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        新生兒缺氧缺血性腦病食欲素、神經(jīng)激肽A和神經(jīng)元特異性烯醇化酶檢測(cè)的臨床意義

        2014-08-28 08:24:07張楠李清華李文輝張中馥
        河北醫(yī)藥 2014年7期
        關(guān)鍵詞:化酶烯醇食欲

        張楠 李清華 李文輝 張中馥

        ·論著·

        新生兒缺氧缺血性腦病食欲素、神經(jīng)激肽A和神經(jīng)元特異性烯醇化酶檢測(cè)的臨床意義

        張楠 李清華 李文輝 張中馥

        目的探討新生兒缺氧缺血性腦病食欲素、神經(jīng)激肽A和神經(jīng)元特異性烯醇化酶檢測(cè)的臨床意義。方法新生兒缺氧缺血性腦病患者63例,根據(jù)《新生兒HIE診斷依據(jù)和臨床分度》分為輕度(n=29)、中度(n=18)、重度組(n=16),取同期健康新生兒20例作為對(duì)照組。檢測(cè)4組食欲素、神經(jīng)激肽A和神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平。結(jié)果新生兒缺氧缺血性腦病組食欲素、神經(jīng)激肽A、神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。輕度組食欲素、神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),中、重度組食欲素、神經(jīng)激肽A、神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平與對(duì)照組、輕度組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。重度組食欲素、神經(jīng)激肽A、神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平與中度組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論新生兒缺氧缺血性腦病患兒檢測(cè)食欲素、神經(jīng)激肽A和神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平對(duì)預(yù)測(cè)病情及判斷治療效果有重要意義。

        缺氧缺血性腦病;神經(jīng)激肽A;食欲素

        新生兒缺氧缺血性腦病是指新生兒因圍產(chǎn)期窒息產(chǎn)生的患兒腦的缺氧缺血性損害,可導(dǎo)致新生兒腦損傷,如癲癇、腦癱等神經(jīng)功能損傷,且病情進(jìn)展迅速,致殘率和病死率高、嚴(yán)重影響患兒的生活質(zhì)量,并對(duì)家庭造成嚴(yán)重的影響。其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,因此選取恰當(dāng)?shù)呐R床檢測(cè)指標(biāo),對(duì)預(yù)測(cè)病情及判斷治療效果有重要意義[1-3]。食欲素由下丘腦的側(cè)部及后部分泌,可以影響食欲、睡眠并對(duì)覺(jué)醒狀態(tài)的大腦和相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)有重要作用。神經(jīng)激肽A是速激肽族神經(jīng)肽的一種,其具有調(diào)節(jié)體內(nèi)多種生理功能如痛覺(jué)、睡眠及神經(jīng)系統(tǒng)本身的分化和發(fā)育。神經(jīng)元特異性烯醇化酶具有高度的組織特異性,可以反映灰質(zhì)變化。本研究選取我院新生兒缺氧缺血性腦病新生兒,對(duì)其食欲素、神經(jīng)激肽A和神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平進(jìn)行研究,探討其在新生兒缺氧缺血性腦病中的研究?jī)r(jià)值。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選取我院2012年5月至2013年6月收治的新生兒缺氧缺血性腦病患者63例作為研究對(duì)象,患兒均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)會(huì)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)[4],其中男32例,女31例;胎齡37~42周,平均胎齡(38.5±1.3)周;出生體重2 500~4 220 g,平均出生體重(3 230±520)g;順產(chǎn)42例,剖宮產(chǎn)21例。根據(jù)《新生兒HIE診斷依據(jù)和臨床分度》[4]分為輕度(n=29)、中度(n=18)、重度組(n=16)。輕度組中男15例,女14例;胎齡38~41周,平均胎齡(38.4±1.2)周;出生體重2 500~4 200 g,平均出生體重(3 250±500)g;順產(chǎn)20例,剖宮產(chǎn)9例。中度組中,男9例,女9例;胎齡37~42周,平均胎齡(39.5±2.3)周;出生體重2 600~4 000 g,平均出生體重(3 330±515)g;順產(chǎn)12例,剖宮產(chǎn)6例。重度組中,男8例,女8例;胎齡37~41周,平均胎齡(38.7±1.6)周;出生體重2 700~4 350 g,平均出生體重(3 340±550)g;順產(chǎn)10例,剖宮產(chǎn)6例。選取同期我院健康新生兒20例作為對(duì)照組,其中男12例,女8例;胎齡39~42周,平均胎齡(39.1±2.2)周;出生體重2 700~4 200 g,平均出生體重(3 400±500)g;順產(chǎn)14例,剖宮產(chǎn)6例。4組受檢新生兒性別比、胎齡、平均出生體重、順產(chǎn)剖宮產(chǎn)比間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05)。

