丁 寧 張 梅 張琳麗 張艷慧

(河北醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)課教學(xué)部，河北 石家莊 050091)

2010年中國居民營養(yǎng)與健康現(xiàn)狀調(diào)查表明〔1〕，我國成人脂代謝紊亂的患病高達2.6億，40歲以上人群的患病率為84.29%〔2〕。其主要原因是膽固醇酯轉(zhuǎn)運蛋白(CETP)及肝臟甘油三酯脂酶(HTGL)活性降低引起〔3〕。本研究采用高脂飲食復(fù)制脂代謝紊亂大鼠模型，給予破血逐瘀攻補兼施之大黃蜇蟲丸干預(yù)。觀察血脂代謝情況，以血清甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白 (LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)為檢測指標(biāo)，并觀測血漿中血栓素(TXB2)6-酮-前列腺素F(6-Keto-PGF)1α水平，以探討血小板活化水平與脂代謝紊亂的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1實驗動物 8周齡清潔級雄性Wistar大鼠50只(購自河北醫(yī)科大學(xué)動物實驗中心，合格批號905104)。體重180～200 g，由專人在符合清潔標(biāo)準(zhǔn)的實驗室(溫度22℃～25℃濕度50%～70%)喂養(yǎng)。

1.2藥品 大黃蜇蟲丸購自北京同仁堂股份有限公司同仁堂制藥廠，實驗前將藥物研磨按劑量比配制成2個濃度混懸液(1 g/kg用藥量相當(dāng)于成人每日每公斤體重的10倍，2 g/kg用藥量相當(dāng)于成人每日每公斤體重的20倍)供使用。血脂康，北京北大威信生物科技有限公司。丙硫氧嘧啶，上海朝暉藥業(yè)有限公司。TC，河南省平頂山市東珠生物制品有限公司。膽酸鈉，河北斯邁特生物技術(shù)有限公司。

1.3試劑及儀器 TXB2放免試劑盒，解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心。6-Keto-PGF1α放免試劑盒，解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心。γ-放射免疫計數(shù)器，西安二六二廠FJ-2021。倒置相差顯微鏡，日本Olympus IX-70。全自動三分群血液細胞分析儀，深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司。半自動生化儀，德國豪邁Humalyzer2000。立式低溫冷藏箱，青島海爾醫(yī)用低溫科技有限公司DW-40L262。酶聯(lián)免疫檢測儀，芬蘭雷勃MK3。

1.4方法

1.4.1動物分組與模型制備 選用體重為180～200 g健康清潔級雄性Wistar大鼠50只，適應(yīng)性喂養(yǎng)1 w，隨機分為5組，每組10只：空白對照組，模型組，大黃蟄蟲丸低劑量組，大黃蟄蟲丸高劑量組，血脂康組?？瞻讓φ战M給予普通飼料喂養(yǎng)，其余組給予高脂飼料(高脂飼料由87.6%普通飼料、10%豬油、2%TC、0.2%膽酸鈉、0.2%丙硫氧嘧啶組成)喂養(yǎng)。

1.4.2給藥方法 空白對照組：給普通飼料，同時給予蒸餾水每日(10 ml/kg)灌胃；模型組：給高脂飼料，同時給予蒸餾水每日(10 ml/kg)灌胃；模型組：給高脂飼料，同時給予蒸餾水每日(1 g/kg)灌胃；大黃蟄蟲丸高劑量組：給高脂飼料，同時給予每日高劑量大黃蟄蟲丸水提物灌胃(2 g/kg)；血脂康組：給高脂飼料，同時給予每日血脂康灌胃(0.2 g/kg)；連續(xù)喂養(yǎng)8 w，末次給藥后，禁食12 h，斷頭取血，留取血清、血漿標(biāo)本，-4℃保存，待用于生化指標(biāo)及TXB2和6-Keto-PGF1α的檢測。

1.4.3生化指標(biāo)檢測 TG、TC、HDL-C和LDL-C用全自動生化分析儀測定。

1.4.4血漿TXB2和6-Keto-PGF1α水平測定 采用非平衡放射免疫法測定6-Keto-PGF1α，采用平衡放射免疫法測定TXB2。檢測步驟嚴(yán)格按照試劑盒要求由專人操作。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法 使用SPSS13.0軟件進方差分析q檢驗秩和檢驗。

