武莉芳，劉苑，楊海霞

臨床研究

妊娠高血壓疾病患者內(nèi)皮功能及炎性因子的變化

武莉芳，劉苑，楊海霞

目的觀察妊娠高血壓疾病(HDP)患者內(nèi)皮功能及炎性因子的變化。方法選擇妊娠高血壓疾病患者70例為HDP組，其中妊娠期高血壓亞組患者30例，輕度子癇前期亞組患者22例，重度子癇前期亞組患者18例，選擇同期待產(chǎn)的正常孕婦(健康對照組)30例。2組孕婦均檢測內(nèi)皮素(ET)、一氧化氮(NO)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細胞介素-6 (IL-6)及超敏C-反應蛋白(hs-CRP)，并進行組間和病例組內(nèi)比較。結果HDP組ET、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平明顯高于正常對照組， NO值明顯低于對照組，組間比較有顯著性差異(P<0.05)。HDP組各亞組患者 ET、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平隨著妊娠高血壓病情的加重而逐步升高，且各亞組間比較有顯著性差異(P<0.05)；NO隨著妊娠高血壓病情的加重而逐步降低，且各亞組間比較有顯著性差異(P<0.05)。HDP組ET與TNF-α、IL-6、hs-CRP水平呈正相關(r=0.89，0.99，0.92，P<0.01)，與NO水平呈負相關(r=-0.64，P<0.01)。結論妊娠期孕婦定期監(jiān)測ET、NO、TNF-α、IL-6、hs-CRP，可早期發(fā)現(xiàn)、預測HDP的嚴重程度，對預防、治療及控制疾病的發(fā)展具有重要的臨床意義。

妊娠高血壓疾?。粌?nèi)皮素；一氧化氮；腫瘤壞死因子；白細胞介素-6 ；超敏C-反應蛋白

妊娠高血壓疾病(hypentensive disordens complicating pregnancy,HDP)是妊娠與血壓升高并存的一組疾病，其發(fā)生率約為5%～12%[1]。該組疾病嚴重影響母嬰健康，是孕產(chǎn)婦和圍產(chǎn)兒病死率升高的主要原因。本病的發(fā)病機制目前尚未完全闡明，但諸多專家認為，血管內(nèi)皮損傷及血管舒縮因子異常是HDP的中心環(huán)節(jié)，而炎性因子的參與也是HDP發(fā)生發(fā)展的主要因素。本文旨在通過監(jiān)測孕婦晚期的內(nèi)皮功能及炎性因子的改變，以期為HDP的早期治療及判定預后方面提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年5月—2013年10月于我院產(chǎn)科就診的妊娠期高血壓疾病患者70例作為HDP組，均符合HDP診斷標準[1]，其中妊娠期高血壓患者30例，年齡22～38(24.8±4.2)歲，平均孕期(37.0±1.2)周；輕度子癇前期亞組患者22例，年齡21～40(27.2±4.1)歲，平均孕期(36.9±1.4)周；重度子癇前期亞組患者18例，年齡22～41(26.9±4.5)歲，平均孕期(36.7±1.1)周。選擇同期待產(chǎn)的正常孕婦(健康對照組)30例，年齡21～36歲，平均(25.6±3.8)歲，平均孕(37.2±1.3)周。2組均為單胎，且無胎膜早破、前置胎盤、胎盤早剝等產(chǎn)科并發(fā)癥，無慢性高血壓、糖尿病、心臟病和肝腎病等內(nèi)科合并癥病史。觀察組孕婦平均年齡、平均孕周與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。入選者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測指標與方法

1.2.1 ET、NO檢測 觀察組患者均于治療前抽取清晨空腹靜脈血2 ml，抗凝(EDTA二鈉)后3 000 rpm離心10 min，取上層血漿裝于Ep試管中，-70℃低溫冰箱保存，用酶聯(lián)免疫吸附試驗測定血漿ET值；用放射免疫法測定血清NO。試劑盒均由北京科美東雅生物技術有限公司提供，由專業(yè)人員嚴格按照操作程序進行操作。對照組孕婦ET、NO檢測方法與觀察組相同。

