查嶺生+胡鵬+趙娟

摘 要：文章對“維生素C的含量測定”實驗做了總結(jié)和改進(jìn)，包括對維生素C的正確定義，實驗取材，提取液制備，測定方法的選擇等，以提高該實驗的教學(xué)效果。

關(guān)鍵詞：維生素C；L-抗壞血酸；實驗教學(xué)；改進(jìn)

中圖分類號Q547 文獻(xiàn)標(biāo)識碼A 文章編號1007-7731（2014）14-35-02

Discussion on the Experiment of “Determination of Vitamin C Content”

Zha Lingsheng1 et al.

（1School of Life Sciences，Huaibei Normal University，Huaibei 235000，China）

Abstract:Paper takes a summary to the experiment of“Determination of Vitamin C Content”，and provides some improvement steps and advice which include correct definition of Vitamin C，material selection，extract preparation，method selection and etc. It could improve the effect of its exprement teaching.

Key words:Vitamin C；L（+）-Ascorbic acid；Expriment teaching；Improvement

1 概念

維生素C（Vitamin C，Vc），又稱L-抗壞血酸。天然存在的抗壞血酸有L型（L-抗壞血酸）和D型（脫氫抗壞血酸）2種。維生素C脫去2個H后成為氧化型的脫氫抗壞血酸，當(dāng)有供氫體存在時，脫氫抗壞血酸又可變?yōu)檫€原型的L-抗壞血酸，所以脫氫抗壞血酸仍有維生素C的生理活性[1-3]。值得注意的是維生素C是指L-抗壞血酸，而非等同于抗壞血酸，有些文獻(xiàn)及教材[3-4]中將兩者混為一談。

2 Vc的穩(wěn)定性

所有綠色植物都能合成維生素C，人類自身不能合成維生素C，必須通過食物（主要是新鮮水果和蔬菜）獲取。維生素C在酸性環(huán)境中穩(wěn)定，遇空氣中氧、熱、光、堿性物質(zhì)，特別是由氧化酶及銅、鐵等金屬離子存在時，可促進(jìn)其氧化破壞。水果蔬菜中的抗壞血酸主要以L-抗壞血酸為主，氧化酶一般在蔬菜中含量較多，故蔬菜儲存過程中都有不同程度流失。但在某些果實中含有的生物類黃酮，能保護(hù)其穩(wěn)定性[3]。因此實驗取材要用新鮮的植物材料。

3 實驗取材

實驗取材時要考慮3個重要因素：（1）維生素C在植物組織中含量很低，因此要盡量選擇維生素C含量高的材料；（2）盡量不要選擇色素含量高，維生素C難以提取的材料；（3）植物組織的幼嫩組織（如葉片，葉尖等）維生素C含量相對較高[2]，提取起來也比較容易。筆者多年教學(xué)經(jīng)驗發(fā)現(xiàn)，新鮮的青椒、松樹的松針、鮮棗、獼猴桃等材料較適合實驗教學(xué)。

4 提取液制備

（1）溶解液。草酸廉價易得，有與磷酸相近的穩(wěn)定性，注意的是草酸不應(yīng)置于日光下，以免產(chǎn)生過氧化物，當(dāng)有催化劑（如Cu2+）存在時，過氧化物能破壞Vc。而醋酸適于浸提含有Fe2+的樣品。偏磷酸是Vc的最佳穩(wěn)定劑，且具有沉淀蛋白質(zhì)的作用，但其價格較貴，在室溫下放置易轉(zhuǎn)化為正磷酸，降低對Vc的穩(wěn)定性。（2）組織搗碎。盡量用組織搗碎機(jī)（或勻漿機(jī)）代替人工研磨的操作。（3）去雜。除去植物組織中的纖維素、葉綠素及沙土等雜質(zhì)，可選擇4 000r/min轉(zhuǎn)速下離心5～10min，操作簡單、時間短且效果佳。盡量摒棄原始的紗布過濾法，操作麻煩且誤差大。

