王春平 毛旭東 盛宏光

(1.江蘇大學(xué)醫(yī)學(xué)院，江蘇鎮(zhèn)江 212002；2.上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院內(nèi)分泌科，上海 200031)

維生素D是一種脂溶性維生素，參與維持人體內(nèi)鈣離子的平衡。維生素D缺乏可導(dǎo)致骨質(zhì)疏松，其制劑已廣泛應(yīng)用于骨質(zhì)疏松癥的治療。維生素D受體(vitamin D receptor,VDR)在人體內(nèi)廣泛分布，維生素D與VDR結(jié)合后還具有多種骨骼外效應(yīng)，如增強(qiáng)機(jī)體免疫、減輕炎性反應(yīng)以及通過調(diào)節(jié)細(xì)胞周期而降低癌癥風(fēng)險(xiǎn)等。本研究采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS/MS)檢測上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院住院患者的維生素D2和維生素D3水平，旨在為上海市徐匯區(qū)住院患者維生素D相關(guān)疾病的研究和治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 上海市徐匯區(qū)中心醫(yī)院2012年5月—2013年1月收治2315例住院患者，其中男性1084例(46.83％)、女性1231例(53.17％)；年齡為21～101歲，平均年齡(78.42±11.92)歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：肝功能不全、腎功能不全、惡性腫瘤、甲狀腺功能亢進(jìn)/減退﹑甲狀旁腺功能亢進(jìn)/減退、激素服用者及3個(gè)月內(nèi)未服用含維生素D的保健品及藥品者。2315例入組患者或其家屬均簽署了知情同意書。男女性患者人數(shù)相近(P>0.05)，具有可比性。

1.2 儀器和材料 抽取空腹血清，采用LC-MS/MS法，以25-羥基維生素D2-氘3和25-羥基維生素D3-氘6為內(nèi)標(biāo)測定25(OH)D2和25(OH)D3，用Analyst1.5軟件采集檢測數(shù)據(jù)并作定量分析。 同時(shí)，采用常規(guī)生化法測定甲狀旁腺素(PTH)水平、肝腎功能等。API 4000串聯(lián)質(zhì)譜儀購自美國AB SCIEX公司，Shimadzu系列液相色譜儀購自日本島津公司。低、中、高濃度質(zhì)控的準(zhǔn)確度應(yīng)為85％～115％，精密度(CV)應(yīng)在15％以內(nèi)。PTH采用德國西門子公司IMMULITE儀器化學(xué)發(fā)光法測定。

2 結(jié) 果

2.1 2315例受試者的25(OH)D、PTH的平均濃度 25(OH)D2平均濃度為(1.58±2.08)ng/mL，25(OH)D3為(14.23±7.47)ng/mL，總25(OH)D為(15.81±7.98)ng/mL，PTH為(48.92±28.65)pg/mL。

2.2 2315例受試者的25(OH)D的性別、年齡及濃度分布 見表1～3。

表1 2315例受試者的25(OH)D性別分布

表2 2315例受試者的25(OH)D年齡分布

表3 2315例受試者的25(OH)D濃度分布

2.3 25(OH)D與PTH的濃度關(guān)系 2315例受試者中，PTH濃度正常(10～65 pg/mL)者有1787例(77.19％)，其中男性813例(45.5％)，女性974例(54.5％)；此2315例的25(OH)D2濃度為(1.62±2.02)ng/mL,25(OH)D3為(4.62±7.06)ng/mL,總25(OH)D為(16.24±7.28)ng/mL。PTH與25(OH)D的濃度呈負(fù)相關(guān)，pearson相關(guān)系數(shù)為-0.212(P<0.01)。