        1.2 入選與排除標(biāo)準(zhǔn)

        1.2.1 入選標(biāo)準(zhǔn):①有明確導(dǎo)致胎兒宮內(nèi)窘迫的異常產(chǎn)科病史,有嚴(yán)重胎兒宮內(nèi)窘迫表現(xiàn),或在分娩過(guò)程中有明顯窒息史;②出生時(shí)有重度窒息,Apagar評(píng)分1 min≤3分,延續(xù)至5 min時(shí)仍≤5分,和/或出生時(shí)臍動(dòng)脈血?dú)鈖H≤7.0;③出生后不久有神經(jīng)系統(tǒng)癥狀,持續(xù)24 h以上;

        1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn):排除感染、電解質(zhì)紊亂、先天畸形、產(chǎn)傷、先天性心肺疾患等。

        1.3 檢測(cè)方法 抽取新生兒出生后24、72 h股靜脈血2 ml/管,共3管。

        1.3.1 食欲素:選取德國(guó)ELISA Kit for Orexin試劑盒,由上海欣裕生物科技有限公司提供。室溫血液自然凝固10~20 min,離心20 min左右,3 000 r/min。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。采用酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法測(cè)定,嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作,30 min內(nèi)在波長(zhǎng)450 nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔讀數(shù),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取相應(yīng)的含量值。

        1.3.2 神經(jīng)激肽A:人神經(jīng)激肽 A(NKA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒由武漢伊艾博科技有限公司提供,標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置 2 h后于1 000 g/min,離心 20 min,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。先用PBS洗滌,去除多余血液,勻漿化后放在20 mlPBS中于-20℃放置過(guò)夜,第2天,經(jīng)過(guò)2次反復(fù)凍融破膜,將勻漿物5 000 g/min,離心 5 min,取上清即可檢測(cè)。檢測(cè)嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作,30 min內(nèi)在波長(zhǎng)450 nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔讀數(shù),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取相應(yīng)的含量值。。

        1.3.3 神經(jīng)元特異性烯醇化酶:人神經(jīng)特異性烯醇化酶酶聯(lián)免疫分析試劑盒由廈門慧嘉生物科技有限公司提供。血液處理方法同食欲素。測(cè)嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作,30 min內(nèi)在波長(zhǎng)450 nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔讀數(shù),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取相應(yīng)的含量值。

        2 結(jié)果

        新生兒缺氧缺血性腦病組食欲素、神經(jīng)激肽A、神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。輕度組食欲素、神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),中、重度組食欲素、神經(jīng)激肽A、神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平與對(duì)照組、輕度組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。重度組食欲素、神經(jīng)激肽A、神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平與中度組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

        表1 4組食欲素、神經(jīng)激肽A和神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平比較

        表1 4組食欲素、神經(jīng)激肽A和神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平比較

        組別食欲素(ng/L)神經(jīng)激肽A(ng/ml)神經(jīng)元特異性烯醇化酶(μg/L)對(duì)照組(n=20)4.3±1.04.9±0.913.4±3.3新生兒缺氧缺血性 腦病組(n=63)7.2±1.6*2.2±0.4*52.3±4.1*輕度組(n=29)5.7±1.3*4.1±0.631.1±3.1*中度組(n=18)6.9±1.4*#1.8±0.5*#48.2±2.7*#重度組(n=16)9.6±1.7*#△0.7±0.3*#△62.0±5.9*#△

        注:與對(duì)照組比較,*P<0.05;與輕度組比較,#P<0.05;與中度組比較,△P<0.05

        3 討論

        新生兒缺氧缺血性腦病多為足月胎齡兒,明顯臨床表現(xiàn)為:腦水腫導(dǎo)致的前囟飽滿、頭圍增大,多有肌張力增高、原始反射異常等,中重型患兒有驚厥表現(xiàn)[4]。新生兒缺氧缺血性腦病目前無(wú)特效藥物治療,其不僅嚴(yán)重威脅患兒生命,且后期致殘致死率較高,特異性檢測(cè)指標(biāo)可以指導(dǎo)臨床診斷,判斷病情發(fā)展情況,有助于治療的效果判定。

