李杏娟，陸冬梅，潘自宇，朱 丹，孫珊珊

(云南大學(xué)化學(xué)科學(xué)與工程學(xué)院，云南昆明650091)

糖蜜酒精廢液是指糖蜜經(jīng)發(fā)酵后，發(fā)酵醪液在酒精初餾塔蒸餾出酒精后排放的廢液。其色澤深、濃度高，呈酸性，化學(xué)耗氧量(CODcr)達(dá)8～14萬mg/L，BOD5值達(dá)4～6萬 mg/L，pH 3.5～4.5，且含有大量、Cl－及有機(jī)酸等［1］，是發(fā)酵工業(yè)最嚴(yán)重的污染源之一，也是一種較難處理的超高濃度有機(jī)廢水。每生產(chǎn)1 t酒精約排放15 t廢液，我國此類廢液年排放量達(dá)600萬t以上［2］。目前處理糖蜜酒精廢液主要的方法有氧化塘、農(nóng)業(yè)灌溉、生產(chǎn)飼料酵母、生化處理等，這些方法在污染治理方面均達(dá)不到排放標(biāo)準(zhǔn)，而且脫色率都很低，即使處理后排放酒精廢水的化學(xué)耗氧量(CODcr)大大下降，色度仍沒有得到改善。如何除去廢液中的色素成為該廢液治理的關(guān)鍵。

淀粉衍生物絮凝劑具有無毒、廉價(jià)、適用范圍廣和易生物降解等優(yōu)點(diǎn)，越來越受到人們的重視［3］。日本、美國、英國、法國等國家目前在廢水處理中已開始使用淀粉衍生物絮凝劑，如交聯(lián)淀粉可有效降低廢水的CODcr，且具有成本低、無毒性、使用方便、絮凝效果好等優(yōu)點(diǎn)［4］。國內(nèi)已有用其來處理糖蜜酒精廢液的研究文獻(xiàn)報(bào)道，脫色率達(dá)85.7%［5］。

多孔淀粉是將具有生淀粉酶活力的酶在低于糊化溫度下作用于原淀粉而得到的多孔性顆粒產(chǎn)物，具有良好的吸附性，可作為新型有機(jī)吸附劑和包埋材料。課題組前期研究表明，多孔淀粉對次甲基藍(lán)具有良好的脫色效果。

本研究以玉米淀粉為原料合成具有多孔結(jié)構(gòu)的顆粒態(tài)交聯(lián)淀粉絮凝劑，目的在于結(jié)合交聯(lián)淀粉和多孔淀粉的特性制備一種具有較強(qiáng)脫色和吸附特性的新型絮凝劑，為淀粉絮凝劑在處理糖蜜酒精廢液中的應(yīng)用研究提供理論及技術(shù)基礎(chǔ)。

1 主要儀器與試劑

玉米淀粉:食品級，西安國維淀粉有限責(zé)任公司;a－耐高溫淀粉酶(20000IU):蘇柯漢(濰坊)生物工程有限公司;檸檬酸:AR，天津博迪化工股份有限公司;磷酸氫二鈉:AR，汕頭市達(dá)濠精細(xì)化學(xué)品有限公司;氫氧化鈉:AR，云南楊林工業(yè)開發(fā)區(qū)汕滇藥業(yè)有限公司;無水硫酸鈉:AR，天津市盛奧化學(xué)試劑有限公司;環(huán)氧氯丙烷:AR，99%，西亞試劑;98%濃硫酸:AR，重慶川東化工(集團(tuán))有限公司。

THZ－82A數(shù)顯水浴恒溫振蕩器:常州普天儀器制造有限公司，金壇市晶玻實(shí)驗(yàn)儀器廠;202型電熱恒溫干燥箱:北京市永光明醫(yī)療儀器廠;SHZ－D(Ⅲ)循環(huán)水式多用真空泵:天津華鑫儀器廠;電子天平:上海菁海儀器有限公司;02043臺式酸度計(jì):嘉興市遠(yuǎn)航環(huán)保教育儀器有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 多孔淀粉的制備

準(zhǔn)確稱量20.000 0 g玉米淀粉(干基)加入到250 mL的錐形瓶中，加入pH為6.0的0.2 mol/L Na2HPO4－0.1 mol/L檸檬酸緩沖溶液40 mL，加入0.8 mL的a－耐高溫淀粉酶在50℃恒溫下震蕩反應(yīng)16 h。取出，加入去離子水至250 mL，抽濾，在 50℃下干燥，粉碎，過篩［6］。

