韓 燕，郁智良，聞 俊，周婷婷*，盛春泉，范國榮

[1.第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院藥物分析學(xué)教研室，上海市藥物(中藥)代謝重點實驗室，上海 200433；2.解放軍66397部隊衛(wèi)生隊，北京 100093]

艾迪康唑(iodiconazole)是三唑類抗真菌新藥，與咪唑類藥物相比，分子結(jié)構(gòu)中咪唑環(huán)由三氮唑環(huán)取代。其對深部真菌和淺部真菌均具有很強(qiáng)的活性，與其他臨床上常用的抗真菌藥物相比，具有抗真菌作用強(qiáng)，抗真菌譜廣，毒性低和穩(wěn)定性好等優(yōu)點[1]，是目前已進(jìn)入臨床研究階段的一類新藥。艾迪康唑具有紫外吸收特征，可用于質(zhì)量控制，但其乳膏劑的輔料成分亦有紫外吸收，干擾了艾迪康唑的含量測定。對于三唑類抗真菌藥的含量測定已有報道[2-4]，本研究采用二階導(dǎo)數(shù)光譜法能有效排除輔料的干擾，方法簡便、準(zhǔn)確、快速、重現(xiàn)性好[5，6]。

1 儀器和試劑

1.1 儀器 UV-2450型紫外分光光度計(日本島津公司)；FA1604萬分之一電子天平(上海安亭電子儀器廠)。

1.2 藥品和試劑 艾迪康唑?qū)φ掌?純度99.1%，第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院藥物化學(xué)教研室提供)；艾迪康唑乳膏劑(標(biāo)示量20 mg/g，批號081108)和艾迪康唑乳膏劑空白輔料(安徽濟(jì)人藥業(yè)有限公司)；甲醇(分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

2 方法和結(jié)果

2.1 溶液的制備 (1)對照品溶液：精密稱取10.0 mg艾迪康唑?qū)φ掌罚眉状既芙獠⒍ㄈ葜?00 ml，配成濃度為100.0 μg/ml的艾迪康唑?qū)φ掌穬湟海? ℃冰箱保存待用。(2)供試品溶液：取本品約50 mg(約相當(dāng)于1 mg艾迪康唑)，精密稱定，置燒杯中，加入甲醇充分?jǐn)嚢枋拱峡颠蛉芙猓^濾，濾液全部轉(zhuǎn)移至100 ml量瓶中，用甲醇定容，制成濃度為10.0 μg/ml的供試品溶液。(3)空白輔料溶液：取艾迪康唑乳膏劑的空白輔料約50 mg，精密稱定，同“供試品溶液”項下方法配制，即得。

2.2 零階和二階導(dǎo)數(shù)光譜圖 精密量取艾迪康唑?qū)φ掌穬湟?.5 ml，用甲醇稀釋至25 ml，得濃度為10.0 μg/ml艾迪康唑?qū)φ掌啡芤?，?90～400 nm波長范圍內(nèi)掃描，掃描速度為400 nm/min，狹縫寬度設(shè)定為2 nm，Δλ=8 nm，測定其紫外光譜及二階導(dǎo)數(shù)光譜。同法測定艾迪康唑乳膏劑供試品溶液和空白輔料溶液，結(jié)果見圖1、2。由圖1可見，艾迪康唑?qū)φ掌吩?38 nm處有最大紫外吸收，而乳膏劑空白輔料在此也有一定的紫外吸收。二階導(dǎo)數(shù)光譜圖(圖2)顯示，艾迪康唑?qū)φ掌吩?13 nm處有較強(qiáng)的振幅，而乳膏劑空白輔料在此處振幅值為零，不影響測定，可采用“峰-零”法。

圖1 艾迪康唑的紫外光譜圖

圖2 艾迪康唑二階導(dǎo)數(shù)光譜

2.3 線性關(guān)系考察 精密量取對照品儲備液1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 ml，分別置25 ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，配制成濃度為6.0、8.0、10.0、12.0和14.0 μg/ml的對照品系列溶液，在213 nm波長處測定其二階導(dǎo)數(shù)吸光度值(A)，與對照品濃度(c)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為：A=0.005 3c+0.001 8 (r=0.999 4)，表明艾迪康唑濃度在6.0～14.0 μg/ml 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.4 精密度實驗 取濃度為10.0 μg/ml的艾迪康唑?qū)φ掌啡芤海?13 nm連續(xù)重復(fù)測定5次，其A值的RSD為0.85%(n=5)，結(jié)果表明本方法精密度良好。

2.5 重復(fù)性實驗 取同一批號艾迪康唑乳膏劑(批號081108)6份，每份約50 mg，精密稱定，按2.1(2)方法制備供試品溶液，測定A值并計算艾迪康唑含量，結(jié)果艾迪康唑的平均含量為標(biāo)示量的99.14%，RSD為1.50%(n=6)，表明本測定方法重現(xiàn)性良好。

2.6 加樣回收率實驗 精密稱取相當(dāng)于艾迪康唑1 mg的乳膏劑3份，分別置于50 ml量瓶中，精密量取6、10和14 ml對照品儲備液分別加入上述量瓶，按“供試品溶液”制備方法處理，定容后分別從上述3個量瓶中精密量取6.25 ml溶液置于50 ml量瓶，用甲醇稀釋并定容制成濃度為8.0、10.0和12.0 μg/ml溶液各3份，分別測定213 nm處二階導(dǎo)數(shù)振幅值，代入回歸方程求算回收率。結(jié)果測得低、中、高3個濃度的加樣回收率分別為(100.2±0.5)%、(99.3±0.7)%和(100.3±0.3)%(n=3)，表明該方法的準(zhǔn)確度符合要求。

2.7 穩(wěn)定性實驗 按2.1(2)項下方法配制濃度為10.0 μg/ml的供試品溶液，分別于0.5、1、1.5、2、2.5、3 h測定吸光度，其RSD=0.91%(n=6)，結(jié)果表明供試品溶液在室溫條件下放置3 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8 樣品含量測定 取批號為081108艾迪康唑乳膏劑，按2.1(2)項下供試品溶液制備方法操作，并平行3份進(jìn)行含量測定。結(jié)果測得艾迪康唑乳膏劑含量相當(dāng)于標(biāo)示量的99.12%，RSD=1.2%(n=3)。

3 討 論

本研究采用二階導(dǎo)數(shù)光譜法，對儀器的要求較高，應(yīng)注意對儀器波長的校準(zhǔn)，以免產(chǎn)生較大偏差。

艾迪康唑在甲醇中有較好的溶解性，而其乳膏劑空白輔料的溶解度則相對較小，通過掃描二階導(dǎo)數(shù)光譜圖，可觀察到空白輔料的振幅值恰為零，有效地排除了對艾迪康唑含量測定的干擾。本法可不經(jīng)復(fù)雜的分離提取過程直接測定艾迪康唑的含量，且穩(wěn)定性和精確性良好。樣品可在超聲裝置中提取，大大縮短了溶解所需要的時間，對結(jié)果沒有顯著影響。

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