5 維生素C的測定

目前維生素C的測定方法很多，對常見的一些方法做了比較如表1。

表1 維生素C含量測定的幾種不同方法比較

[方法&測定對象&主要儀器&注意事項&主要操作技能&2，6-二氯

靛酚法[5-7]&Vc &組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，滴定管&2，6-二氯靛酚染料不易放久；不適于色素難以去除的材料&組織搗碎，離心，定容，滴定&碘滴定法[7]&Vc&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，滴定管&不適于色素難以去除的材料；滴定操作要快&組織搗碎，離心，定容，滴定&磷鉬酸法[5]&Vc&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)， 電子天平，可見分光光度計&快速、準(zhǔn)確、靈敏度高；數(shù)據(jù)穩(wěn)定性、準(zhǔn)確性較好；對樣液顏色影響??；分光計的操作誤差&組織搗碎，離心，定容，可見分光光度計&2，4-二硝基

苯肼法[4，6，8]&總抗壞血酸&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)， 電子天平，可見分光光度計&不能測出Vc的含量；不適于色素難以去除的材料；分光計的操作誤差&組織搗碎，離心，定容，可見分光光度計&紫外分光

光度法[9]&Vc和脫氫

抗壞血酸&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，紫外分光光度計&實驗步驟較繁瑣；實驗誤差較大，難以把握&組織搗碎，離心，定容，紫外分光光度計&熒光分光

光度法[4，10]&總抗壞血酸&組織搗碎機(jī)，低速離心機(jī)，電子天平，熒光分光光度計&不能測出Vc的含量；效果不理想；熒光分光光度計不普及；實驗步驟繁瑣&組織搗碎，離心，定容，熒光分光光度計&高效液相

色譜法[11-12]&Vc和總抗

壞血酸&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，高效液相色譜儀，色譜柱，PDA檢測器&實驗成本高；儀器不普及；操作繁瑣&組織搗碎，離心，定容，高效液相色譜儀&近紅外

光譜法[13]&Vc&近紅外光譜儀，光纖探頭，硅檢測器&操作極簡單，但是儀器極不普及&近紅外光譜儀&極譜法[14]&Vc&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，極譜儀&極譜儀不普及&稱量，組織搗碎，離心，定容，極譜儀&]

6 討論

由表1不難看出，在維生素C測定的常見實驗方法中，適合教學(xué)的方法顯然是2，6-二氯靛酚法、碘滴定法和磷鉬酸法。3種方法的優(yōu)點在于：（1）都能夠測維生素C的含量。而其它方法中，有的只能測總抗壞血酸含量，有的實驗步驟繁瑣，有的用的是非常規(guī)實驗教學(xué)儀器，均不適合實驗教學(xué)；（2）操作性強(qiáng)。鍛煉了學(xué)生的一些基本的生物化學(xué)實驗技能如稱量、組織搗碎、離心、定容、滴定或者分光計的操作技能；（3）可行性強(qiáng)。多年的教學(xué)結(jié)果證明，學(xué)生用滴定法的測定結(jié)果比用分光光度法的準(zhǔn)確，原因是初學(xué)者在比色法操作時容易產(chǎn)生較大誤差。文中對實驗中的實驗取材和提取液制備等步驟做了改進(jìn)，以期提高實驗教學(xué)效果。

參考文獻(xiàn)

[1]陳建華，陳葵祖，吳梧桐. 維生素C生物轉(zhuǎn)化的現(xiàn)狀和進(jìn)展[J].藥物生物技術(shù)，1995，2（1）：56-60.

[2]曲佳，楊靜慧，梁國魯，等. 果蔬中的維生素C研究進(jìn)展[J].西南園藝，2005，33（6）：14-16.

[3]王鏡巖，朱圣庚，徐長法. 生物化學(xué)，第三版，上冊[M].北京：高等教育出版社，2002.

[4]魏群.基礎(chǔ)生物化學(xué)實驗，第三版[M].北京：高等教育出版社，2009.

[5]陳鈞輝.生物化學(xué)實驗，第四版[M].北京：科學(xué)出版社，2008.

[6]袁道強(qiáng)，黃建華.生物化學(xué)實驗和技術(shù)[M].北京：中國輕工業(yè)出版社，2006.

