)殖的一項重要因子。不合理的投喂頻率往往會降低魚類的生長速度，使個體間規(guī)格分化差異較大［1］。投喂頻率過低會降低魚類的生長性能，而投喂頻率過高則往往導(dǎo)致飼料效率降低、養(yǎng)殖成本上升以及養(yǎng)殖環(huán)境的惡化［2］。因此，深入研究投喂頻率對魚類消化吸收與飼料利用的影響，有助于建立合理的養(yǎng)殖投喂模式，以取得良好的經(jīng)濟效益，同時對漁業(yè)資源管理以及養(yǎng)殖水環(huán)境的保護具有重要意義［3］。

許氏平鲉(Sebastes schlegeli)，隸屬于鲉形目(Scorpaeniformes)鲉科(Scorpaenidae)平鲉屬(Sebastes)，又稱黑 、黑頭、黑寨等，是一種冷溫性魚類，分布于我國黃海、渤海和東海［4］。因其具有生長速度快、適溫范圍廣、環(huán)境適應(yīng)強、養(yǎng)殖病害少、飼養(yǎng)方便等優(yōu)點，成為韓國第二大海水養(yǎng)殖魚類，也是我國北部沿海重要的魚類養(yǎng)殖對象。許氏平鲉肉質(zhì)嫩滑爽口、無肌間刺、含肉率高、味道鮮美，深受廣大消費者的歡迎，在其他亞洲國家鮮活魚市場上廣泛銷售，是市場潛力巨大的一種高檔名貴海水魚類品種。許氏平鲉洄游范圍小，卵胎生，喜好棲息于巖礁附近水域，是以人工魚礁進行資源增殖與網(wǎng)箱養(yǎng)殖的優(yōu)良種類［5］。目前，國內(nèi)外學(xué)者對許氏平鲉進行了營養(yǎng)與形態(tài)學(xué)等方面的研究［6－8］，但有關(guān)投喂頻率方面的研究未見報道。本試驗旨在通過研究不同投喂頻率對許氏平鲉幼魚生長性能、飼料利用、營養(yǎng)成分及消化酶活性等方面的影響，確定最適投喂頻率，進而為許氏平鲉營養(yǎng)生理與養(yǎng)殖生產(chǎn)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗飼料

試驗飼料為同一批制作的顆粒飼料，其組成及營養(yǎng)水平見表1。所有原料粉碎過60目篩，微量原料采用逐級擴大法添加，按配比稱量后加適量水混合均勻，經(jīng)螺旋擠壓機制粒成直徑為2 mm的顆粒飼料，自然避光晾干，置于－20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

表1 試驗飼料組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the experimental diet(DM basis) %

1.2 試驗魚與飼養(yǎng)管理

試驗用許氏平鲉為煙臺海洋科技有限公司提供的同一批孵化幼魚，馴養(yǎng)15 d后正式開始試驗。選取體質(zhì)健壯且規(guī)格相近的個體300尾，平均初始體重為(5.63±0.17)g，平均體長為(6.20±0.26)cm，隨機分為5組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)20尾魚，以重復(fù)為單位隨機放養(yǎng)于15個網(wǎng)箱(50 cm×50 cm×100 cm)中，網(wǎng)箱放置在同一水泥池(5 m×6 m)中，網(wǎng)箱內(nèi)有效水位為65 cm，海水流水養(yǎng)殖，養(yǎng)殖60 d。試驗設(shè)置不同的投喂頻率和時間，具體如下:1 d 4 次(08:00、11:00、13:30、18:00)、1 d 3 次(08:00、13:30、18:00)、1 d 2 次(08:00、18:00)、2 d 3 次(08:00、18:00、次日13:30)和1 d 1次(08:00)。試驗期間飽食投喂，觀察幼魚攝食情況，投喂后3 min若餌料臺上有飼料剩余，則結(jié)束投喂并撈出殘餌，每5 d清理1次網(wǎng)箱內(nèi)糞便，整個試驗期間水質(zhì)監(jiān)測情況為:水溫(23.5±1.5)℃，鹽度 28‰ ～31‰，溶解氧濃度(7.63±0.05)mg/L，pH 7.23± 0.12，氨氮 濃度(0.17± 0.01)mg/L，亞 硝 酸 鹽 濃 度 (0.04 ±0.01)mg/L。養(yǎng)殖室為透明塑料屋頂，光周期為自然周期，試驗結(jié)束前1天停止投喂。