1.2.2 TNF-α、IL-6、hs-CRP檢測 (1)TNF-α、IL-6檢測：觀察組患者均于治療前抽取清晨空腹靜脈血2 ml注入普通試管中，血液凝固后3 000 rpm離心10 min，取上層血清裝于Ep試管中，-70℃低溫冰箱保存，用放射免疫法測定血清TNF-α、IL-6值。試劑盒均由北京科美東雅生物技術有限公司提供，由專業(yè)人員嚴格按照操作程序進行操作。(2)hs-CRP檢測：觀察組患者均于治療前取肘靜脈血3 ml送檢，采用免疫比濁法，儀器為日立7180全自動生化分析儀，試劑為南京澳林生物科技有限公司提供，由專業(yè)人員嚴格按照操作程序進行操作。對照組孕婦TNF-α、IL-6、hs-CRP檢測方法與觀察組相同。

2 結 果

2.1 HDP組與健康對照組ET、NO和TNF-α、IL-6、hs-CRP水平比較 HDP組ET、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平明顯高于健康對照組，NO值明顯低于對照組，組間比較有顯著性差異(P<0.05)。見表1。

2.2 HDP組各亞組患者ET、NO和TNF-α、IL-6、hs-CRP水平比較 HDP組各亞組患者ET、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平隨著妊娠高血壓病情的加重而逐步升高，且各亞組間比較有顯著性差異(P<0.05)；HDP組中各亞組患者NO隨著妊娠高血壓病情的加重而逐步降低，且各亞組間比較有顯著性差異(P<0.05)。見表2。

2.3 相關性分析 HDP組血清ET與TNF-α、IL-6、hs-CRP水平呈正相關(r=0.89、0.99、0.92、P<0.01)，與NO水平呈負相關(r=-0.64，P<0.01)。

3 討 論

HDP多在妊娠20周以后發(fā)病，臨床表現(xiàn)為高血壓、尿蛋白、水腫等，嚴重時可出現(xiàn)抽搐、昏迷等體征，甚至危及母嬰生命安全。其確切的病因目前仍未完全闡明，但基本病理生理改變?yōu)槿焉锲谌硇用}痙攣性收縮和繼發(fā)性損傷[2，3]。目前認為，孕婦的免疫功能、胎盤淺著床、血管內(nèi)皮細胞損傷和胎盤、蛻膜血管網(wǎng)絡發(fā)育不良等因素均可能具有重要的作用。

內(nèi)皮功能障礙主要是由于內(nèi)皮的損傷和修復之間的動態(tài)平衡發(fā)生破壞。目前評價血管內(nèi)皮功能主要方法主要通過檢測血清 ET、NO 等分子生物學方法。ET 是目前所知的由內(nèi)皮細胞分泌的血管收縮作用最強的血管收縮肽，而NO 是血管內(nèi)皮細胞分泌的最主要的內(nèi)源性舒血管物質(zhì)[4]。生理狀態(tài)下孕婦ET和NO的適量釋放對胎盤血液循環(huán)的調(diào)節(jié)起重要作用[5]。內(nèi)皮細胞的功能完整與否，在一定程度上依賴ET與 NO 等血管活性物質(zhì)的動態(tài)平衡，內(nèi)皮細胞損傷可造成它們之間的平衡失調(diào)[6]。ET升高和NO產(chǎn)生減少，二者之間存在負反饋關系，在妊娠高血壓疾病發(fā)病機制中起重要作用。