[7]王秀奇，秦淑媛，高天慧，等.基礎(chǔ)生物化學(xué)實驗，第二版[M].北京：高等教育出版社，2011.

[8]廖莉.蘿卜維生素C的分光光度法測定[J].科技創(chuàng)新導(dǎo)報，2009，（13）：10.

[9]高媛，張丙秀，高慶玉，等.草莓果實維生素C提取的影響因素研究[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，42（4）：161-163，167.

[10]崔香，寇雪玲.熒光分析法測定枸杞中維生素C[J].青海師范大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2009，（2）：58-60.

[11]刁娟娟，田蘭，孫煒，等.高效液相色譜法測定人血清中維生素 A、E、C的含量[J].化學(xué)通報，2010，9：826-831.

[12]張嘉嘉，孫鵬，周道順，等. 高效測定柿葉中維生素C的反相液相色譜法[J].計算機(jī)與應(yīng)用化學(xué)，2013，30（11）：1379-1382.

[13]金同銘，宋芳.一種快速測定完整黃瓜維生素C的新方法—近紅外光譜法（NIRs）[J].北京農(nóng)業(yè)科學(xué)，1993，11（4）：21-22.

[14]王佳露，劉軍.極譜法檢測芒果中的維生素C[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2008，29（22）：2748. （責(zé)編：吳祚云）

endprint

摘 要：文章對“維生素C的含量測定”實驗做了總結(jié)和改進(jìn)，包括對維生素C的正確定義，實驗取材，提取液制備，測定方法的選擇等，以提高該實驗的教學(xué)效果。

關(guān)鍵詞：維生素C；L-抗壞血酸；實驗教學(xué)；改進(jìn)

中圖分類號Q547 文獻(xiàn)標(biāo)識碼A 文章編號1007-7731（2014）14-35-02

Discussion on the Experiment of “Determination of Vitamin C Content”

Zha Lingsheng1 et al.

（1School of Life Sciences，Huaibei Normal University，Huaibei 235000，China）

Abstract:Paper takes a summary to the experiment of“Determination of Vitamin C Content”，and provides some improvement steps and advice which include correct definition of Vitamin C，material selection，extract preparation，method selection and etc. It could improve the effect of its exprement teaching.

Key words:Vitamin C；L（+）-Ascorbic acid；Expriment teaching；Improvement

1 概念

維生素C（Vitamin C，Vc），又稱L-抗壞血酸。天然存在的抗壞血酸有L型（L-抗壞血酸）和D型（脫氫抗壞血酸）2種。維生素C脫去2個H后成為氧化型的脫氫抗壞血酸，當(dāng)有供氫體存在時，脫氫抗壞血酸又可變?yōu)檫€原型的L-抗壞血酸，所以脫氫抗壞血酸仍有維生素C的生理活性[1-3]。值得注意的是維生素C是指L-抗壞血酸，而非等同于抗壞血酸，有些文獻(xiàn)及教材[3-4]中將兩者混為一談。

2 Vc的穩(wěn)定性

所有綠色植物都能合成維生素C，人類自身不能合成維生素C，必須通過食物（主要是新鮮水果和蔬菜）獲取。維生素C在酸性環(huán)境中穩(wěn)定，遇空氣中氧、熱、光、堿性物質(zhì)，特別是由氧化酶及銅、鐵等金屬離子存在時，可促進(jìn)其氧化破壞。水果蔬菜中的抗壞血酸主要以L-抗壞血酸為主，氧化酶一般在蔬菜中含量較多，故蔬菜儲存過程中都有不同程度流失。但在某些果實中含有的生物類黃酮，能保護(hù)其穩(wěn)定性[3]。因此實驗取材要用新鮮的植物材料。

3 實驗取材

實驗取材時要考慮3個重要因素：（1）維生素C在植物組織中含量很低，因此要盡量選擇維生素C含量高的材料；（2）盡量不要選擇色素含量高，維生素C難以提取的材料；（3）植物組織的幼嫩組織（如葉片，葉尖等）維生素C含量相對較高[2]，提取起來也比較容易。筆者多年教學(xué)經(jīng)驗發(fā)現(xiàn)，新鮮的青椒、松樹的松針、鮮棗、獼猴桃等材料較適合實驗教學(xué)。

