顏廷俊

TECAN-BEPIII全自動(dòng)篩查儀器應(yīng)用于輸血檢驗(yàn)的價(jià)值分析

顏廷俊

目的 探討分析TECAN-BEPIII全自動(dòng)篩查儀器應(yīng)用于輸血檢驗(yàn)過程中最佳參數(shù)的選擇,提高TECAN-BEPIII全自動(dòng)篩查儀器在醫(yī)學(xué)實(shí)踐應(yīng)用中的特異性和靈敏度。方法 由TECAN全自動(dòng)加樣器完成樣品處理后,再由BEPⅢ按照標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)定程序進(jìn)行酶標(biāo)板孵育、洗板、加試劑以及判讀結(jié)果等實(shí)驗(yàn)步驟。結(jié)果 在抗-HIV檢測中,對于較粘稠的液體如阿克蘇抗-HIV的稀釋液,TECAN全自動(dòng)加樣器的吸液速度、拖尾氣隙、過量體積、附加體積需依次設(shè)定為：100、20、150、150 μl；對于ALT丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品,TECAN全自動(dòng)加樣器的吸液順序?yàn)棰倩|(zhì);②磷酸緩沖液；③丙酮酸。結(jié)論 在優(yōu)化機(jī)器參數(shù)的基礎(chǔ)上,TECAN-BEPⅢ全自動(dòng)篩查儀器能夠?qū)崿F(xiàn)包括血液ALT和抗-HIV等檢測項(xiàng)目的自動(dòng)化操作,不僅降低了本院工作人員的勞動(dòng)強(qiáng)度,而且對提高血站的整體檢驗(yàn)水平,保證輸血安全具有重要意義。

TECAN-BEPⅢ全自動(dòng)篩查儀器；ALT；抗-HIV；人工操作

輸血檢驗(yàn)在輸血過程中起著至關(guān)重要的作用。目前,本站院TECAN-BEPⅢ全自動(dòng)篩查儀器,以促進(jìn)輸血檢驗(yàn)過程由手工操作向自動(dòng)化操作的轉(zhuǎn)變。但新機(jī)器在使用前需要進(jìn)行校正和設(shè)置,山東省濟(jì)南市第三人民醫(yī)院工作人員經(jīng)過努力摸索出了在抗-HIV以及ALT檢測中,TECAN-BEPIII全自動(dòng)篩查儀器所應(yīng)選用的最佳工作模式及參數(shù),提高了檢測的準(zhǔn)確性?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 xx市無償獻(xiàn)血者捐獻(xiàn)的血液。

1.2 檢測試劑和儀器 試劑包括：抗-HIV試劑盒；ALT賴氏法試劑盒；檢測儀器包括：TECAN全自動(dòng)加樣器；BEPⅢ全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)等。

1.3 方法

1.3.1 抗-HIV免疫檢測 人工操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。而TECAN-BEPIII全自動(dòng)篩查儀器嚴(yán)格進(jìn)行微機(jī)編程,同樣基于試劑盒說明書進(jìn)行操作。由TECAN全自動(dòng)加樣器完成樣品處理后,再由BEPⅢ全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)按照標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)定程序來進(jìn)行標(biāo)板孵育、洗板、加試劑以及判讀結(jié)果等實(shí)驗(yàn)步驟。

1.3.2 ALT檢測實(shí)驗(yàn)方法 本院在ALT檢測中使用96孔平板,這樣能夠保證基質(zhì)和血清在微孔中進(jìn)行充分反應(yīng),提高試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。步驟為：①TECAN全自動(dòng)儀器進(jìn)行加樣；②在BEPⅢ全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)上完成標(biāo)板孵育、加試劑和判讀結(jié)果等試驗(yàn)步驟。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)結(jié)果均使用SPSS18.0軟件來進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。

