王忱　曹志剛　張艷

[摘 要] 目的：探討微柱凝膠法在臨床輸血患者不規(guī)則抗體篩檢中的應(yīng)用價值。方法：采用微柱凝膠法和凝聚胺法對我院2010年1月至2014年3月申請輸血治療的4087例患者進行不規(guī)則抗體篩查，陽性結(jié)果用譜細胞進行抗體鑒定，分析比較兩種方法進行臨床輸血前不規(guī)則抗體篩查的優(yōu)缺點。結(jié)果：4087例申請輸血患者中，發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體陽性患者28例，不規(guī)則抗體陽性率為0.69%（28/4087），有既往輸血或妊娠史22例（構(gòu)成比為78.57%），無輸血或妊娠史6例（構(gòu)成比為21.43%）。微柱凝膠法檢出28例，凝聚胺法檢出22例，漏檢6例，漏檢率為0.15%。微柱凝膠法敏感性較高，但兩種方法檢出率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.724，P=0.295）。結(jié)論：采用微柱凝膠法輸血前對不規(guī)則抗體進行篩查具有較高的準確性，敏感性，且方便、快速、易于標準化。

[關(guān)鍵詞] 微柱凝膠法；輸血；凝聚胺法；不規(guī)則抗體；篩檢

中圖分類號：R446.1 文獻標識碼：A 文章編號：2095-5200（2014）06-071-02

不規(guī)則抗體即意外抗體，是指血清中抗-A、抗-B以外的其他血型抗體。人體含有的血清抗體主要有IgG及IgM兩大類，其中ABO血型內(nèi)的抗-A、抗-B為IgM型，其余血型系統(tǒng)內(nèi)的抗體則歸屬于IgG型。其他血型系統(tǒng)內(nèi)的不規(guī)則抗體是輸血反應(yīng)的重要誘因，一旦發(fā)病患者輕則出現(xiàn)發(fā)熱、寒戰(zhàn)，重則出現(xiàn)紅細胞不配合及壽命縮短，溶血性輸血反應(yīng)，直接危及患者生命安全[1]。由于傳統(tǒng)鹽水血型鑒定及交叉配血實驗僅能檢測ABO血型系統(tǒng)內(nèi)的不規(guī)則抗體，而對其他血型系統(tǒng)無效，因此尋求一種有效的不規(guī)則抗體篩檢技術(shù)成為臨床研究的重要內(nèi)容[2]。微柱凝膠法是一種新型的血型鑒定技術(shù)，可應(yīng)用于不規(guī)則抗體篩檢工作，但其實際篩查效果如何，臨床報道較少。因此，筆者選取我院2010年1月至2014年3月申請輸血治療的4087例患者采用微柱凝膠法篩檢，結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究對象為我院2010年1月至2014年3月申請輸血治療的4087例患者，其中男性2457例，女性1630例，年齡18～75歲，平均年齡（41.3±18.4）歲。

1.2 實驗儀器與試劑

選用西班牙Diana公司提供的微柱凝膠孵育器、全自動配血系統(tǒng)儀器、微柱凝膠離心機以及微柱凝膠Coombs卡。篩選細胞l號、Ⅱ號和Ⅲ號及鑒定譜細胞由上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司提供；凝聚胺試劑盒由珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 實驗方法

微柱凝膠法先將篩選細胞l號、Ⅱ號和Ⅲ號按1：5比例稀釋為0.9濃度的備用細胞液，并置于試劑槽內(nèi)。對微柱凝膠Coombs卡進行編號，置于儀器卡欄內(nèi)。取患者5mL靜脈血，常規(guī)離心后編號，并置于標本槽內(nèi)。選取不規(guī)則抗體篩查程序，啟動全自動配血系統(tǒng)儀器，儀器自動稀釋、溫育、離心，最終判讀結(jié)果。陽性結(jié)果標本根據(jù)譜細胞反應(yīng)格局來判斷其不規(guī)則抗體特異性類型。凝聚胺法按試劑盒操作說明書進行。

1.4 統(tǒng)計方法

所有收集數(shù)據(jù)錄入Excel2003，在spss17.0中進行統(tǒng)計分析。計量資料以（x±s）表示，計量資料采用兩樣本獨立t檢驗，計數(shù)資料采用卡方檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則陽性抗體患者特異性抗體分布

4087例申請輸血患者中，發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體陽性患者28例，不規(guī)則抗體陽性率為0.69%（28/4087），其中男性15例（構(gòu)成比為53.57%），女性13例（構(gòu)成比為46.43%）。有既往輸血或妊娠史22例（構(gòu)成比為78.57%），無輸血或妊娠史6例（構(gòu)成比為21.43%）。

2.2 兩種不規(guī)則抗體檢測方法檢查結(jié)果

微柱凝膠法檢出28例，采用譜細胞鑒定均為陽性，凝聚胺法檢出22例，采用譜細胞鑒定均為陽性，凝聚胺法漏檢6例，漏檢率為0.15%。兩種檢查方法的檢出結(jié)果比較差異不顯著（χ2=0.724，P=0.295）。