4 提取液制備

（1）溶解液。草酸廉價易得，有與磷酸相近的穩(wěn)定性，注意的是草酸不應(yīng)置于日光下，以免產(chǎn)生過氧化物，當(dāng)有催化劑（如Cu2+）存在時，過氧化物能破壞Vc。而醋酸適于浸提含有Fe2+的樣品。偏磷酸是Vc的最佳穩(wěn)定劑，且具有沉淀蛋白質(zhì)的作用，但其價格較貴，在室溫下放置易轉(zhuǎn)化為正磷酸，降低對Vc的穩(wěn)定性。（2）組織搗碎。盡量用組織搗碎機(jī)（或勻漿機(jī)）代替人工研磨的操作。（3）去雜。除去植物組織中的纖維素、葉綠素及沙土等雜質(zhì)，可選擇4 000r/min轉(zhuǎn)速下離心5～10min，操作簡單、時間短且效果佳。盡量摒棄原始的紗布過濾法，操作麻煩且誤差大。

5 維生素C的測定

目前維生素C的測定方法很多，對常見的一些方法做了比較如表1。

表1 維生素C含量測定的幾種不同方法比較

[方法&測定對象&主要儀器&注意事項&主要操作技能&2，6-二氯

靛酚法[5-7]&Vc &組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，滴定管&2，6-二氯靛酚染料不易放久；不適于色素難以去除的材料&組織搗碎，離心，定容，滴定&碘滴定法[7]&Vc&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，滴定管&不適于色素難以去除的材料；滴定操作要快&組織搗碎，離心，定容，滴定&磷鉬酸法[5]&Vc&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)， 電子天平，可見分光光度計&快速、準(zhǔn)確、靈敏度高；數(shù)據(jù)穩(wěn)定性、準(zhǔn)確性較好；對樣液顏色影響?。环止庥嫷牟僮髡`差&組織搗碎，離心，定容，可見分光光度計&2，4-二硝基

苯肼法[4，6，8]&總抗壞血酸&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)， 電子天平，可見分光光度計&不能測出Vc的含量；不適于色素難以去除的材料；分光計的操作誤差&組織搗碎，離心，定容，可見分光光度計&紫外分光

光度法[9]&Vc和脫氫

抗壞血酸&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，紫外分光光度計&實驗步驟較繁瑣；實驗誤差較大，難以把握&組織搗碎，離心，定容，紫外分光光度計&熒光分光

光度法[4，10]&總抗壞血酸&組織搗碎機(jī)，低速離心機(jī)，電子天平，熒光分光光度計&不能測出Vc的含量；效果不理想；熒光分光光度計不普及；實驗步驟繁瑣&組織搗碎，離心，定容，熒光分光光度計&高效液相

色譜法[11-12]&Vc和總抗

壞血酸&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，高效液相色譜儀，色譜柱，PDA檢測器&實驗成本高；儀器不普及；操作繁瑣&組織搗碎，離心，定容，高效液相色譜儀&近紅外

光譜法[13]&Vc&近紅外光譜儀，光纖探頭，硅檢測器&操作極簡單，但是儀器極不普及&近紅外光譜儀&極譜法[14]&Vc&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，極譜儀&極譜儀不普及&稱量，組織搗碎，離心，定容，極譜儀&]

6 討論

由表1不難看出，在維生素C測定的常見實驗方法中，適合教學(xué)的方法顯然是2，6-二氯靛酚法、碘滴定法和磷鉬酸法。3種方法的優(yōu)點在于：（1）都能夠測維生素C的含量。而其它方法中，有的只能測總抗壞血酸含量，有的實驗步驟繁瑣，有的用的是非常規(guī)實驗教學(xué)儀器，均不適合實驗教學(xué)；（2）操作性強(qiáng)。鍛煉了學(xué)生的一些基本的生物化學(xué)實驗技能如稱量、組織搗碎、離心、定容、滴定或者分光計的操作技能；（3）可行性強(qiáng)。多年的教學(xué)結(jié)果證明，學(xué)生用滴定法的測定結(jié)果比用分光光度法的準(zhǔn)確，原因是初學(xué)者在比色法操作時容易產(chǎn)生較大誤差。文中對實驗中的實驗取材和提取液制備等步驟做了改進(jìn)，以期提高實驗教學(xué)效果。