1.3 樣品采集與計算分析

試驗開始前取主要飼料原料和飼料樣品分析其營養(yǎng)成分。試驗開始與結(jié)束時，對各組試驗魚記數(shù)、稱重，計算其增重率和特定生長率;統(tǒng)計飼料投喂量，計算飼料系數(shù)。60 d的生長試驗結(jié)束后，每個網(wǎng)箱各隨機取4尾魚，每組共取12尾魚，分別稱重、烘干，用于測全魚主要營養(yǎng)成分;每組另取18尾魚，分別稱重、量體長，解剖取內(nèi)臟、肝臟，稱重，計算肥滿度、臟體指數(shù)與肝體指數(shù)，留取肝臟待測主要營養(yǎng)成分;投喂3 h后，每個網(wǎng)箱各隨機取3尾魚麻醉，取魚體同一部位消化道保存于－20℃冰箱中，用于測定消化酶活性。

飼料原料、飼料樣品以及全魚、肝臟中水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量均按AOAC(1995)［9］中相關(guān)方法測定。

消化酶活性使用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的試劑盒進行測定，具體檢測方法參照說明書進行。胃蛋白酶活性單位定義為:每毫克組織蛋白質(zhì)在37℃下每分鐘分解蛋白質(zhì)生成1μg氨基酸為1個酶活性單位。淀粉酶活性單位定義為:每毫克組織蛋白質(zhì)在37℃下與底物作用30 min，水解10 mg淀粉為1個酶活性單位。脂肪酶活性單位定義為:在37℃條件下，每克組織蛋白質(zhì)在本反應(yīng)體系中與底物反應(yīng)1 min，每消耗1μmol底物為1個酶活性單位。

相關(guān)指標(biāo)計算公式如下:

式中:Wt為試驗結(jié)束時體重(g);W0為試驗開始時體重(g);F為攝食量(g);Wv為內(nèi)臟重(g);Wh為肝臟重(g);Wb為魚體重(g);t為試驗時間(d);L為魚體長(cm)。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±SE)表示，采用SPSS 17.0軟件對組間數(shù)據(jù)進行單因素方差分析，差異達到顯著(P＜0.05)者，采用 Duncan氏法進行組間的多重比較。

2 結(jié)果

2.1 投喂頻率對許氏平鲉幼魚生長的影響

試驗過程中，各組幼魚未出現(xiàn)死亡，成活率均為100%。由表2可知，采用不同投喂頻率的各組幼魚經(jīng)過60 d養(yǎng)殖后均獲得生長，終末體重隨著投喂頻率的增加呈上升趨勢，1 d 1次組顯著低于其他4組(P＜0.05)，1 d 2～4次組間無顯著差異(P＞0.05)。增重率以 1 d 4次組最高，1 d 1次組最低，2組間差異顯著(P＜0.05)，1 d 2～4 次組間無顯著差異(P＞0.05)。2 d 3次和1 d 1次組的飼料系數(shù)顯著低于 1 d 2～4次組(P＜0.05)，1 d 2～4次組間無顯著差異(P＞0.05)。除1 d 2～4次組間無顯著差異(P＞0.05)外，攝食率隨著投喂頻率的增加顯著提高(P＜0.05)。特定生長率隨著投喂頻率的增加而提高，1 d 2～4次組顯著高于2 d 3次和 1 d 1 次組(P＜0.05)，2 d 3次組顯著高于 1 d 1次組(P＜0.05)。