2 結(jié) 果

2.1大黃蜇蟲丸對脂代謝紊亂大鼠血脂的影響 模型組與空白對照組相比，模型組大鼠血清TC顯著升高(P<0.05)，TG、LDL-C較空白對照組顯著升高(P<0.01)，HDL-C較空白對照組顯著降低有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。大黃蟄蟲丸低劑量組與模型組相比，大鼠TG、TC、LDL-C均明顯降低(P<0.05)，而HDL-C明顯升高(P<0.05)；大黃蟄蟲丸高劑量組與模型組相比，TC顯著降低(P<0.01)，TG、LDL-C均明顯降低(P<0.05)，而大鼠HDL-C明顯升高(P<0.05)；大黃蟄蟲丸高劑量組與大黃蟄蟲丸低劑量組相比，大鼠TG、LDL-C均降低，有優(yōu)于低劑量組的趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05) ；大黃蟄蟲丸低劑量組大鼠HDL-C升高，有優(yōu)于高劑量組的趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義；低、高劑量組與血脂康組相比，大鼠TC、TG、LDL-C均降低，有優(yōu)于血脂康組的趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

2.2大黃蜇蟲丸對脂代謝紊亂大鼠TXB2及6-Keto-PGF1α的影響 模型組與空白對照組相比，模型組中大鼠血漿TXB2較空白對照組明顯升高(P<0.01)，6-Keto-PGF1α明顯降低(P<0.01)；大黃蜇蟲丸低劑量組與模型組相比，大鼠血漿TXB2降低(P<0.01)，6-Keto-PGF1α升高(P<0.01) ；大黃蜇蟲丸高劑量組與模型組相比，血漿TXB2明顯降低(P<0.01)，6-Keto-PGF1α升高，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；大黃蜇蟲丸高劑量組與大黃蜇蟲丸低劑量組相比，低劑量組血漿TXB2降低，6-Keto-PGF1α升高，有優(yōu)于高劑量組的趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，大黃蜇蟲丸低、高劑量組與血脂康組相比，低劑量組血漿TXB2降低，6-Keto-PGF1α升高，高劑量組TXB2降低，有優(yōu)于血脂康組的趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 實驗大鼠各組血脂水平、TXB2、6-Keto-PGF1α的比較±s,n=10)

3 討 論

高脂血癥對人體的危害極其嚴(yán)重，隨著脂質(zhì)在機體不同部位的沉積，可導(dǎo)致各種類型疾病的發(fā)生。如脂質(zhì)在真皮內(nèi)沉積引發(fā)黃色瘤；脂質(zhì)尤其是脂蛋白殘粒、變性LDL、B型LDL、Lp(a)等顆粒在血管內(nèi)皮沉積，誘導(dǎo)一系列炎性反應(yīng)、氧化損傷等，導(dǎo)致血管管腔變窄、彈性減弱，引發(fā)動脈粥樣硬化，產(chǎn)生心腦血管疾??；TG的大顆粒脂蛋白在眼底小動脈沉積引發(fā)高脂血癥眼底改變；而嚴(yán)重的高TG血癥，特別是當(dāng)TC>1 000 mg/dl，或11.3 mmol/L時，可引發(fā)急性胰腺炎；輕到中度高TG血癥，TC>200 mg/dl，或2.3 mmol/L，可使心腦血管事件發(fā)生的危險性增高2倍多〔4〕。另外脂代謝紊亂患者多伴有身體肥胖，以及不同程度的胰島β細胞功能受損和胰島素抵抗(IR)。研究表明長期的高胰島素血癥可導(dǎo)致高脂血癥〔5〕。這可能與高胰島素血癥通過影響脂肪代謝以及肝臟脂肪合成有關(guān)。其機制尚未明確，研究表明〔6～8〕胰島素是一種生長因子，可刺激胰島素生長因子IGF-1的分泌，增強LDL-C受體活性，從而使內(nèi)源性膽固醇合成增多；脂肪組織存在IR時，糖的利用率降低，導(dǎo)致脂肪組織大量釋放血漿游離脂肪酸(FFA)，可增加肝臟對極低密度脂肪蛋白(VLDL)的合成；同時胰島素濃度增加可抑制脂蛋白脂肪酶(LPL)活性，降低VLDL的清除率，致使脂質(zhì)在血液及組織中過量沉積，導(dǎo)致疾病的發(fā)展。

傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)并無“脂代謝紊亂”這一概念，但很早就有關(guān)于“膏、脂”的論述?！鹅`樞·衛(wèi)氣失常篇》所謂“膏者，多氣而皮縱緩，故能縱腹垂腴。脂者，其身瘦小”。認(rèn)為膏脂具有一定的生理功效“內(nèi)滲于骨空，補益腦髓，而下流于陰股”。病理狀態(tài)時則為“血氣俱盛而陰氣多者，其血滑，刺之，陽氣蓄積，久留而不瀉者，其血黑以濁，故不能射”。其中“黑、濁”二字形象地說明了膏脂處于病理狀態(tài)“盛、多”之時血液的黏稠性、色調(diào)，究其病因，眾說紛紜，有從脾胃、痰濕、正虛等論治。現(xiàn)代醫(yī)家結(jié)合西方醫(yī)學(xué)的先進研究手段，觀測到高脂血癥多伴有血流動力學(xué)的改變〔9〕，故此從淤血論治者亦有，采用中藥、針灸相結(jié)合的治療方法，充分發(fā)揮了傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的優(yōu)勢。