3 討 論

人體獲得維生素D的途徑主要有兩種，即從食物中攝取以及由皮膚組織內(nèi)的7-脫氫膽固醇經(jīng)日光中波長為290～315 nm的紫外線照射后轉(zhuǎn)化生成，以后者為主[1]。來源于膳食或皮膚組織的維生素D不具有生物活性，必須經(jīng)過兩次連續(xù)的羥化過程才能被激活。從膳食或皮膚獲取的維生素D與血漿維生素D結(jié)合蛋白(vitamin D binding protein,DBP)結(jié)合后被轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟，在肝臟內(nèi)經(jīng)25羥化酶的作用首先轉(zhuǎn)化成25-羥基維生素D[25(OH)D]，隨后大部分25(OH)D進(jìn)入腎臟再經(jīng)1-羥化酶的催化生成具有生物活性的1,25二羥基維生素D[1,25(OH)2D]；1,25(OH)2D在DBP的載運(yùn)下，經(jīng)血液循環(huán)到達(dá)靶器官并與細(xì)胞中的VDR結(jié)合，從而發(fā)揮生物學(xué)功能，另有很少一部分儲(chǔ)存在脂肪組織中。血液中的1,25(OH)2D的半衰期為5～7 d，而25(OH)D的半衰期長達(dá)20～30 d，因此，將25(OH)D作為衡量體內(nèi)維生素D水平的主要指標(biāo)，同時(shí)它也是維生素D在血液循環(huán)中的主要存在形式[2]。

2002—2004年美國國家健康和營養(yǎng)調(diào)查委員會(huì)(NHANES )推薦將血清25(OH)D濃度<37.5 nmol(15 ng/mL)作為維生素D缺乏的標(biāo)準(zhǔn)[3]，指出當(dāng)血清25(OH)D濃度<15 ng/mL時(shí)，會(huì)誘發(fā)甲狀旁腺功能亢進(jìn)，PTH分泌增多，進(jìn)而引起骨質(zhì)密度及骨形態(tài)的變化并伴礦化障礙；補(bǔ)充維生素D使血清25(OH)D濃度> 20 ng/mL時(shí)，PTH水平恢復(fù)。洪維等[4]報(bào)告，血清25(OH)D濃度<20 ng/mL時(shí)，對(duì)骨轉(zhuǎn)換的影響不大；而當(dāng)血清25(OH)D濃度<10 ng/mL時(shí)，骨轉(zhuǎn)換尤其是骨形成指標(biāo)才發(fā)生變化。本研究中，以血清25(OH)D濃度為10～15 ng/mL的受試者最多(735/2315，31.75％)；當(dāng)血清25(OH)D濃度為(16.24±7.28)ng/mL時(shí)，PTH的濃度在正常范圍內(nèi)(10～65 pg/mL)。因此，我們認(rèn)為可以將16 ng/mL作為上海市徐匯區(qū)人群的正常維生素D濃度的參考值，但尚需對(duì)受試者的骨折發(fā)生率進(jìn)行3～5年的隨訪，以進(jìn)一步驗(yàn)證該推斷。

目前，通常將總25(OH)D濃度≥30 ng/mL、20～30 ng/mL、<20 ng/mL，分別作為維生素D充足、不足和缺乏的標(biāo)準(zhǔn)[5]。本研究顯示，2315例受試者的25(OH)D2平均濃度為(1.58±2.08)ng/mL，25(OH)D3為(14.23±7.47)ng/mL，總25(OH)D為(15.81±7.98)ng/mL。朱漢民等[6]的研究顯示，在2607例平均年齡為(60.4±20.9)歲的上海健康成人中，分別有31.24％和66.12％存在維生素D不足和缺乏。這些研究表明，上海地區(qū)人群維生素D水平普遍偏低，應(yīng)該引起足夠的重視。本研究還表明，90歲以上受試者的維生素D水平最低，其次為40歲以下者，而60～70歲受試者的維生素D水平最高。此外，本研究中25(OH)D3的濃度大于25(OH)D2，這是因?yàn)槿梭w中以25(OH)D3為主。

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[4]洪維,朱漢民,程群，等.血清維生素D水平與骨代謝狀態(tài)的相關(guān)性:附1389例觀察[J].中華骨質(zhì)疏松雜志,2011,4(4):224-231.

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[6]朱漢民，陳群，甘潔民，等.上海地區(qū)人群維生素D狀態(tài)研究[J].中國骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志,2010,3(3)：157-163.