彭麗英+彭攸靈+楊先國(guó)

[摘要] 目的 建立夏桑菊顆粒中主要成分迷迭香酸的含量測(cè)定方法。 方法 采用高效液相色譜法對(duì)迷迭香酸進(jìn)行含量測(cè)定，色譜柱：Agilent Eclipse XDB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流速：0.8 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)329 nm，柱溫27℃，進(jìn)樣體積10 μl，流動(dòng)相為甲醇-0.5%乙酸水系統(tǒng)梯度洗脫。 結(jié)果 含量測(cè)定中迷迭香酸進(jìn)樣在0.22～8.80 μg范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均回收率和RSD均符合要求。 結(jié)論 所建立方法操作簡(jiǎn)單、專屬性和重現(xiàn)性良好，可作為該制劑的質(zhì)量控制方法之一。

[關(guān)鍵詞] 夏桑菊顆粒；迷迭香酸；高效液相色譜法

[中圖分類號(hào)] R927.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2014）07（b）-0008-03

夏桑菊顆粒是由夏枯草、桑葉、野菊花3味藥材組成，具有清熱解毒、清肝明目之功效，臨床常用于風(fēng)熱感冒、目赤頭痛、高血藥等癥，并可作為清涼飲料使用，商品規(guī)格20袋/包，10g/袋。夏桑菊顆粒收載于原衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)（部頒標(biāo)準(zhǔn)）第15冊(cè)，缺乏含量測(cè)定項(xiàng)[1]。夏桑菊顆粒的君藥是夏枯草，2010年版《中國(guó)藥典》修訂了夏枯草的含量測(cè)定項(xiàng)，其含量測(cè)定指標(biāo)修訂為迷迭香酸[2]。迷迭香酸具有抗菌[3-5]、抗病毒[4]、抗氧化[6-7]、抗血栓[4，8]、保肝護(hù)肝[9]、抗炎活性[4，10-11]和免疫抑制活性[4]等作用。因此，本研究采用HPLC方法對(duì)夏桑菊顆粒中主要活性成分迷迭香酸的進(jìn)行含量測(cè)定研究，為提高夏桑菊顆粒的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

BPZ11D型電子分析天平（Sartorius公司）；KQ-100B型超聲波清洗器（昆山超聲儀器有限公司）；Waters 2695-2996高效液相色譜系統(tǒng)，Empower工作站，含自動(dòng)進(jìn)樣器、四元梯度泵（美國(guó)，Waters公司）。

1.2 溶劑與試藥

甲醇（色譜純，TEDIA公司），水為哇哈哈純凈水；乙酸（分析純，北京化工廠）。對(duì)照品迷迭香酸[12-13]（外標(biāo)一點(diǎn)法測(cè)定純度>98%）和樣品夏桑菊顆粒及陰性制劑顆粒[14]，由湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院林麗美教授贈(zèng)送，具體樣品見含量測(cè)定項(xiàng)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

選擇Agilent Eclipse XDB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）為色譜柱；檢測(cè)波長(zhǎng)：329 nm；流速：0.8 ml/min；樣品室溫度：20℃；柱溫：27℃；進(jìn)樣體積：10 μl；流動(dòng)相：甲醇（A）-0.5%乙酸水（B）梯度洗脫，0→60 min，30%A→40%。按照上述色譜條件，迷迭香酸分離很好，無干擾，得色譜圖1。

2.2 供試品溶液制備

稱取夏桑菊顆粒、缺夏枯草的陰性制劑顆粒樣品約5 g，精密稱定，加甲醇10 ml，稱重，超聲（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，取出，靜置放涼，甲醇補(bǔ)重，0.22 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液進(jìn)行HPLC分析。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密稱取對(duì)照品迷迭香酸適量，用甲醇溶解，定容得濃度為0.22 μg/μl的對(duì)照品溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶液1、2、3、5、10、15、20、25、30、40 μl進(jìn)樣分析，記錄色譜條件下測(cè)得的峰面積。以峰面積作為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)樣量（μg）作為橫坐標(biāo)（X），得回歸方程：Y=4 541 216X-411 008（r=0.9999）；線性范圍：0.22～8.80 μg。

2.4 精密度試驗(yàn)

