楊海兵 劉偉 曹春華

【摘 要】目的：觀(guān)察和分析p53、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）在鼻咽癌患者組織中的表達(dá)及臨床意義。方法：收集40例鼻咽癌患者的組織蠟塊，隨機(jī)取同期鼻咽部慢性粘膜炎患者活檢蠟塊40例作對(duì)照。用免疫組化方法檢測(cè)組織蠟塊中p53、VEGF蛋白表達(dá)情況，并分析其臨床意義。

【關(guān)鍵詞】鼻咽癌；p53；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子

【中圖分類(lèi)號(hào)】R737.14 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1004-7484（2014）06-3428-01

【Abstract】Objective：To investigate the expressions and significance of p53 and vascular endothelial growth factor（VEGF） in tissue of nasopharyngeal carcinoma（ NPC）. Methods ：Forceps biopsies of 40 cases with NPC and 40 cases with chronicity blennymenitis of pars nasalis pharynges measured the expressions of p53 and VEGF by immunohis-tochemical staining analysis.Results：The expressions of p53 and VEGF in NPC were significantly higher than those in chronicity blennymenitis of pars nasalis pharynges （P<0.05）. Conclusion：p53 and VEGF may play an important role in the process of nasopharyngeal carcinoma.

【Key words】Nasopharyngeal carcinoma； p53； Vascular Endothelial Growth Factor

鼻咽癌（ Nasopharyngeal Carcinoma，NPC）是我國(guó)南方常見(jiàn)惡性腫瘤，研究表明， 鼻咽癌的癌變過(guò)程中存在大量差異表達(dá)基因，而p53 是重要的抑瘤基因，當(dāng) p53 基因缺失或發(fā)生異常，可使細(xì)胞遺傳特性發(fā)生改變： 出現(xiàn)染色體畸變；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）在鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展中可能起重要的作用，是特異的血管內(nèi)皮刺激因子。本研究對(duì)40例鼻咽癌患者癌組織中p53和VEGF蛋白表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)并分析其臨床意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇我院 2013年1月～2013年12月的鼻咽癌患者病例40例，其中男性30 例，同時(shí)隨機(jī)選取同期送檢的慢性鼻咽炎對(duì)照組40例。年齡31～75歲，平均年齡52.76±12.32歲。所有組織均常規(guī)經(jīng)10%中性福爾馬林液固定、石蠟包埋。本組40例鼻咽癌有35例伴頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，40例鼻咽癌組織學(xué)類(lèi)型均為非角化型未分化癌。

1.2 主要試劑

Envision試劑（Dako），P53單克隆抗體（Santa Cruz），PBS和TBS緩沖液（國(guó)藥集團(tuán)），VEGF免疫組化試劑盒（即用型Max Vision TM，福建邁新公司），DBA（Sigma），BCIP/NBT（amreMCo）， RMPI-1640（GIBCO）。

1.3 免疫組化檢測(cè)p53和VEGF的表達(dá)，采用免疫組織化學(xué)法染色，將上述標(biāo)本4μm連續(xù)切片，按檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)的檢測(cè)步驟進(jìn)行操作。結(jié)果判斷： p53免疫組化染色及VEGF免疫組化染色均以細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色染色為陽(yáng)性，。采用JVC TK-C1481BEC彩色攝像機(jī)、OLYMPUS BH2型生物顯微鏡、MIQAS醫(yī)學(xué)圖像定量分析系統(tǒng)及醫(yī)學(xué)圖像定量分析軟件進(jìn)行分析。每張切片隨機(jī)選取4個(gè)不重復(fù)視野，將呈現(xiàn)為棕黃色者視作陽(yáng)性目標(biāo)，用圖像分析軟件測(cè)定面積，取平均值作為最終結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用 SPSS13.0 統(tǒng)計(jì)軟件分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

3 討論

腫瘤的發(fā)生發(fā)展的生物學(xué)過(guò)程極其復(fù)雜。p53蛋白基因突變是各類(lèi)惡性腫瘤中最常見(jiàn)的基因變化之一，鐘碧玲等[1]研究了 43 例鼻咽癌標(biāo)本，發(fā)現(xiàn) p53 基因的過(guò)表達(dá)與鼻咽癌中癌細(xì)胞增殖活性呈正相關(guān)，且證實(shí)了突變型 p53有促進(jìn)細(xì)胞增殖作用?，F(xiàn)研究認(rèn)為，p53 在鼻咽癌細(xì)中的高表達(dá)提示p53 基因突變型或野生型 p53 功能改變可促使鼻咽癌的發(fā)生。大量實(shí)驗(yàn)表明血管生成是惡性腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素，腫瘤的持續(xù)生長(zhǎng)必須依賴(lài)新生血管的形成[2-3]，其中VEGF為最為重要，在血管生成過(guò)程中，可增加血管通透性，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，促使新生血管形成，其生物活性與實(shí)體瘤的生長(zhǎng)關(guān)系亦十分密切，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)多種惡性腫瘤中VEGF高表達(dá)，并認(rèn)為其與腫瘤的生長(zhǎng)和血管形成有密切關(guān)系[4]。研究表明VEGF在多種惡性腫瘤有較高水平的表達(dá)，如肺癌、乳腺癌、卵巢癌、胃癌等，并與腫瘤的預(yù)后有關(guān)，VEGF與頭頸部腫瘤也具有十分密切的關(guān)系[5]，而有關(guān)鼻咽癌中VEGF的表達(dá)報(bào)道較少，奚小彥等[6]研究VEGF的高表達(dá)與鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。

本研究表明鼻咽癌患者組織標(biāo)本中p53和VEGF水平明顯增高，進(jìn)一步表明兩者在鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展中可能起一定的作用。且p53和VEGF的表達(dá)呈正相關(guān)，提示在鼻咽癌患者中p53可能通過(guò)上調(diào)VEGF的表達(dá)，調(diào)節(jié)腫瘤血管的生成。因此，p53和VEGF的檢測(cè)有助于對(duì)鼻咽癌患者的監(jiān)測(cè)和隨訪(fǎng)，對(duì)鼻咽癌治療效果的判斷及復(fù)發(fā)的監(jiān)測(cè)可能有一定的臨床意義和參考價(jià)值，且方法簡(jiǎn)便可行，易于開(kāi)展。

參考文獻(xiàn)

[1] 鐘碧玲，宋永生.鼻咽癌中p53蛋白的積聚對(duì)瘤細(xì)胞有絲分裂和凋亡的影響[J].癌癥，2000，19（5）： 432.

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[6]奚少?gòu)?，吳秋良，宗永生，? 環(huán)氧化酶-2，表皮生長(zhǎng)因子受體與Ki-667在鼻咽癌中表達(dá)的臨床病理意義[J]，廣東醫(yī)學(xué)，2012，33（10）：1422-1425.