2.2 投喂頻率對許氏平鲉幼魚形體指標(biāo)的影響

由表3可知，肝體指數(shù)隨著投喂頻率的增加呈降低趨勢，1 d 4次組顯著低于除1 d 3次組外的其他各組(P＜0.05)。臟體指數(shù)以1 d 4次組最低，顯著低于其他4組(P＜0.05)，其他4組間臟體指數(shù)隨著投喂頻率的增加呈降低趨勢，但組間差異不顯著(P＞0.05)。各組間肥滿度沒有顯著差異(P＞0.05)。

表2 投喂頻率對許氏平鲉幼魚生長的影響Table 2 Effects of feeding frequency on growth of Sebastes schlegeli juveniles

表3 投喂頻率對許氏平鲉幼魚形體指標(biāo)的影響Table 3 Effects of feeding frequency on body indexes of Sebastods schlegeli juveniles %

2.3 投喂頻率對許氏平鲉幼魚體成分的影響

由表4可知，隨著投喂頻率的增加，魚體水分含量逐步降低，粗脂肪含量逐步升高，1 d 1次組魚體水分含量顯著高于1 d 2～4次組(P＜0.05)，1 d 1次組魚體粗脂肪含量顯著低于2 d 3次和1 d 2～4次組(P＜0.05)。1 d 4次組魚體粗蛋白質(zhì)和粗灰分含量顯著低于1 d 1次組(P＜0.05)，其余3組間無顯著差異(P＞0.05)。

表4 投喂頻率對許氏平鲉幼魚體成分的影響Table 4 Effects of feeding frequency on body composition of Sebastods schlegeli juveniles %

2.4 投喂頻率對許氏平鲉幼魚肝臟成分的影響

由表5可知，投喂頻率對肝臟中粗蛋白質(zhì)、粗灰分含量的影響不顯著(P＞0.05)。1 d 1次組肝臟中水分含量顯著低于1 d 3～4次組(P＜0.05)。隨著投喂頻率的增加，肝臟中粗脂肪含量逐漸降低，2 d 3次和1 d 1次組顯著高于1 d 4次組(P＜0.05)。

表5 投喂頻率對許氏平鲉幼魚肝臟成分的影響Table 5 Effects of feeding frequency on liver composition of Sebastods schlegeli juveniles %

2.5 投喂頻率對許氏平鲉幼魚消化酶活性的影響

由表6可知，1 d 1次組的胃蛋白酶和淀粉酶活性顯著高于其他各組(P＜0.05)，其余4組間無顯著差異(P＞0.05)。1 d 1次組與2 d 3次組的脂肪酶活性無顯著差異(P＞0.05)，但上述2組均顯著高于其他各組(P＜0.05)。

表6 投喂頻率對許氏平鲉幼魚消化酶活性的影響Table 6 Effects of feeding frequency on digestive enzyme activities of Sebastods schlegeli juveniles

3 討 論

3.1 投喂頻率對許氏平鲉幼魚生長的影響

魚類攝食量可以隨著投喂頻率的增加而增加，從而達到提高生長速度的效果［10］。目前，關(guān)于投喂頻率對魚類生長與飼料系數(shù)的影響主要有3種不同的觀點:1)魚類攝食率隨著投喂頻率的改變而變化，從而促進其生長，與飼料系數(shù)不相關(guān)，如星斑川鰈(Platichthys stellatus)［11］、斑點叉尾

(Ictalurus punctatus)［12］等;2)魚類特定生長率隨著投喂頻率的增加而提高，飼料系數(shù)也隨之降低，如瓦 式 黃 顙 魚 (Pelteobagrus vachelli)［13］、虹 鱒(Salmo gairdnerii)［14］等;3)飼料系數(shù)隨著投喂頻率的增加而增加，如大黃魚(Pseudosciaena crocea R.)［15］、大吻鱸 (Dicentrarchus labrax)［16］等。