TNF-α主要是由巨噬細胞產(chǎn)生的一種多肽因子，是參與多種生理和免疫過程中的重要介質(zhì)。在人類子宮蛻膜和胎盤組織中存在大量的巨噬細胞，TNF-α對正常妊娠的維持和分娩的發(fā)動有一定作用。在正常情況下，TNF具有抗腫瘤、抗感染等重要作用，對機體有利。TNF-α主要是通過損傷血管內(nèi)皮細胞參與HDP的發(fā)病[7]，高水平的TNF-α可通過與血管內(nèi)皮細胞上的受體結合或直接激活蛋白酶、膠原酶、氧自由基等，引起血管內(nèi)皮細胞損傷，血管活性物質(zhì)分泌失調(diào)，動脈痙攣，從而導致HDP的發(fā)生或加重。IL-6是一種分子量為 21～26 kD的糖蛋白，它可由多種組織細胞產(chǎn)生，其生物學作用廣泛，可通過激活血小板促進血小板聚集，導致血管內(nèi)皮細胞損害。研究表明，免疫失衡及血管內(nèi)皮損傷是妊娠期高血壓疾病的重要環(huán)節(jié)[8]?；既焉锲诟哐獕杭膊r由于單核細胞及淋巴細胞等被激活，IL-6 mRNA基因迅速開放，血清 IL-6 合成增加，并參與妊娠期高血壓疾病的發(fā)病過程[9]。國內(nèi)研究[10～12]發(fā)現(xiàn)，妊娠期高血壓、輕度、重度子癇前期患者血清 IL-6水平明顯高于正常妊娠組，且隨著病情加重明顯升高，本研究也證實了這點。CRP在炎性反應中促進巨噬細胞吞噬細菌等，導致IL-6釋放，IL-6促進肝臟不斷產(chǎn)生一種非特異性的急性時相蛋白。正常人血清中CRP含量極少，但是在急性炎癥反應期、外傷、類風濕性關節(jié)炎等患者血清中含量可成倍增加，具有高敏感性和精確性，hs-CRP是參與炎性反應或急性時相反應的主要蛋白，當有炎性反應存在時，hs-CRP明顯升高。正常晚期妊娠的孕婦其CRP水平也高于懷孕初期的水平，呈現(xiàn)明顯的隨著孕周的增加CRP水平

表1 2組ET、NO和TNF-α、IL-6、hs-CRP水平比較

表2 HDP組各亞組ET、NO、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平比較

不斷增加的狀態(tài)[13]。HDP患者較相同孕周正常妊娠者hs-CRP升高，其作用機制可能為各種原因導致炎性反應的過度激活，炎性介質(zhì)、炎性細胞因子、氧化應激產(chǎn)物明顯增多，由于高濃度CRP參與炎性反應，損傷血管內(nèi)皮細胞，使內(nèi)膜增厚，血管阻力增加，血管的舒張功能降低，從而引起血壓升高。本研究發(fā)現(xiàn)ET、TNF-α、IL-6和hs-CRP在正常妊娠維持較低水平，而NO在正常妊娠維持較高水平，ET、TNF-α、IL-6和hs-CRP水平隨HDP的嚴重程度增加而逐漸升高，NO隨HDP的嚴重程度增加而逐漸降低，其中重度子癇前期組升高及降低最顯著。上述細胞因子通過損害血管內(nèi)皮細胞，導致血管阻力增加，減低血管各方面功能，引發(fā)HDP，并隨著HDP病程進展，上述血管因子隨之上升或下降，表現(xiàn)出與疾病程度明顯的相關性和一致性。

本研究通過正常妊娠孕婦與HDP患者血清ET、NO、TNF-α、IL-6、hs-CRP的監(jiān)測，進一步證實HDP患者存在不同程度的血管內(nèi)皮損傷，妊娠期孕婦定期監(jiān)測ET、NO、TNF-α、IL-6、hs-CRP，可早期發(fā)現(xiàn)、預測HDP的嚴重程度，對預防、治療及控制疾病的發(fā)展具有重要的臨床意義。

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075100 張家口，河北北方學院附屬第二醫(yī)院檢驗科(武莉芳)，婦產(chǎn)科(劉苑、楊海霞)

10.3969 / j.issn.1671-6450.2014.09.029

2014-06-04)