        3.1 食欲素 下丘腦是調(diào)節(jié)飲食及能量平衡的中樞。在大鼠下丘腦腹外側(cè)(LH)發(fā)現(xiàn)了兩種與食欲有關(guān)且來(lái)源于同一前體的神經(jīng)肽—增食因子A和B,即食欲素A和食欲素B,它們可激活兩種密切相關(guān)且與G蛋白偶聯(lián)的細(xì)胞表面受體(OX1R/OX2R)。包括2個(gè)外顯子和1個(gè)內(nèi)含子,共1 432個(gè)堿基對(duì),編碼含131個(gè)氨基酸殘基的多肽。研究表明食欲素不僅與飲食、進(jìn)水、循環(huán)系統(tǒng)、自主神經(jīng)系統(tǒng)有關(guān),其對(duì)應(yīng)激反應(yīng)也有一定影響[5-7]。本研究發(fā)現(xiàn),隨著病情不斷加重,患兒體內(nèi)食欲素水平不斷升高(P<0.05),且與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這表明食欲素可能參與了新生兒缺氧缺血性腦病的病程發(fā)展過(guò)程,與患兒創(chuàng)生應(yīng)激有關(guān)。

        3.2 神經(jīng)激肽A 神經(jīng)激肽A屬于速激肽族的一種,廣泛分布于體內(nèi)的神經(jīng)系統(tǒng)和胃腸道內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi),為短鏈多肽。其參與心血管、痛覺(jué)、消化和肺功能的調(diào)節(jié),在炎癥、休克、疼痛等疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要意義[8-10]。本研究中神經(jīng)激肽A水平隨著病情加重而逐漸降低(P<0.05),可能與腦灌注壓下降,腦組織缺血缺氧,神經(jīng)細(xì)胞水腫,神經(jīng)激肽A合成不足有關(guān)。

        3.3 神經(jīng)元特異性烯醇化酶 是參與糖酵解途徑的烯醇化酶中的一種,存在于神經(jīng)組織和神經(jīng)內(nèi)分泌組織中。NSE在腦組織細(xì)胞的活性最高,具有高度的組織特異性。其具有神經(jīng)保護(hù)、神經(jīng)元營(yíng)養(yǎng)的作用。缺血缺氧時(shí),由于神經(jīng)元細(xì)胞膜完整性受到破壞,其釋放入血,導(dǎo)致檢測(cè)水平增高[11]。本研究表明隨著患兒病情的加重,神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平不斷升高(P<0.05)。

        綜上所述,新生兒缺氧缺血性腦病無(wú)特效療法,因此特異性檢測(cè)指標(biāo),對(duì)指導(dǎo)臨床診療,判斷預(yù)后有重要意義。本研究中食欲素、神經(jīng)激肽A、神經(jīng)元特異性烯醇化酶水平與患兒病情進(jìn)展密切相關(guān),為臨床判斷患兒疾病進(jìn)展,進(jìn)行拮抗性的針對(duì)治療提供了一定借鑒。

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        2 偉強(qiáng),黃友敏,周永勤,等.新生兒缺氧缺血性腦病血清巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子與高敏c反應(yīng)蛋白的含量變化.中國(guó)煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志,2011,14:1352.1354.

        3 徐小靜, 張小莉.血管活性物質(zhì)在新生兒缺氧缺血性腦病中的臨床意義.臨床兒科雜志,2005,23:771-773.

        4 中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)新生兒學(xué)組.新生兒缺氧缺血性腦病診斷標(biāo)準(zhǔn).中華兒科學(xué)雜志,2005,43:584.

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        7 魏楚光, 李勇輝, 韓錦, 等.食欲素神經(jīng)肽在應(yīng)激過(guò)程中的作用.生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展雜志, 2010, 37: 713 -719.

        8 熊遠(yuǎn)青,陸長(zhǎng)東,黃河.缺氧缺血性腦病新生兒臍血及其出生后NSE、MBP的檢測(cè)意義.海南醫(yī)學(xué),2011,22:119-121.

        9 周名雄,張新路,張士發(fā),等.新生兒缺氧缺血性腦病血漿ET-I與血清NSE動(dòng)態(tài)變化及相關(guān)性的研究.放射免疫學(xué)雜志,2006,19:68-69.

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        10.3969/j.issn.1002-7386.2014.07.036

        050031 石家莊市,河北省兒童醫(yī)院急診科

        張中馥,050031 河北省兒童醫(yī)院急診科;

        E-mail:chenlihua20082008@126.com

        R 722.12

        A

        1002-7386(2014)07-1046-03

        )

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