本試驗發(fā)現(xiàn)，投喂頻率對許氏平鲉幼魚的增重率、特定生長率與飼料系數(shù)均有顯著影響。隨著投喂頻率的增加，許氏平鲉幼魚的特定生長率不斷提高，但飼料系數(shù)也相應(yīng)不斷提高。1 d 4次組的特定生長率最高，比其他組高 2.25%～15.43%，但其飼料系數(shù)也最高，比其他組高2.82%～23.94%，說明 1 d 4次組獲得的高生長速度是以較高的攝食量與較低的飼料轉(zhuǎn)化得來的，造成了飼料的浪費與養(yǎng)殖成本的增加。這一結(jié)果與 Charles 等［17］對鯉魚(Cyprinus carpio)、Sampath［18］對生魚(Channa striatus)、張瑞鍵等［15］對大黃魚的研究結(jié)果相一致。1 d 1次組的飼料系數(shù)雖然顯著低于其他各組，但其增重率與特定生長率在所有組中均是最低的，說明該組許氏平鲉幼魚未能獲得足夠的飼料，不能滿足其生長的需求。本試驗條件下，許氏平鲉幼魚的增重率、特定生長率與飼料系數(shù)均隨著投喂頻率增加而提高，但是當(dāng)投喂頻率超過1 d 2次后，魚體的增重率、特定生長率與飼料系數(shù)則無顯著差異，從而得出許氏平鲉幼魚的適宜投喂頻率為1 d 2次。

3.2 投喂頻率對許氏平鲉幼魚體成分與形體指標(biāo)的影響

本試驗中，隨著投喂頻率的增加，許氏平鲉幼魚全魚水分含量逐漸下降，粗脂肪含量逐漸上升。這與在星斑川鰈［11］、大黃魚［15］、鱸魚(Lateolabrax japonicus)［19］、褐鱒(Salmo trutta)［20］上的研究結(jié)果一致。研究發(fā)現(xiàn)，魚類體成分中粗脂肪含量一般跟隨外界因素的改變而變化，如生存環(huán)境、飲食因素、投喂頻率等［21］。隨著投喂頻率的增加，魚類攝食量增加，飼料中的營養(yǎng)在滿足了魚體生長需求外，剩余的蓄積在體內(nèi)，以脂肪的形式存在，導(dǎo)致魚體粗脂肪含量升高，水分含量降低［22］。本試驗中也發(fā)現(xiàn)，1 d 1次組全魚粗脂肪含量顯著低于其余各組，而水分、粗蛋白質(zhì)含量則高于其余各組。雜交鱧(Hybrid snakehead)在饑餓期間會利用自身儲存的能量來維持生命活動，饑餓狀態(tài)下主要消耗體內(nèi)的脂肪與糖原2種儲能物質(zhì)，對體內(nèi)蛋白質(zhì)的利用則相對較少［23］，與本研究結(jié)果一致。周勤勇等［24］對卵形鯧鲹(Trachinotus ovatus)的研究得出，低投喂頻率組中魚體粗脂肪含量顯著低于其余各組，而肝臟中粗脂肪含量顯著高于其余各組。本試驗結(jié)果表明，隨著投喂頻率的增加，許氏平鲉幼魚肝臟中粗脂肪含量逐漸降低，粗灰分、粗蛋白質(zhì)含量各組間無顯著差異，與周勤勇等［24］在卵形鯧鲹上的研究結(jié)果相一致。而孫立慧等［11］在不同投喂頻率下對星斑川鰈體成分進行分析時發(fā)現(xiàn)，星斑川鰈肝臟中粗蛋白質(zhì)含量隨著投喂頻率的增加而升高，肝臟中水分、粗脂肪含量無顯著變化，研究結(jié)果的差異可能受到魚的種類、魚體規(guī)格、飼料利用或養(yǎng)殖環(huán)境的影響［21］。對許氏平鲉全魚、肝臟的營養(yǎng)成分分析得出，投喂頻率的減少降低了全魚粗脂肪含量，增加了肝臟粗脂肪含量，說明在本試驗條件下，低投喂頻率下魚體消耗的脂肪來源于魚體內(nèi)臟(去肝臟)，也就是說隨著投喂頻率的降低，許氏平鲉對脂肪的消耗可能是由腸系膜脂肪提供的［25］。