取夏桑菊顆粒同一供試品（批號(hào)：FA10176），按照“2.2”項(xiàng)制備供試品溶液，分別精密吸取溶液10 μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，按上述色譜條件測(cè)得迷迭香酸峰面積，其RSD=0.58%。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取夏桑菊顆粒同一供試品（批號(hào)：FA10176），按照“2.2”項(xiàng)制備供試品溶液，精密吸取溶液10 μl，分別在2、4、6、8、10、12、24 h進(jìn)樣，按上述色譜條件測(cè)定迷迭香酸的峰面積，其RSD=0.58%。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

取夏桑菊顆粒同一供試品（批號(hào)：FA10176）6份，精密稱定，按照“2.2”項(xiàng)下制備供試品溶液，精密吸取每份溶液10 μl，按上述色譜條件測(cè)得迷迭香酸峰面積，其RSD=0.60%。

2.7 加樣回收率試驗(yàn)

取同一批已知準(zhǔn)確含量的夏桑菊顆粒樣品（批號(hào)：FA10176）約2.5 g，精密稱定，分別精密加入一定量的對(duì)照品迷迭香酸溶液，按“2.2”項(xiàng)制成加樣的供試品溶液，按上述色譜條件測(cè)定迷迭香酸總量，計(jì)算加樣回收率（表1）。

2.8 含量測(cè)定

按上述色譜條件，將不同廠家的樣品進(jìn)行平行處理和進(jìn)樣分析，每個(gè)樣品稱2份，每份樣品平行進(jìn)兩針，測(cè)定迷迭香酸峰面積，計(jì)算夏桑菊顆粒中迷迭香酸的含量，得出平均值（表2）。

3 討論

采用HPLC方法，建立夏桑菊顆粒中主要活性成分迷迭香酸的含量測(cè)定方法，該方法樣品處理簡(jiǎn)單、容易、可控，所建立的色譜條件相對(duì)簡(jiǎn)單，單一梯度洗脫，適宜于大量夏桑菊顆粒樣本中迷迭香酸的含量測(cè)定，具有很好的實(shí)用性。含量測(cè)定結(jié)果表明，夏桑菊顆粒樣品中迷迭香酸的含量差別很大（0.20～7.04 mg），說明現(xiàn)在市面上流通的夏桑菊顆粒中質(zhì)量參差不齊，建議夏桑菊顆粒增加含量測(cè)定項(xiàng)以進(jìn)一步保證質(zhì)量。

[參考文獻(xiàn)]

[1] WS3-B-3019-98.中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)——中藥成方制劑（15冊(cè)）[S].

[2] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：263.

[3] 孫峋，汪靖超，李洪濤，等.迷迭香酸的抗菌機(jī)理研究[J].青島大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2005，18（4）：41-45.

[4] 吳建章，郁建平，趙東亮.迷迭香酸的研究進(jìn)展[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2005，17（3）：383-388.

[5] 郭道森，杜桂彩，李麗，等.迷迭香酸對(duì)幾種植物病原真菌的抗菌活性[J].微生物學(xué)通報(bào)，2004，31（4）：71-76.

[6] 呂曉玲，姚慧.迷迭香酸對(duì)豬油的抗氧化效果[J].中國(guó)油脂，2010，（9）：33-35.

[7] 丁巍，黃松明，張愛華，等.迷迭香酸對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻小鼠腎臟的抗氧化保護(hù)作用[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2009，29（3）：350-355.

[8] 鄒正午，徐理納.迷迭香酸抗血栓和抗血小板聚集作用[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，1993，28（4）：241-245.

[9] 王虹，劉紅梅，王磊.迷迭香酸對(duì)四氯化碳致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用[J].中成藥，2009，31（3）：354-358.

[10] 李麗，梁緒國(guó)，田京偉，等.迷迭香酸抗炎作用研究[J].中藥藥理與臨床，2008，24（4）：21-22.

[11] 呂曉玲，馬立強(qiáng)，孫明潔，等.迷迭香酸對(duì)小鼠炎癥介質(zhì)的影響[J].天津科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，25（2）：5-8.

[12] 林麗美，許招懂，閆積彪，等.夏枯草中活性成分迷迭香酸的提取分離、結(jié)構(gòu)鑒定與富集[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2009，15（8）：35-38.

[13] 林麗美，許招懂，姚江雄，等.夏枯草中異迷迭香酸苷和迷迭香酸的含量測(cè)定[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2012，47（15）：1204-1207.

[14] 林麗美，許招懂，姚江雄，等.夏桑菊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中成藥，2012，34（8）：1500-1505.

