肖 昆，王晉濤，尉志文，王玉瑾，賈 娟，曹 潔，贠克明*

(1太原市警官職業(yè)學(xué)院治安系，太原030032;2山西醫(yī)科大學(xué)麻醉系;3山西醫(yī)科大學(xué)法醫(yī)學(xué)院;*通訊作者，E-mail:yunkeming5142@163.com)

溴氰菊酯是一種對(duì)光穩(wěn)定的，在農(nóng)業(yè)中被廣泛使用的擬除蟲(chóng)菊酯類殺蟲(chóng)劑［1］，有接觸和胃毒性。普遍認(rèn)為溴氰菊酯在環(huán)境中使用后具有高效、低毒、低殘留和相對(duì)安全的特點(diǎn)，但是研究發(fā)現(xiàn)溴氰菊酯仍可以通過(guò)皮膚黏膜、呼吸道或消化道入體，造成急性中毒，并且對(duì)大腦和肝臟具有較高的毒性［2，3］，成為法醫(yī)學(xué)鑒定中最常見(jiàn)也是最常進(jìn)行分析的毒物之一。

在中毒或中毒致死案件的法醫(yī)學(xué)鑒定中，如何準(zhǔn)確地對(duì)入體的藥(毒)物量進(jìn)行鑒定，對(duì)其入體時(shí)間、入體途徑進(jìn)行準(zhǔn)確的判定一直是法醫(yī)毒物分析鑒定中的難題和需要主要解決的問(wèn)題，而收集檢材或?qū)z材進(jìn)行檢驗(yàn)鑒定的時(shí)間往往和中毒死亡的時(shí)間并不一致，這就造成了進(jìn)行毒物分析所檢測(cè)的檢材中藥(毒)物的濃度并不能真實(shí)地揭示死亡當(dāng)時(shí)死者體內(nèi)的藥(毒)濃度，這種變化主要與檢材收集以及檢測(cè)時(shí)間、檢材采取位置有關(guān)，這在法醫(yī)毒理學(xué)專業(yè)上稱為死后再分布現(xiàn)象［4－9］，目前研究其發(fā)生機(jī)制與多種因素有關(guān)，而主要因素為死后彌散。死后彌散(postmortem diffusion)是指未吸收的毒物從富集器官(蓄積庫(kù))逐漸釋放擴(kuò)散至周圍組織的過(guò)程，這些蓄積庫(kù)主要指胃和小腸［10－12］。

盡管目前對(duì)死后再分布的研究比較多，但是對(duì)溴氰菊酯死后彌散的研究仍未見(jiàn)報(bào)道。本研究中通過(guò)建立對(duì)家兔處死后灌胃的動(dòng)物模型，研究溴氰菊酯在家兔中的死后彌散規(guī)律，為溴氰菊酯中毒致死案件的法醫(yī)學(xué)鑒定提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物模型

兔子12只，體重2－2.5 kg，由山西醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，實(shí)驗(yàn)前隔夜禁食，隨機(jī)分為兩組，每組6只。兩組兔子先通過(guò)窒息方式處死，處死后在室溫下放置半小時(shí)后以4LD50(4×56.56 mg/kg，)溴氰菊酯乳油(25 g/L)灌胃，灌胃總體積不超過(guò)27 ml。第一組以灌胃后24 h解剖，第二組以灌胃后48 h解剖，分別取心血、股動(dòng)脈血、尿液、膽汁、心、肝、脾、肺、腎、腦、左下肢肌肉，置于－20℃待檢。

1.2 試劑

溴氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)品(2 mg/ml溶于乙醇中)，甲氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)品(2 mg/ml溶于乙醇中)作為內(nèi)標(biāo)分別購(gòu)于中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)品公司。溴氰菊酯乳油(25 g/L)購(gòu)于拜耳生物科技中國(guó)有限公司。其余所有試劑均為色譜純。