2.2 多孔交聯(lián)淀粉的制備

稱取25 g絕干多孔玉米淀粉，在攪拌下加入到37.5 mL堿性硫酸鈉溶液中(每100 mL溶液含0.66 g氫氧化鈉和16.66 g無水硫酸鈉)，置于25℃的恒溫水浴中，保持?jǐn)嚢?。?～5 min將12.5 mL(內(nèi)溶有 0.25、0.50、0.75、1.00 mL 環(huán)氧氯丙烷)堿性硫酸鈉溶液滴入淀粉乳中。保持?jǐn)嚢栌?5℃反應(yīng)18 h后，用3 mol/L硫酸中和至pH6.0，過濾、洗滌，50℃干燥。

分別按 0.25、0.50、0.75、1.00 mL 環(huán)氧氯丙烷的量制備不同交聯(lián)度的交聯(lián)淀粉，取交聯(lián)度最大的作為產(chǎn)品。

2.3 掃描電子顯微鏡(SEM)的測定

用導(dǎo)電雙面膠將樣品粉末粘在金屬樣品平臺上，在真空鍍金后，置于掃描電子顯微鏡中以5 kV電子束觀察，并選擇有代表性的顆粒拍照［7］。

2.4 交聯(lián)淀粉交聯(lián)度測定

稱取5 g絕干交聯(lián)淀粉溶于50 mL水中，在沸水浴中攪拌20 min，冷卻至室溫，再移入50 mL具塞量筒中，定容至刻度，靜置24 h，記錄沉降部分體積即為沉降積［8］。

2.5 傅里葉紅外光譜儀(FTIR)的測定

紅外光譜制樣方法采用KBr壓片法，全波段掃描(400～4 000cm－1)，掃描次數(shù)128次，分辨率4 cm－1［9］。

2.6 BET比表面積的測定

樣品在105℃真空脫氣脫水2 h后，在77.35 K下充入氮?dú)猓捎萌萘糠y定吸附等溫線［7］。

3 結(jié)果與討論

3.1 掃描電子顯微鏡(SEM)的測定結(jié)果

根據(jù)Fannon等［10］的報(bào)告，玉米淀粉顆粒表面本身就存在一些很小的孔，由于這些孔的存在，a－淀粉酶很容易在有孔的薄弱區(qū)域作用，使這些孔變大，并深入到顆粒內(nèi)部形成多孔狀。多孔交聯(lián)淀粉的SEM圖見圖1。

圖1 多孔交聯(lián)淀粉的SEM圖Figure 1 SEM image of porous crosslinked starch

由圖1可見，a－淀粉酶作用于淀粉顆粒形成的孔較規(guī)則，呈圓筒狀，大小較均一，直徑約1 μm。同時(shí)還可以看到孔中有螺紋結(jié)構(gòu)，說明顆粒內(nèi)部密度分布不均勻，存在疏密相間的環(huán)層。各層密度的不同，是由于合成淀粉所需的葡萄糖原料的供應(yīng)晝夜不同，白天光合作用比夜間強(qiáng)，供應(yīng)的葡萄糖較多，合成的淀粉密度也較大，晝夜相間便造成了環(huán)層結(jié)構(gòu)。

3.2 交聯(lián)淀粉交聯(lián)度測定結(jié)果

交聯(lián)淀粉交聯(lián)度與沉降積呈線性負(fù)相關(guān)的關(guān)系，因此可采用沉降積來表示交聯(lián)度的大小。環(huán)氧氯丙烷用量對交聯(lián)淀粉沉淀積的影響見圖2。

圖2 環(huán)氧氯丙烷用量對交聯(lián)淀粉沉淀積的影響Figure 3 Impact of the amount of epichlorohydrin on cross－linked starch precipitation

由圖2看出，環(huán)氧氯丙烷用量對交聯(lián)度影響顯著。隨著環(huán)氧氯丙烷用量的增加，沉淀積下降，即產(chǎn)物交聯(lián)度增加。當(dāng)環(huán)氧氯丙烷用量超過0.75mL時(shí)，沉淀積接近于22.4 mL，其下降趨勢平緩。