（收稿日期：2014-04-13 本文編輯：林利利）

[摘要] 目的 建立夏桑菊顆粒中主要成分迷迭香酸的含量測(cè)定方法。 方法 采用高效液相色譜法對(duì)迷迭香酸進(jìn)行含量測(cè)定，色譜柱：Agilent Eclipse XDB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流速：0.8 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)329 nm，柱溫27℃，進(jìn)樣體積10 μl，流動(dòng)相為甲醇-0.5%乙酸水系統(tǒng)梯度洗脫。 結(jié)果 含量測(cè)定中迷迭香酸進(jìn)樣在0.22～8.80 μg范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均回收率和RSD均符合要求。 結(jié)論 所建立方法操作簡(jiǎn)單、專屬性和重現(xiàn)性良好，可作為該制劑的質(zhì)量控制方法之一。

[關(guān)鍵詞] 夏桑菊顆粒；迷迭香酸；高效液相色譜法

[中圖分類號(hào)] R927.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2014）07（b）-0008-03

夏桑菊顆粒是由夏枯草、桑葉、野菊花3味藥材組成，具有清熱解毒、清肝明目之功效，臨床常用于風(fēng)熱感冒、目赤頭痛、高血藥等癥，并可作為清涼飲料使用，商品規(guī)格20袋/包，10g/袋。夏桑菊顆粒收載于原衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)（部頒標(biāo)準(zhǔn)）第15冊(cè)，缺乏含量測(cè)定項(xiàng)[1]。夏桑菊顆粒的君藥是夏枯草，2010年版《中國(guó)藥典》修訂了夏枯草的含量測(cè)定項(xiàng)，其含量測(cè)定指標(biāo)修訂為迷迭香酸[2]。迷迭香酸具有抗菌[3-5]、抗病毒[4]、抗氧化[6-7]、抗血栓[4，8]、保肝護(hù)肝[9]、抗炎活性[4，10-11]和免疫抑制活性[4]等作用。因此，本研究采用HPLC方法對(duì)夏桑菊顆粒中主要活性成分迷迭香酸的進(jìn)行含量測(cè)定研究，為提高夏桑菊顆粒的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

BPZ11D型電子分析天平（Sartorius公司）；KQ-100B型超聲波清洗器（昆山超聲儀器有限公司）；Waters 2695-2996高效液相色譜系統(tǒng)，Empower工作站，含自動(dòng)進(jìn)樣器、四元梯度泵（美國(guó)，Waters公司）。

1.2 溶劑與試藥

甲醇（色譜純，TEDIA公司），水為哇哈哈純凈水；乙酸（分析純，北京化工廠）。對(duì)照品迷迭香酸[12-13]（外標(biāo)一點(diǎn)法測(cè)定純度>98%）和樣品夏桑菊顆粒及陰性制劑顆粒[14]，由湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院林麗美教授贈(zèng)送，具體樣品見含量測(cè)定項(xiàng)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

選擇Agilent Eclipse XDB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）為色譜柱；檢測(cè)波長(zhǎng)：329 nm；流速：0.8 ml/min；樣品室溫度：20℃；柱溫：27℃；進(jìn)樣體積：10 μl；流動(dòng)相：甲醇（A）-0.5%乙酸水（B）梯度洗脫，0→60 min，30%A→40%。按照上述色譜條件，迷迭香酸分離很好，無干擾，得色譜圖1。

2.2 供試品溶液制備

稱取夏桑菊顆粒、缺夏枯草的陰性制劑顆粒樣品約5 g，精密稱定，加甲醇10 ml，稱重，超聲（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，取出，靜置放涼，甲醇補(bǔ)重，0.22 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液進(jìn)行HPLC分析。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密稱取對(duì)照品迷迭香酸適量，用甲醇溶解，定容得濃度為0.22 μg/μl的對(duì)照品溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶液1、2、3、5、10、15、20、25、30、40 μl進(jìn)樣分析，記錄色譜條件下測(cè)得的峰面積。以峰面積作為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)樣量（μg）作為橫坐標(biāo)（X），得回歸方程：Y=4 541 216X-411 008（r=0.9999）；線性范圍：0.22～8.80 μg。

2.4 精密度試驗(yàn)

取夏桑菊顆粒同一供試品（批號(hào)：FA10176），按照“2.2”項(xiàng)制備供試品溶液，分別精密吸取溶液10 μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，按上述色譜條件測(cè)得迷迭香酸峰面積，其RSD=0.58%。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取夏桑菊顆粒同一供試品（批號(hào)：FA10176），按照“2.2”項(xiàng)制備供試品溶液，精密吸取溶液10 μl，分別在2、4、6、8、10、12、24 h進(jìn)樣，按上述色譜條件測(cè)定迷迭香酸的峰面積，其RSD=0.58%。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