血漿TG、TC、LDL-C、HDL-C是臨床上判定血脂代謝情況的常用指標(biāo)。故本實驗選取上述四者作為觀察血脂變化的指標(biāo)，本結(jié)果顯示大黃蜇蟲丸能明顯調(diào)節(jié)血脂，改善脂代謝紊亂。高脂血癥患者體內(nèi)多伴有血液流變學(xué)的改變，可促進白細胞活化，釋放白細胞介素、腫瘤壞死因子、氧自由基等炎性介質(zhì)，誘導(dǎo)血小板聚集，還可滅活一氧化氮(NO)，并引發(fā)LDL-C氧化修飾；同時血脂異常還可影響到纖溶功能，干擾纖溶系統(tǒng)激活；增加HDL-C可抑制TXB2的升高和PGI的降低，有助于協(xié)調(diào)TXA2/PGI2的平衡；高脂血癥的脂毒性，損傷內(nèi)皮而激活血小板，也是血小板聚集的機制之一。血小板活化與LDL-C循環(huán)水平密切相關(guān)，高水平的循環(huán)LDL-C可促進血小板的激活〔10〕。國內(nèi)學(xué)者已證明〔11〕循環(huán)ADP可誘導(dǎo)的TXA2含量明顯升高，其機制可能與血小板中鈣調(diào)蛋白CaM相關(guān)。另有陳繼紅〔12〕在研究大黃蟄蟲丸對阿霉素腎硬化大鼠血脂、TXB2、6-Keto-PGFF1α的影響，該結(jié)果顯示，大黃蜇蟲丸可明顯降低血漿TC含量，升高6-Keto-PGFF1α及降低TXB2水平，調(diào)節(jié)TXB/PGF平衡，提示大黃蟄蟲丸能夠降低血脂異常大鼠TX分泌，提高前列腺素水平，通過調(diào)節(jié)TX/前列腺素平衡，來調(diào)節(jié)異常之血脂。

4 參考文獻

1楊曉光,翟鳳英,樸建華，等.中國居民營養(yǎng)狀況調(diào)查〔J〕.中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2010；11(1)：5-8.

2李樹立.脂代謝紊亂患者的健康教育〔J〕.中國民康醫(yī)學(xué)，2011；23(4)：496-7.

3Mattar M，Obeid O.Fish oil and the management of hypertriglyceridemia〔J〕.Nutr Health，2009；20(1)：41-9.

4Hansotia T，Maida A，F(xiàn)lock G，etal.Extrapancreatic in cretin receptorsmodulate glucose homeostasis，body weight，and energy expenditure〔J〕.J Clin Invest，2007；117(1)：143-52.

5Resnick HE，F(xiàn)oster GL，Bardsley J，etal.Achievement of American Diabetes Association clinical practice recommendations among US adults with diabetes1999-2002：the National Health and Nutrition Examination Survey〔J〕.Diabetes Care，2006；29(3)：531-7.

6Hodge D，Nguyen TT.Predictors of macrovascular disease in patients with type 2 diabetes mellitus〔J〕.Mayo Clin Proc，2001；76：707-12.

7Schultz K，Rasmussen LM，Ledet T.Effects of insulin，glucose，IGR-1，or growth hormone on human arterial smooth muscle cells〔J〕.Metabolism，2005；54(3)：287-95.

8Goldstein DE，Little RR，Lorenz RA，etal.Tests of glycemia in diabetes〔J〕.Diabetes Care，2004；27(7)：1761-73.

9Park KS，Lee YS，Park HW.Factors associated or related to pathological severity of nonalcoholic fatty liver disease〔J〕.Korean J Inter Med，2004；19(1)：19-26.

10Iwaki T，Cooper MJ，Brechmann M.A fibrinogen deficiency accelerates the initiation of LDL cholesterol-driven atherosclerosis via thrombin generation and platelet activation in genetically predisposed mice〔J〕.Blood，2006；107(10)：3883-91.

11戴建威,徐東剛，龍民慧.Sak衍生體對高血脂大鼠血小板功能的影響及其作用機制〔D〕.吉林大學(xué)學(xué)報，2010:5-28.

12陳繼紅.大黃麈蟲丸對阿霉素腎硬化大鼠血栓素B2、6-酮-前列腺素F1α的影響〔J〕.中國中醫(yī)藥信息雜志，2007；14(10): 26-7.