參考文獻(xiàn)

[1]陳建華，陳葵祖，吳梧桐. 維生素C生物轉(zhuǎn)化的現(xiàn)狀和進(jìn)展[J].藥物生物技術(shù)，1995，2（1）：56-60.

[2]曲佳，楊靜慧，梁國魯，等. 果蔬中的維生素C研究進(jìn)展[J].西南園藝，2005，33（6）：14-16.

[3]王鏡巖，朱圣庚，徐長法. 生物化學(xué)，第三版，上冊[M].北京：高等教育出版社，2002.

[4]魏群.基礎(chǔ)生物化學(xué)實驗，第三版[M].北京：高等教育出版社，2009.

[5]陳鈞輝.生物化學(xué)實驗，第四版[M].北京：科學(xué)出版社，2008.

[6]袁道強(qiáng)，黃建華.生物化學(xué)實驗和技術(shù)[M].北京：中國輕工業(yè)出版社，2006.

[7]王秀奇，秦淑媛，高天慧，等.基礎(chǔ)生物化學(xué)實驗，第二版[M].北京：高等教育出版社，2011.

[8]廖莉.蘿卜維生素C的分光光度法測定[J].科技創(chuàng)新導(dǎo)報，2009，（13）：10.

[9]高媛，張丙秀，高慶玉，等.草莓果實維生素C提取的影響因素研究[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，42（4）：161-163，167.

[10]崔香，寇雪玲.熒光分析法測定枸杞中維生素C[J].青海師范大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2009，（2）：58-60.

[11]刁娟娟，田蘭，孫煒，等.高效液相色譜法測定人血清中維生素 A、E、C的含量[J].化學(xué)通報，2010，9：826-831.

[12]張嘉嘉，孫鵬，周道順，等. 高效測定柿葉中維生素C的反相液相色譜法[J].計算機(jī)與應(yīng)用化學(xué)，2013，30（11）：1379-1382.

[13]金同銘，宋芳.一種快速測定完整黃瓜維生素C的新方法—近紅外光譜法（NIRs）[J].北京農(nóng)業(yè)科學(xué)，1993，11（4）：21-22.

[14]王佳露，劉軍.極譜法檢測芒果中的維生素C[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2008，29（22）：2748. （責(zé)編：吳祚云）

endprint

摘 要：文章對“維生素C的含量測定”實驗做了總結(jié)和改進(jìn)，包括對維生素C的正確定義，實驗取材，提取液制備，測定方法的選擇等，以提高該實驗的教學(xué)效果。

關(guān)鍵詞：維生素C；L-抗壞血酸；實驗教學(xué)；改進(jìn)

中圖分類號Q547 文獻(xiàn)標(biāo)識碼A 文章編號1007-7731（2014）14-35-02

Discussion on the Experiment of “Determination of Vitamin C Content”

Zha Lingsheng1 et al.

（1School of Life Sciences，Huaibei Normal University，Huaibei 235000，China）

Abstract:Paper takes a summary to the experiment of“Determination of Vitamin C Content”，and provides some improvement steps and advice which include correct definition of Vitamin C，material selection，extract preparation，method selection and etc. It could improve the effect of its exprement teaching.