取夏桑菊顆粒同一供試品（批號(hào)：FA10176）6份，精密稱定，按照“2.2”項(xiàng)下制備供試品溶液，精密吸取每份溶液10 μl，按上述色譜條件測(cè)得迷迭香酸峰面積，其RSD=0.60%。

2.7 加樣回收率試驗(yàn)

取同一批已知準(zhǔn)確含量的夏桑菊顆粒樣品（批號(hào)：FA10176）約2.5 g，精密稱定，分別精密加入一定量的對(duì)照品迷迭香酸溶液，按“2.2”項(xiàng)制成加樣的供試品溶液，按上述色譜條件測(cè)定迷迭香酸總量，計(jì)算加樣回收率（表1）。

2.8 含量測(cè)定

按上述色譜條件，將不同廠家的樣品進(jìn)行平行處理和進(jìn)樣分析，每個(gè)樣品稱2份，每份樣品平行進(jìn)兩針，測(cè)定迷迭香酸峰面積，計(jì)算夏桑菊顆粒中迷迭香酸的含量，得出平均值（表2）。

3 討論

采用HPLC方法，建立夏桑菊顆粒中主要活性成分迷迭香酸的含量測(cè)定方法，該方法樣品處理簡(jiǎn)單、容易、可控，所建立的色譜條件相對(duì)簡(jiǎn)單，單一梯度洗脫，適宜于大量夏桑菊顆粒樣本中迷迭香酸的含量測(cè)定，具有很好的實(shí)用性。含量測(cè)定結(jié)果表明，夏桑菊顆粒樣品中迷迭香酸的含量差別很大（0.20～7.04 mg），說明現(xiàn)在市面上流通的夏桑菊顆粒中質(zhì)量參差不齊，建議夏桑菊顆粒增加含量測(cè)定項(xiàng)以進(jìn)一步保證質(zhì)量。

[參考文獻(xiàn)]

[1] WS3-B-3019-98.中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)——中藥成方制劑（15冊(cè)）[S].

[2] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：263.

[3] 孫峋，汪靖超，李洪濤，等.迷迭香酸的抗菌機(jī)理研究[J].青島大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2005，18（4）：41-45.

[4] 吳建章，郁建平，趙東亮.迷迭香酸的研究進(jìn)展[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2005，17（3）：383-388.

[5] 郭道森，杜桂彩，李麗，等.迷迭香酸對(duì)幾種植物病原真菌的抗菌活性[J].微生物學(xué)通報(bào)，2004，31（4）：71-76.

[6] 呂曉玲，姚慧.迷迭香酸對(duì)豬油的抗氧化效果[J].中國(guó)油脂，2010，（9）：33-35.

[7] 丁巍，黃松明，張愛華，等.迷迭香酸對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻小鼠腎臟的抗氧化保護(hù)作用[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2009，29（3）：350-355.

[8] 鄒正午，徐理納.迷迭香酸抗血栓和抗血小板聚集作用[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，1993，28（4）：241-245.

[9] 王虹，劉紅梅，王磊.迷迭香酸對(duì)四氯化碳致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用[J].中成藥，2009，31（3）：354-358.

[10] 李麗，梁緒國(guó)，田京偉，等.迷迭香酸抗炎作用研究[J].中藥藥理與臨床，2008，24（4）：21-22.

[11] 呂曉玲，馬立強(qiáng)，孫明潔，等.迷迭香酸對(duì)小鼠炎癥介質(zhì)的影響[J].天津科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，25（2）：5-8.

[12] 林麗美，許招懂，閆積彪，等.夏枯草中活性成分迷迭香酸的提取分離、結(jié)構(gòu)鑒定與富集[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2009，15（8）：35-38.

[13] 林麗美，許招懂，姚江雄，等.夏枯草中異迷迭香酸苷和迷迭香酸的含量測(cè)定[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2012，47（15）：1204-1207.

[14] 林麗美，許招懂，姚江雄，等.夏桑菊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中成藥，2012，34（8）：1500-1505.