2 結(jié)果

2.1 TECAN全自動(dòng)加樣器進(jìn)行較粘稠液體加樣時(shí)的參數(shù)選擇 本試驗(yàn)過程中所使用的荷蘭阿克蘇抗-HIV的稀釋液較國內(nèi)廠家的同種稀釋液產(chǎn)品較粘稠,為此本院工作人員利用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法對常規(guī)的液體模式進(jìn)行了改進(jìn),從而選擇出了新的分配液體模式。經(jīng)驗(yàn)證,新的液體模式能夠很好的解決較粘稠液體在抗-HIV檢測過程中所導(dǎo)致的問題。

表1 TECAN加阿克蘇抗-HIV稀釋液的液體參數(shù)新舊模式對比

2.2 TECAN全自動(dòng)加樣器對丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行加樣的順序確定 TECAN全自動(dòng)加樣器使用單針對丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行加樣時(shí),最佳吸樣順序?yàn)棰倩|(zhì)；②磷酸緩沖液；③丙酮酸。

3 討論

在用TECAN全自動(dòng)加樣器對ALT丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行加樣時(shí),需要進(jìn)行單針分3次吸液 。在本站的試驗(yàn)過程中,本院工作人員發(fā)現(xiàn),利用TECAN全自動(dòng)加樣器進(jìn)行加樣時(shí),應(yīng)先吸基質(zhì)。因?yàn)榉峙湟后w之后,基質(zhì)的量較大,針管內(nèi)即使有微量的基質(zhì)殘留,對試驗(yàn)結(jié)果的影響也不是很大。除此以外,基質(zhì)對丙酮酸具有沖洗的作用,這樣能夠在最大程度上降低丙酮酸殘留的可能性。

在利用TECAN-BEPIII全自動(dòng)篩查儀器進(jìn)行抗-HIV檢測過程中,作者發(fā)現(xiàn)TECAN全自動(dòng)加樣器使用常規(guī)的液體分配模式對較粘稠液體如阿克蘇抗-HIV稀釋液進(jìn)行處理時(shí),很容易出現(xiàn)2個(gè)問題。第一：加樣針在操作過程中漏液,這樣就會(huì)導(dǎo)致個(gè)別孔出現(xiàn)假陽性的結(jié)果,影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確度；第二：加樣針最后分配出來的液體稀釋液體積較低且含有超量的泡沫,進(jìn)而導(dǎo)致該排出現(xiàn)均為陽性的結(jié)果［1］。經(jīng)過對各項(xiàng)液體參數(shù)的優(yōu)化之后,經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證,以上兩個(gè)問題都得到較好解決。其原因在于：TECAN自動(dòng)加樣器的針頭和導(dǎo)管通過系統(tǒng)氣隙將離子交換水和加樣試劑隔開,系統(tǒng)氣隙過大會(huì)導(dǎo)致粘稠液體下滴,同時(shí)也更易產(chǎn)生泡沫；系統(tǒng)氣隙過小則起不到隔離離子交換水和加樣試劑的作用［2］。因此,選擇合適的系統(tǒng)氣隙至關(guān)重要。在本試驗(yàn)中,系統(tǒng)氣隙由20 μl優(yōu)化為10 μl,取得較為良好的檢測效果。

綜上所述結(jié)合本院試驗(yàn)結(jié)果,作者認(rèn)為：TECAN-BEPIII全自動(dòng)篩查儀器對于保證輸血安全具有重要意義,值得進(jìn)一步推廣應(yīng)用。

［1］ 王珺,邢培清,方建華,等.STAR-FAME全自動(dòng)血液篩查儀器在檢驗(yàn)中的應(yīng)用研究.河南醫(yī)學(xué)研究,2010,19(01):12-18.

［2］ 周國平,周喆,向東,等.全自動(dòng)血型分析儀應(yīng)用于獻(xiàn)血者血型篩查.中國輸血雜志,2011,24(05):395-398.

250101 山東省濟(jì)南市第三人民醫(yī)院輸血科