3.3 傅里葉紅外光譜儀表征結(jié)果

圖3、圖4分別為原玉米淀粉和多孔交聯(lián)淀粉的紅外光譜圖。

圖3 原玉米淀粉的紅外光譜Figure 3 Infrared spectrum of raw corn starch

圖4 多孔交聯(lián)淀粉的紅外光譜Figure 4 Infrared spectroscopy of porous crosslinked starch

由圖3看出，原玉米淀粉的特征吸收峰波數(shù)3 397 cm－1是 O—H 伸縮振動(dòng);波數(shù) 2 928 cm－1為C—H伸縮振動(dòng);波數(shù)1 638 cm－1是C═O伸縮振動(dòng)。由圖4看出，多孔交聯(lián)淀粉基本具有原玉米淀粉的特征吸收峰，但比起原玉米淀粉來說，O—H和C═O的特征峰變小，其數(shù)量相對減少。

3.4 BET比表面積測定結(jié)果

多孔淀粉和多孔交聯(lián)淀粉的吸附等溫線見圖5，圖6為BET圖解法求比表面積。

圖5表明在吸附劑表面發(fā)生了多層吸附。在相對壓力接近1時(shí)，吸附量急劇上升，這是由于發(fā)生了毛細(xì)孔凝聚。多孔淀粉的吸附等溫線在多孔交聯(lián)淀粉的上方，在相對壓力較小時(shí)，兩條吸附線相差不太大;但當(dāng)相對壓力接近0.4時(shí)，二者距離開始拉大;而當(dāng)相對壓力接近1時(shí)，二者趨勢又發(fā)生重合。這說明交聯(lián)使孔與孔之間發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致孔徑擴(kuò)大，甚至破壞孔的結(jié)構(gòu)，從而使顆粒破碎。

多孔淀粉和多孔交聯(lián)淀粉的孔徑微分分布圖見圖7，結(jié)構(gòu)參數(shù)見表1。

圖5 多孔淀粉和多孔交聯(lián)淀粉的吸附等溫線Figure 5 Adsorption isotherms of the porous starch and cross－linked porous starch

圖6 BET方程圖解Figure 6 BET illustrated equation

圖7 多孔淀粉和多孔交聯(lián)淀粉的孔徑微分分布圖Figure 7 Derivative pore distribution of porous starch and cross－linked porous starch

從圖6和表1可知:兩個(gè)樣品對氮的吸附在低壓區(qū)服從BET二常數(shù)方程，可由此方程計(jì)算比表面積。多孔交聯(lián)淀粉的BET比表面積低于多孔淀粉，比孔容和平均孔徑均高于多孔淀粉。這說明交聯(lián)使淀粉顆粒之間更加疏松，使多孔淀粉的孔徑增大，甚至使一些大孔顆粒破碎。

表1 多孔淀粉和多孔交聯(lián)淀粉的結(jié)構(gòu)參數(shù)Table 1 Structure parameters of porous starch and porous crosslinked starch

一般認(rèn)為，孔徑在2～50 nm的孔為中孔，在這個(gè)范圍兩側(cè)的分別為微孔和大孔。圖7是孔徑微分分布圖，反映了不同大小的孔的出現(xiàn)幾率。由圖7可知，兩個(gè)樣品的孔多為中孔，且孔徑越小的孔的數(shù)量越多。兩個(gè)樣品的孔徑分布曲線的形狀大體相近，但多孔交聯(lián)淀粉的大孔區(qū)明顯低于多孔淀粉，這充分說明，交聯(lián)對微孔、中孔影響較小，對大孔影響顯著，甚至?xí)茐拇罂捉Y(jié)構(gòu)，使顆粒破碎。

4 結(jié)論

以廉價(jià)的玉米淀粉為原料，用a－淀粉酶處理，以環(huán)氧氯丙烷(ECH)為交聯(lián)劑，合成多孔交聯(lián)淀粉，并通過用紅外光譜(FTIR)、掃描電鏡(SEM)對其結(jié)果進(jìn)行表征，以及沉淀積、BET比表面積的測定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析表明:制備多孔交聯(lián)淀粉的最佳條件為:25 g多孔淀粉，堿性硫酸鈉溶液用量50 mL，環(huán)氧氯丙烷用量0.75 mL，反應(yīng)溫度25℃，反應(yīng)時(shí)間18 h。

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