1.3 儀器和色譜條件

所有樣本均通過(guò)液液萃取，氣相色譜－電子捕獲檢測(cè)器(GC－ECD)進(jìn)行定性、定量分析(Agilent 7890A)。

色譜條件:色譜柱HP－5毛細(xì)管柱，30 m×0.25 mm;進(jìn)樣口溫度250℃，分流模式，分流比為20∶1;載氣:高純 N2，恒流模式，流量 6 ml/min;柱溫采用程序升溫:100℃ 1 min，35℃/min→260℃1 min，5℃/min→280℃ 5 min，總時(shí)間為16 min。進(jìn)樣量 1.0 μl。

2 結(jié)果

家兔處死半小時(shí)后經(jīng)口給予4LD50溴氰菊酯，灌胃24 h后溴氰菊酯就可以從胃彌散至血液、肝臟和其他組織器官，血液、尿液和膽汁中的濃度高于臟器濃度。然而，在死后灌胃48 h，心血、肺和胃內(nèi)容中溴氰菊酯的濃度迅速下降，心血從2.91μg/ml下降至2.57 μg/ml，肺從2.42 μg/g下降至1.58 μg/g和胃內(nèi)容從5.48μg/g下降至3.11μg/g。與死后灌胃24 h家兔組織中分布規(guī)律相比，死后灌胃48 h家兔尿液、膽汁、心、脾、腎和左下肢肌肉中溴氰菊酯濃度的變化沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05，見(jiàn)圖1)。心血、股動(dòng)脈血、肝臟、肺臟、腦和胃內(nèi)容中溴氰菊酯濃度變化有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

圖1 家兔死后溴氰菊酯灌胃24 h和48 h分布規(guī)律Figure 1 Postmortem diffusion of deltamethrin in rabbits at 24 h and 48 h

3 討論

在中毒死亡案件中，死后再分布現(xiàn)象嚴(yán)重影響著毒物在體內(nèi)的濃度，導(dǎo)致毒物濃度隨死亡時(shí)間的延長(zhǎng)變化很大，主要的原因是死后腐敗導(dǎo)致組織自溶，細(xì)胞膜的破裂，某些毒物可以由高濃度部位向低濃度部位彌散［13－19］。在疑似中毒案件的法醫(yī)學(xué)鑒定中，血液中毒物的濃度往往是推斷是否中毒或中毒致死的主要指標(biāo)，實(shí)際工作中主要是采取心血進(jìn)行毒物濃度的檢測(cè)，死后再分布影響的最終結(jié)果是死后生物樣本中毒物的濃度不能真實(shí)地反映死亡當(dāng)時(shí)體內(nèi)毒物的濃度，會(huì)受到檢材采取部位、檢材采取距死亡時(shí)間的長(zhǎng)短等因素的影響［20］，導(dǎo)致中毒案件鑒定的偏差。

本研究從死后再分布的主要影響因素死后彌散著手，對(duì)溴氰菊酯的死后彌散進(jìn)行研究，研究發(fā)現(xiàn)，溴氰菊酯可以從作為蓄積庫(kù)的胃腸道向周圍組織臟器和體液彌散。在最初的24 h內(nèi)，由于腐敗作用導(dǎo)致胃腸黏膜屏障的破壞更加劇了這種彌散現(xiàn)象的發(fā)生。在對(duì)動(dòng)物進(jìn)行解剖時(shí)發(fā)現(xiàn)氣管中有胃內(nèi)容物存在，造成其毒物的濃度高于其他組織臟器，究其原因?yàn)閺奈改c道反流入氣管形成的［20－21］，在死后灌胃48 h股靜脈血、肝臟和腦組織中溴氰菊酯的濃度迅速升高。有文獻(xiàn)報(bào)道玻璃體液和髂腰肌可以成為進(jìn)行毒物分析最有價(jià)值的檢材［22］。而本研究中尿液、膽汁、心臟、脾、腎和左下肢肌肉中溴氰菊酯的濃度相對(duì)比較穩(wěn)定，變化不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，也提示我們?cè)阡迩杈挣サ闹卸景讣b定中可以采取以上樣本進(jìn)行檢測(cè)作為鑒定依據(jù)。但是，如何通過(guò)以上樣本中溴氰菊酯的濃度推斷死亡當(dāng)時(shí)血液中的濃度是下一步急需解決的問(wèn)題。

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