魏 卓（吉林省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林 長(zhǎng)春 130000）

淋病作為威脅公眾健康的重要疾病之一，是以淋病奈瑟菌為病原體，以泌尿生殖系統(tǒng)發(fā)生化膿性感染為主要臨床表現(xiàn)的性傳播疾病[1]。快速、準(zhǔn)確的淋病奈瑟菌檢測(cè)，對(duì)于淋病的診治以及控制具有十分重要的意義。目前臨床上有多種方法可檢測(cè)淋病奈瑟菌，各有利弊，而細(xì)菌培養(yǎng)法與PCR檢測(cè)法是較常用的方法。筆者對(duì)60例疑似淋病患者生殖道分泌物同時(shí)進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、PCR檢測(cè)，并對(duì)其結(jié)果進(jìn)行比較，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：60例研究病例均來(lái)自2011年6月～2013年10月我院門(mén)診及婦科就診的擬診為淋病患者。男12例，女48例，平均年齡29.2歲，病史1個(gè)月～2年。

1.2 標(biāo)本采集方法：男性患者：將棉拭子置入患者尿道的1～3 cm處，輕轉(zhuǎn)棉拭子幾周后取出，以便蘸取生殖道分泌物或前列腺液[2]。女性患者：用棉拭子采集宮頸口2～3 cm處及后穹隆分泌物[3]。取出后的棉拭子應(yīng)立即放入無(wú)菌試管內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)方法及試劑

1.3.1 細(xì)菌培養(yǎng)法：取材后每份立即接種2個(gè)血瓊脂平板和1個(gè)巧克力平板。1個(gè)血瓊脂平板和巧克力平板放入35℃、6%（V/V）CO2培養(yǎng)箱，1個(gè)血瓊脂平板放入35℃需氧培養(yǎng)箱，培養(yǎng)48 h。嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)及《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行鑒定[4]。

1.3.2 PCR檢測(cè)方法：嚴(yán)格按照PCR試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.3.3 試劑：熒光實(shí)時(shí)定量PCR試劑盒，由大連寶生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。血瓊脂培養(yǎng)基、巧克力培養(yǎng)基及生化試劑，由上海信然實(shí)業(yè)有限公司。

1.4 效果評(píng)定：細(xì)菌經(jīng)培養(yǎng)后，圓形、凸起、濕潤(rùn)、半透明或灰白菌落呈氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性和革蘭染色陰性的判定為淋病奈瑟球菌陽(yáng)性。PCR法：通過(guò)凝膠電泳觀察色帶判定結(jié)果。依據(jù)淋病奈瑟菌陽(yáng)性檢測(cè)率，評(píng)定其檢測(cè)方法的效果。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：使用SPSS 16.0對(duì)各項(xiàng)資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

對(duì)疑似淋病奈瑟菌感染患者的檢測(cè)結(jié)果表明：采用細(xì)菌培養(yǎng)法檢測(cè)60例樣本中26例為淋病奈瑟菌陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率為43.3%；采用PCR方法檢測(cè)60例樣本中45例為淋病奈瑟菌陽(yáng)性，陽(yáng)性檢出率為75.0%。兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳見(jiàn)表1。

表1 兩種檢測(cè)方法陽(yáng)性檢出情況比較

3 討論

淋病作為我國(guó)日趨流行的性傳播疾病之一，主要通過(guò)性接觸傳播。當(dāng)被淋病奈瑟菌感染后，患者出現(xiàn)畏寒、發(fā)熱、尿頻、尿急、尿痛、尿道口有膿性分泌物、宮頸紅腫、分泌物增多、子宮附件炎以及皮膚、關(guān)節(jié)出現(xiàn)炎性反應(yīng)性病變。雖然本病具有高傳染性、發(fā)病急、局部癥狀重等特點(diǎn)。但是有一部分患者，感染淋病奈瑟菌后無(wú)臨床癥狀，甚至有文獻(xiàn)報(bào)道60%為無(wú)癥狀的陰性帶菌者，不易察覺(jué)，危害性更大，這對(duì)于控制疾病的傳播極為不利[5]。

目前臨床診斷淋病主要依據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢查。其中對(duì)淋病奈瑟菌檢測(cè)常用方法有分泌物直接涂片法、快速抗原檢測(cè)法、細(xì)菌培養(yǎng)法、聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測(cè)法。分泌物直接涂片法雖然方法簡(jiǎn)便、易鑒定，但其陽(yáng)性檢測(cè)率低，誤診率、漏診率高?？焖倏乖瓩z測(cè)法作為無(wú)創(chuàng)性檢測(cè)方法，具有無(wú)需任何儀器設(shè)備、操作時(shí)間短、易于肉眼觀察等優(yōu)勢(shì)，但同樣存在陽(yáng)性檢測(cè)率低的問(wèn)題[6]。

細(xì)菌培養(yǎng)法是目前世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的淋病檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)[7]。細(xì)菌培養(yǎng)法對(duì)標(biāo)本采集、檢測(cè)人員操作技術(shù)、細(xì)菌培養(yǎng)條件均有較高的要求。同時(shí)本方法檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、操作繁瑣、服用抗生素易產(chǎn)生假陰性等缺點(diǎn)。以上各要素在一定程度上均可影響細(xì)菌的陽(yáng)性檢出率。PCR檢測(cè)方法是通過(guò)體外酶合成特異性DNA片段來(lái)檢測(cè)目的DNA片段的方法，因此具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便的特點(diǎn)。本方法較細(xì)菌培養(yǎng)法比較，對(duì)標(biāo)本的質(zhì)量要求低，對(duì)于死亡的細(xì)菌同樣具有特異性。同時(shí)，PCR檢測(cè)法是針對(duì)細(xì)菌的DNA進(jìn)行檢測(cè)，因此它能克服標(biāo)本過(guò)少的問(wèn)題。本研究的結(jié)果表明，細(xì)菌培養(yǎng)法陽(yáng)性檢出率為43.3%；PCR檢測(cè)方法陽(yáng)性檢出率為75.0%，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。筆者認(rèn)為，對(duì)于淋病奈瑟菌采用PCR檢測(cè)方法具有高效率、高特異性、低誤診率、低漏診率，是臨床上檢測(cè)淋病奈瑟菌的好方法。

[1] 陳秀英.應(yīng)用細(xì)菌培養(yǎng)法與PCR檢測(cè)法檢測(cè)淋病奈瑟菌的對(duì)比研究[J].求醫(yī)問(wèn)藥,2012,10(5):236.

[2] 稅開(kāi)毅.三種檢測(cè)淋病奈瑟菌方法結(jié)果比較[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新,2009,6(29):137.

[3] 舒培敬.淋病奈瑟菌不同檢測(cè)方法的效果評(píng)價(jià)[J].中國(guó)民族民間醫(yī)藥,2009,11(4):2.

[4] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社,2009:779.

[5] 吳玉霞.淋病奈瑟菌的細(xì)菌培養(yǎng)與PCR方法檢測(cè)的結(jié)果對(duì)比[J].右江醫(yī)學(xué),2011,39(3):337.

[6] 陳 響,尚 紅.常見(jiàn)性傳播疾病實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的評(píng)價(jià)[J].遼寧醫(yī)學(xué)雜志,2004,18(6):322.

[7] Zohar Y,Cueto JA,Elizur A,et al.Neuroendocrinology of reproduction inteleost fi sh[J].Gen Comp Endocrinol,2010,165(3):438.