本試驗中，1 d 4次組幼魚的肝體指數(shù)與臟體指數(shù)最小，除肝體指數(shù)與1 d 3次組差異不顯著外，顯著小于其余各組，推測其原因為:在動物生長過程中，根據(jù)生存環(huán)境的不同，魚體體重的變化幅度有時要比多數(shù)臟器器官的變化幅度大很多［26］。在許氏平鲉幼魚由于投喂頻率的增加使得體重明顯上升的這個階段，臟器重量沒有上升或雖出現(xiàn)上升趨勢但還不十分明顯，而臟器重量明顯上升的時候試驗已經(jīng)結(jié)束，從而導(dǎo)致了該組幼魚的肝體指數(shù)與臟體指數(shù)小于其他各組。

3.3 投喂頻率對許氏平鲉幼魚消化酶活性的影響

魚類在饑餓環(huán)境中只能動用自身能源物質(zhì)才能維持生存，魚體為適應(yīng)饑餓狀態(tài)，需要通過調(diào)整自身各種酶的活性，以達到合理利用體內(nèi)的儲存物質(zhì)維持生存的目的［3］。本試驗中，1 d 1次組胃蛋白酶、脂肪酶與淀粉酶活性均高于其余各組，這與研究者在奧尼羅非魚(Oreochromis niloticus×O.aureus)［27］、條石鯛(Oplegnathus fasciatus)［3］、灰海馬(Hippocampus erectus)［28］中所得結(jié)論相一致。推測其原因可能是由于1 d 1次組相較于其他組來說，可攝入的飼料量相對較少，幼魚需要通過提高自身的消化酶活性以充分吸收轉(zhuǎn)化飼料中的營養(yǎng)成分來滿足其生長需要。

4 結(jié)論

綜合考慮生長性能、飼料利用、營養(yǎng)成分與消化酶活性，在本試驗條件下，許氏平鲉幼魚的適宜投喂頻率為1 d 2次。

［1］ JOBLING M.Effect of feeding frequency on food intake and growth of Arctic charr Salvelinus alpines L.［J］.Journal of Fish Biology，1983，23(3):177－185.

［2］ GERSHANOVICH A D，TAUFIK L R.Feeding dynamics of sturgeon fingerlings(Acipenseridae)depending on food concentration and stocking density［J］.Journal of Fish Biology，1992，41(3):425－434.

［3］ 宋國，彭士明，孫鵬，等.饑餓與再投喂及投喂頻率對條石鯛幼魚生長和消化酶活力的影響［J］.中國水產(chǎn)科學(xué)，2011，18(6):1269－1277.

［4］ 劉蟬馨.黑鮶的人工育苗［J］.水產(chǎn)科學(xué)，1988(1):22－24.

［5］ 陳大剛.黃渤海漁業(yè)生態(tài)學(xué)［M］.北京:海洋出版社，1991:42.

［6］ LEE S M.Effects of dietary lipid source and water temperature on nutrient digestibilities in juvenile and adult Korean rockfish(Sebastes schlegeli)［J］.Korean Journal of Animal Nutrition and Feedstuffs，1997，21(5):381－390.

［7］ 李霞，王霞.許氏平鲉消化管上皮細胞及消化腺組織學(xué)和組織化學(xué)［J］.大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報，2003，18(4):241－245.

［8］ 楊艷平，溫海深，何峰，等.許氏平鲉精巢的形態(tài)結(jié)構(gòu)與發(fā)育組織學(xué)［J］.大連海洋大學(xué)學(xué)報，2010，25(5):391－396.

［9］ AOAC.Official methods of analysis［S］.15th ed.Arlington，VA:Association of Official Analytical Chemists，1995.

［10］ SVEIER H，LIED E.The effect of feeding regime on growth，feed utilisation and weight dispersion in large Atlantic salmon(Salmo salar)reared in seawater［J］.Aquaculture，1998，165(3/4):333－345.