Key words:Vitamin C；L（+）-Ascorbic acid；Expriment teaching；Improvement

1 概念

維生素C（Vitamin C，Vc），又稱L-抗壞血酸。天然存在的抗壞血酸有L型（L-抗壞血酸）和D型（脫氫抗壞血酸）2種。維生素C脫去2個H后成為氧化型的脫氫抗壞血酸，當(dāng)有供氫體存在時，脫氫抗壞血酸又可變?yōu)檫€原型的L-抗壞血酸，所以脫氫抗壞血酸仍有維生素C的生理活性[1-3]。值得注意的是維生素C是指L-抗壞血酸，而非等同于抗壞血酸，有些文獻(xiàn)及教材[3-4]中將兩者混為一談。

2 Vc的穩(wěn)定性

所有綠色植物都能合成維生素C，人類自身不能合成維生素C，必須通過食物（主要是新鮮水果和蔬菜）獲取。維生素C在酸性環(huán)境中穩(wěn)定，遇空氣中氧、熱、光、堿性物質(zhì)，特別是由氧化酶及銅、鐵等金屬離子存在時，可促進(jìn)其氧化破壞。水果蔬菜中的抗壞血酸主要以L-抗壞血酸為主，氧化酶一般在蔬菜中含量較多，故蔬菜儲存過程中都有不同程度流失。但在某些果實中含有的生物類黃酮，能保護(hù)其穩(wěn)定性[3]。因此實驗取材要用新鮮的植物材料。

3 實驗取材

實驗取材時要考慮3個重要因素：（1）維生素C在植物組織中含量很低，因此要盡量選擇維生素C含量高的材料；（2）盡量不要選擇色素含量高，維生素C難以提取的材料；（3）植物組織的幼嫩組織（如葉片，葉尖等）維生素C含量相對較高[2]，提取起來也比較容易。筆者多年教學(xué)經(jīng)驗發(fā)現(xiàn)，新鮮的青椒、松樹的松針、鮮棗、獼猴桃等材料較適合實驗教學(xué)。

4 提取液制備

（1）溶解液。草酸廉價易得，有與磷酸相近的穩(wěn)定性，注意的是草酸不應(yīng)置于日光下，以免產(chǎn)生過氧化物，當(dāng)有催化劑（如Cu2+）存在時，過氧化物能破壞Vc。而醋酸適于浸提含有Fe2+的樣品。偏磷酸是Vc的最佳穩(wěn)定劑，且具有沉淀蛋白質(zhì)的作用，但其價格較貴，在室溫下放置易轉(zhuǎn)化為正磷酸，降低對Vc的穩(wěn)定性。（2）組織搗碎。盡量用組織搗碎機(jī)（或勻漿機(jī)）代替人工研磨的操作。（3）去雜。除去植物組織中的纖維素、葉綠素及沙土等雜質(zhì)，可選擇4 000r/min轉(zhuǎn)速下離心5～10min，操作簡單、時間短且效果佳。盡量摒棄原始的紗布過濾法，操作麻煩且誤差大。

5 維生素C的測定

目前維生素C的測定方法很多，對常見的一些方法做了比較如表1。

表1 維生素C含量測定的幾種不同方法比較

[方法&測定對象&主要儀器&注意事項&主要操作技能&2，6-二氯

靛酚法[5-7]&Vc &組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，滴定管&2，6-二氯靛酚染料不易放久；不適于色素難以去除的材料&組織搗碎，離心，定容，滴定&碘滴定法[7]&Vc&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，滴定管&不適于色素難以去除的材料；滴定操作要快&組織搗碎，離心，定容，滴定&磷鉬酸法[5]&Vc&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)， 電子天平，可見分光光度計&快速、準(zhǔn)確、靈敏度高；數(shù)據(jù)穩(wěn)定性、準(zhǔn)確性較好；對樣液顏色影響?。环止庥嫷牟僮髡`差&組織搗碎，離心，定容，可見分光光度計&2，4-二硝基

苯肼法[4，6，8]&總抗壞血酸&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)， 電子天平，可見分光光度計&不能測出Vc的含量；不適于色素難以去除的材料；分光計的操作誤差&組織搗碎，離心，定容，可見分光光度計&紫外分光

光度法[9]&Vc和脫氫

抗壞血酸&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，紫外分光光度計&實驗步驟較繁瑣；實驗誤差較大，難以把握&組織搗碎，離心，定容，紫外分光光度計&熒光分光