3 討論

輸血中受血者的不規(guī)則抗體如接受對應(yīng)抗原血液制品，受血者可能出現(xiàn)嚴重免疫性溶血性輸血反應(yīng)，這將危機患者生命[3]。不規(guī)則抗體生成在輸血人群中較為少見，本次研究中4087例申請輸血患者僅發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體陽性患者28例，不規(guī)則抗體陽性率為0.69%。不規(guī)則抗體篩查意義主要有以下幾點[4]：（1）對獻血者的血清、血漿篩查可避免含不規(guī)則抗體血液輸入受血者體內(nèi)，避免受血者發(fā)病免疫性溶血性輸血反應(yīng)。（2）對受血者篩查有利于血液選擇，醫(yī)師可以根據(jù)檢測結(jié)果確定患者具體需求血液，避免患者因輸入血液相關(guān)抗原而出現(xiàn)溶血性輸血反應(yīng)。（3）孕婦人群的不規(guī)則抗體篩查，可盡早明確孕婦是否伴有不規(guī)則抗體，可為孕期新生兒溶血病防治提供參考。

目前，臨床應(yīng)用的血清抗體檢測有鹽水血型鑒定、交叉配血試驗等。其中鹽水血型鑒定原理是IgM型抗體可于鹽水介質(zhì)內(nèi)與對應(yīng)抗原紅細胞凝結(jié)，但是IgG型抗體無法在鹽水環(huán)境內(nèi)容出現(xiàn)凝結(jié)，僅可能于酶學(xué)實驗、抗人球蛋白實驗內(nèi)才可能出現(xiàn)凝結(jié)[5]。交叉配血試驗是確定受血者能否行輸血操作的重要依據(jù)，但該種檢測技術(shù)易受待檢紅細胞懸液濃度、外部環(huán)境影響，其檢測敏感度較低[6]。微柱凝膠法檢測是一種基于經(jīng)典抗人蛋白實驗的一種新型檢測技術(shù)，已在歐美地區(qū)得到廣泛的應(yīng)用。該技術(shù)原理是通過微柱凝膠內(nèi)微小孔隙的過濾能力及免疫化學(xué)抗原抗體的特異反應(yīng)，再結(jié)合離心技術(shù)將出現(xiàn)凝結(jié)反應(yīng)的紅細胞阻滯于微柱凝膠內(nèi)，而未發(fā)生凝結(jié)反應(yīng)的單體紅細胞可通過微柱凝膠孔隙運動至柱底，最終顯示篩檢結(jié)果[7]。具有高靈敏度，結(jié)果精確等優(yōu)勢[8]。此外，微柱凝膠法檢測技術(shù)自動化水平極高，檢測操作難度低，操作流程一目了然，利于推廣[9]。凝聚胺試驗是在LIM下多聚季氨鹽促使紅細胞產(chǎn)生非特異性凝集反應(yīng)[10]，具有靈敏度高、價廉、快速、操作簡便等優(yōu)點，但凝聚胺法需手工操作，對操作者要求較高，必須正確振搖細胞，嚴格按照規(guī)定時間判定結(jié)果。對有些低濃度抗體易漏檢。本次研究中，微柱凝膠法檢出28例，凝聚胺法檢出22例，凝聚胺法敏感性較低。

綜上所述，采用微柱凝膠法輸血前對不規(guī)則抗體進行篩查準確度高，該技術(shù)發(fā)展成熟，具有較高自動化、標準化水平，檢測操作難度較低，檢測速度較快，檢測相關(guān)費用低，值得臨床推廣。

參 考 文 獻

[1] 葉巧國，張衛(wèi)良，盧德權(quán)，等. 微柱凝膠卡式法在臨床輸血中的應(yīng)用價值分析[J]. 實驗與檢驗醫(yī)學(xué)， 2014，02（01）：54-56.

[2] 朱志虎，李鮮娜. 微柱凝膠法和凝聚胺法在交叉配血試驗中的應(yīng)用分析[J]. 臨床血液學(xué)雜志（輸血與檢驗版）， 2011，24（04）：479-480.

[3] 余忠清，高志峰，李慧玉. 異基因造血干細胞移植血型血清學(xué)轉(zhuǎn)換規(guī)律與臨床輸血研究[J]. 中華血液學(xué)雜志， 2012，33（08）：637-641.

[4] C， Milkins，J， Berryman，C， Cantwell. Guidelines for pre-transfusion compatibility procedures in blood transfusion laboratories. British Committee for Standards in Haematology[J]. Transfusion medicine （Oxford， England）， 2013，23（1）：3-35.

[5] 鄔文婧，練正秋，許基平. 微柱凝膠法交叉合血次側(cè)不合原因分析及臨床輸血策略[J]. 實用醫(yī)院臨床雜志， 2013，10（01）：143-144.

[6] 盧煥興，李春嬌，溫俊杰. 抗體篩選試驗在交叉配血不合原因分析中的應(yīng)用[J]. 國際輸血及血液學(xué)雜志， 2012，35（03）：198-200.

[7] Ira A， Shulman，Lieta M， Maffei，Katharine A， Downes. North American pretransfusion testing practices， 2001-2004： results from the College of American Pathologists Interlaboratory Comparison Program survey data， 2001-2004[J]. Archives of pathology & laboratory medicine， 2005，129（8）：984-9.

[8] 宋雪珍，宋雪梅，孫凌云，等. 微柱凝膠法交叉配血不合原因分析[J]. 醫(yī)學(xué)檢驗與臨床， 2012，23（04）：43-44，45.

[9] 趙子賢，李娟紅，李健茹. 微柱凝膠法和改良凝聚胺法在免疫性溶血性貧血患者交叉配血中的應(yīng)用[J]. 中國醫(yī)藥科學(xué)， 2013，01（15）：116-117，120.

[10] 危艷順，姚明. 凝聚胺法、微柱凝膠法兩種配血方法學(xué)評價[J]. 臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志， 2013，12（08）：623-624.