［11］ 孫立慧，王際英，丁立云，等.投喂頻率對星斑川鰈幼魚生長和體組成影響的初步研究［J］.上海海洋大學(xué)學(xué)報，2010，19(2):190－195.

［12］ ANDREWS J W，PAGE JW.The effects of frequency of feeding on culture of catfish［J］.Transactions of the American Fisheries Society，1975，104(2):317－321.

［13］ 王武，周錫勛，馬旭洲，等.投喂頻率對瓦式黃顙魚幼魚生長及蛋白酶活力的影響［J］.上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報，2007，16(3):224－229.

［14］ WINDELL J T，F(xiàn)OLTZ J W，SAROKON J A.Effect of fish size，temperature and a digestibility of a pelleted diets by rainbow trout Salmo gairdneri［J］.Transactions of the American Fisheries Society，1978(107):613－616.

［15］ 張瑞鍵，張文兵，徐瑋，等.飼料蛋白水平與投喂頻率對大黃魚生長、體組成及蛋白質(zhì)代謝的影響［J］.水生生物學(xué)報，2013，37(2):281－289.

［16］ TSEVIS N，KLAOUDATOS S，CONIDES A.Food conversion budget in sea bass，Dicentrarchus labrax，fingerlings under two different feeding frequency patterns［J］.Aquaculture，1992，101(3/4):293－304.

［17］ CHARLES P M，SEBASTIAN S M，RAJM C V，et al.Effect of feeding frequency on growth and food conversion of Cyprinus carpio fry［J］.Aquaculture，1984，40(4):293－300.

［18］ SAMPATH K.Preliminary report on the effects of feeding frequency in Channa striatus［J］.Aquaculture，1984，40(4):301－306.

［19］ 樓寶，史會來，毛國民，等.飼喂頻率對鱸魚生長及體生化成分的影響［J］.寧波大學(xué)學(xué)報:理工版，2007，20(4):455－458.

［20］ PIRHONEN J，F(xiàn)ORSMAN L.Effect of prolonged feed restriction on size variation，feed consumption，body composition，growth and smolting of brown trout，Salmo trutta［J］.Aquaculture，1998，162(3/4):203 －217.

［21］ SHEARER K D.Factors affecting the proximate composition of cultured fishes with emphasis on salmonids［J］.Aquaculture，1994，119(1):63－88.

［22］ CHO S H，LIM Y S，LEE JH，et al.Effects of feeding rate and feeding frequency on survival，growth，and body composition of ayu post-larvae Plecoglossus altivelis［J］.Journal of the World Aquaculture Society，2003，34(1):85－91.

［23］ 周愛國，茅沈麗，王超，等.饑餓脅迫對雜交鱧生長及生化組成的影響［J］.水生態(tài)學(xué)雜志，2012，33(5):78－82.

［24］ 周勤勇，李鑫渲，羅文佳，等.不同投喂方式對網(wǎng)箱養(yǎng)殖卵形鯧鲹生長及其營養(yǎng)成分的影響［J］.漁業(yè)現(xiàn)代化，2013，40(1):13－17.

［25］ 喬秋實，蔣廣震，劉文斌，等.周期性饑餓再投喂對建鯉(Cyprinus carpio var.Jian)生長、體組成、消化酶的影響［J］.海洋與湖沼，2011，42(3):367－373.

［26］ 袁本利.藥物安全評價中臟器系數(shù)的意義及不足［J］.中國新藥雜志，2003，12(11):960－963.

［27］ 強俊，王輝，李瑞偉，等.飼喂頻率對奧尼羅非魚仔稚魚生長、體成分和消化酶活力的影響［J］.廣東海洋大學(xué)學(xué)報，2009，29(4):79－83.

［28］ 席寅峰，張東，施兆鴻.投喂頻率對雌雄分化后灰海馬生長發(fā)育、餌料轉(zhuǎn)換效率及消化酶活力的影響［J］.海洋漁業(yè)，2013，35(1):77－85.