光度法[4，10]&總抗壞血酸&組織搗碎機(jī)，低速離心機(jī)，電子天平，熒光分光光度計&不能測出Vc的含量；效果不理想；熒光分光光度計不普及；實驗步驟繁瑣&組織搗碎，離心，定容，熒光分光光度計&高效液相

色譜法[11-12]&Vc和總抗

壞血酸&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，高效液相色譜儀，色譜柱，PDA檢測器&實驗成本高；儀器不普及；操作繁瑣&組織搗碎，離心，定容，高效液相色譜儀&近紅外

光譜法[13]&Vc&近紅外光譜儀，光纖探頭，硅檢測器&操作極簡單，但是儀器極不普及&近紅外光譜儀&極譜法[14]&Vc&組織搗碎機(jī)，離心機(jī)，電子天平，極譜儀&極譜儀不普及&稱量，組織搗碎，離心，定容，極譜儀&]

6 討論

由表1不難看出，在維生素C測定的常見實驗方法中，適合教學(xué)的方法顯然是2，6-二氯靛酚法、碘滴定法和磷鉬酸法。3種方法的優(yōu)點在于：（1）都能夠測維生素C的含量。而其它方法中，有的只能測總抗壞血酸含量，有的實驗步驟繁瑣，有的用的是非常規(guī)實驗教學(xué)儀器，均不適合實驗教學(xué)；（2）操作性強(qiáng)。鍛煉了學(xué)生的一些基本的生物化學(xué)實驗技能如稱量、組織搗碎、離心、定容、滴定或者分光計的操作技能；（3）可行性強(qiáng)。多年的教學(xué)結(jié)果證明，學(xué)生用滴定法的測定結(jié)果比用分光光度法的準(zhǔn)確，原因是初學(xué)者在比色法操作時容易產(chǎn)生較大誤差。文中對實驗中的實驗取材和提取液制備等步驟做了改進(jìn)，以期提高實驗教學(xué)效果。

參考文獻(xiàn)

[1]陳建華，陳葵祖，吳梧桐. 維生素C生物轉(zhuǎn)化的現(xiàn)狀和進(jìn)展[J].藥物生物技術(shù)，1995，2（1）：56-60.

[2]曲佳，楊靜慧，梁國魯，等. 果蔬中的維生素C研究進(jìn)展[J].西南園藝，2005，33（6）：14-16.

[3]王鏡巖，朱圣庚，徐長法. 生物化學(xué)，第三版，上冊[M].北京：高等教育出版社，2002.

[4]魏群.基礎(chǔ)生物化學(xué)實驗，第三版[M].北京：高等教育出版社，2009.

[5]陳鈞輝.生物化學(xué)實驗，第四版[M].北京：科學(xué)出版社，2008.

[6]袁道強(qiáng)，黃建華.生物化學(xué)實驗和技術(shù)[M].北京：中國輕工業(yè)出版社，2006.

[7]王秀奇，秦淑媛，高天慧，等.基礎(chǔ)生物化學(xué)實驗，第二版[M].北京：高等教育出版社，2011.

[8]廖莉.蘿卜維生素C的分光光度法測定[J].科技創(chuàng)新導(dǎo)報，2009，（13）：10.

[9]高媛，張丙秀，高慶玉，等.草莓果實維生素C提取的影響因素研究[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，42（4）：161-163，167.

[10]崔香，寇雪玲.熒光分析法測定枸杞中維生素C[J].青海師范大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2009，（2）：58-60.

[11]刁娟娟，田蘭，孫煒，等.高效液相色譜法測定人血清中維生素 A、E、C的含量[J].化學(xué)通報，2010，9：826-831.

[12]張嘉嘉，孫鵬，周道順，等. 高效測定柿葉中維生素C的反相液相色譜法[J].計算機(jī)與應(yīng)用化學(xué)，2013，30（11）：1379-1382.

[13]金同銘，宋芳.一種快速測定完整黃瓜維生素C的新方法—近紅外光譜法（NIRs）[J].北京農(nóng)業(yè)科學(xué)，1993，11（4）：21-22.

[14]王佳露，劉軍.極譜法檢測芒果中的維生素C[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2008，29（22）：2748. （責(zé)編：吳祚云）

endprint