（收稿日期：2014-04-13 本文編輯：林利利）

[摘要] 目的 建立夏桑菊顆粒中主要成分迷迭香酸的含量測(cè)定方法。 方法 采用高效液相色譜法對(duì)迷迭香酸進(jìn)行含量測(cè)定，色譜柱：Agilent Eclipse XDB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流速：0.8 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)329 nm，柱溫27℃，進(jìn)樣體積10 μl，流動(dòng)相為甲醇-0.5%乙酸水系統(tǒng)梯度洗脫。 結(jié)果 含量測(cè)定中迷迭香酸進(jìn)樣在0.22～8.80 μg范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好（r=0.9999），平均回收率和RSD均符合要求。 結(jié)論 所建立方法操作簡(jiǎn)單、專屬性和重現(xiàn)性良好，可作為該制劑的質(zhì)量控制方法之一。

[關(guān)鍵詞] 夏桑菊顆粒；迷迭香酸；高效液相色譜法

[中圖分類號(hào)] R927.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2014）07（b）-0008-03

夏桑菊顆粒是由夏枯草、桑葉、野菊花3味藥材組成，具有清熱解毒、清肝明目之功效，臨床常用于風(fēng)熱感冒、目赤頭痛、高血藥等癥，并可作為清涼飲料使用，商品規(guī)格20袋/包，10g/袋。夏桑菊顆粒收載于原衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)（部頒標(biāo)準(zhǔn)）第15冊(cè)，缺乏含量測(cè)定項(xiàng)[1]。夏桑菊顆粒的君藥是夏枯草，2010年版《中國(guó)藥典》修訂了夏枯草的含量測(cè)定項(xiàng)，其含量測(cè)定指標(biāo)修訂為迷迭香酸[2]。迷迭香酸具有抗菌[3-5]、抗病毒[4]、抗氧化[6-7]、抗血栓[4，8]、保肝護(hù)肝[9]、抗炎活性[4，10-11]和免疫抑制活性[4]等作用。因此，本研究采用HPLC方法對(duì)夏桑菊顆粒中主要活性成分迷迭香酸的進(jìn)行含量測(cè)定研究，為提高夏桑菊顆粒的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

BPZ11D型電子分析天平（Sartorius公司）；KQ-100B型超聲波清洗器（昆山超聲儀器有限公司）；Waters 2695-2996高效液相色譜系統(tǒng)，Empower工作站，含自動(dòng)進(jìn)樣器、四元梯度泵（美國(guó)，Waters公司）。

1.2 溶劑與試藥

甲醇（色譜純，TEDIA公司），水為哇哈哈純凈水；乙酸（分析純，北京化工廠）。對(duì)照品迷迭香酸[12-13]（外標(biāo)一點(diǎn)法測(cè)定純度>98%）和樣品夏桑菊顆粒及陰性制劑顆粒[14]，由湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院林麗美教授贈(zèng)送，具體樣品見含量測(cè)定項(xiàng)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

選擇Agilent Eclipse XDB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）為色譜柱；檢測(cè)波長(zhǎng)：329 nm；流速：0.8 ml/min；樣品室溫度：20℃；柱溫：27℃；進(jìn)樣體積：10 μl；流動(dòng)相：甲醇（A）-0.5%乙酸水（B）梯度洗脫，0→60 min，30%A→40%。按照上述色譜條件，迷迭香酸分離很好，無干擾，得色譜圖1。

2.2 供試品溶液制備

稱取夏桑菊顆粒、缺夏枯草的陰性制劑顆粒樣品約5 g，精密稱定，加甲醇10 ml，稱重，超聲（功率250 W，頻率40 kHz）30 min，取出，靜置放涼，甲醇補(bǔ)重，0.22 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液進(jìn)行HPLC分析。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密稱取對(duì)照品迷迭香酸適量，用甲醇溶解，定容得濃度為0.22 μg/μl的對(duì)照品溶液。分別精密吸取對(duì)照品溶液1、2、3、5、10、15、20、25、30、40 μl進(jìn)樣分析，記錄色譜條件下測(cè)得的峰面積。以峰面積作為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)樣量（μg）作為橫坐標(biāo)（X），得回歸方程：Y=4 541 216X-411 008（r=0.9999）；線性范圍：0.22～8.80 μg。

2.4 精密度試驗(yàn)

取夏桑菊顆粒同一供試品（批號(hào)：FA10176），按照“2.2”項(xiàng)制備供試品溶液，分別精密吸取溶液10 μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，按上述色譜條件測(cè)得迷迭香酸峰面積，其RSD=0.58%。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取夏桑菊顆粒同一供試品（批號(hào)：FA10176），按照“2.2”項(xiàng)制備供試品溶液，精密吸取溶液10 μl，分別在2、4、6、8、10、12、24 h進(jìn)樣，按上述色譜條件測(cè)定迷迭香酸的峰面積，其RSD=0.58%。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

取夏桑菊顆粒同一供試品（批號(hào)：FA10176）6份，精密稱定，按照“2.2”項(xiàng)下制備供試品溶液，精密吸取每份溶液10 μl，按上述色譜條件測(cè)得迷迭香酸峰面積，其RSD=0.60%。

2.7 加樣回收率試驗(yàn)

取同一批已知準(zhǔn)確含量的夏桑菊顆粒樣品（批號(hào)：FA10176）約2.5 g，精密稱定，分別精密加入一定量的對(duì)照品迷迭香酸溶液，按“2.2”項(xiàng)制成加樣的供試品溶液，按上述色譜條件測(cè)定迷迭香酸總量，計(jì)算加樣回收率（表1）。

2.8 含量測(cè)定

按上述色譜條件，將不同廠家的樣品進(jìn)行平行處理和進(jìn)樣分析，每個(gè)樣品稱2份，每份樣品平行進(jìn)兩針，測(cè)定迷迭香酸峰面積，計(jì)算夏桑菊顆粒中迷迭香酸的含量，得出平均值（表2）。

3 討論

采用HPLC方法，建立夏桑菊顆粒中主要活性成分迷迭香酸的含量測(cè)定方法，該方法樣品處理簡(jiǎn)單、容易、可控，所建立的色譜條件相對(duì)簡(jiǎn)單，單一梯度洗脫，適宜于大量夏桑菊顆粒樣本中迷迭香酸的含量測(cè)定，具有很好的實(shí)用性。含量測(cè)定結(jié)果表明，夏桑菊顆粒樣品中迷迭香酸的含量差別很大（0.20～7.04 mg），說明現(xiàn)在市面上流通的夏桑菊顆粒中質(zhì)量參差不齊，建議夏桑菊顆粒增加含量測(cè)定項(xiàng)以進(jìn)一步保證質(zhì)量。

[參考文獻(xiàn)]

[1] WS3-B-3019-98.中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)——中藥成方制劑（15冊(cè)）[S].

[2] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：263.

[3] 孫峋，汪靖超，李洪濤，等.迷迭香酸的抗菌機(jī)理研究[J].青島大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2005，18（4）：41-45.

[4] 吳建章，郁建平，趙東亮.迷迭香酸的研究進(jìn)展[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2005，17（3）：383-388.

[5] 郭道森，杜桂彩，李麗，等.迷迭香酸對(duì)幾種植物病原真菌的抗菌活性[J].微生物學(xué)通報(bào)，2004，31（4）：71-76.

[6] 呂曉玲，姚慧.迷迭香酸對(duì)豬油的抗氧化效果[J].中國(guó)油脂，2010，（9）：33-35.

[7] 丁巍，黃松明，張愛華，等.迷迭香酸對(duì)單側(cè)輸尿管梗阻小鼠腎臟的抗氧化保護(hù)作用[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2009，29（3）：350-355.

[8] 鄒正午，徐理納.迷迭香酸抗血栓和抗血小板聚集作用[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，1993，28（4）：241-245.

[9] 王虹，劉紅梅，王磊.迷迭香酸對(duì)四氯化碳致小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用[J].中成藥，2009，31（3）：354-358.

[10] 李麗，梁緒國(guó)，田京偉，等.迷迭香酸抗炎作用研究[J].中藥藥理與臨床，2008，24（4）：21-22.

[11] 呂曉玲，馬立強(qiáng)，孫明潔，等.迷迭香酸對(duì)小鼠炎癥介質(zhì)的影響[J].天津科技大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，25（2）：5-8.

[12] 林麗美，許招懂，閆積彪，等.夏枯草中活性成分迷迭香酸的提取分離、結(jié)構(gòu)鑒定與富集[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2009，15（8）：35-38.

[13] 林麗美，許招懂，姚江雄，等.夏枯草中異迷迭香酸苷和迷迭香酸的含量測(cè)定[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2012，47（15）：1204-1207.

[14] 林麗美，許招懂，姚江雄，等.夏桑菊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中成藥，2012，34（8）：1500-1505.

（收稿日期：2014-04-13 本文編輯：林利利）