鄧志勇+潘百明+陳興田+梁昌祥+黃宇

摘要：建立了比色法測定木荷樹皮提取物總皂苷含量的方法。研究香草醛-冰醋酸溶液濃度、高氯酸用量、反應(yīng)溫度和加熱時間對顯色反應(yīng)的影響，確定最佳比色條件為以7%香草醛-冰醋酸溶液和0.8 mL高氯酸溶液作為顯色劑，顯色溫度為70 ℃，顯色時間為25 min，在550 nm處測定吸光度。回歸方程為y=4.915x+0.083 2（r2 =0.999 6），線性可靠，曲線顯著，精密度試驗(yàn)的RSD為0.42%。該比色條件下測得木荷樹皮提取物總皂苷含量為2.25%。該方法操作簡單、準(zhǔn)確、穩(wěn)定性較好，可用于測定木荷樹皮提取物總皂苷含量。

關(guān)鍵詞：木荷；皂苷；比色法；測定

中圖分類號：O657.32文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號：1002-1302（2014）02-0281-03

收稿日期：2013-10-11

基金項(xiàng)目：廣西壯族自治區(qū)自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目（編號：2011GXNSFB018055）。

作者簡介：鄧志勇（1978—），男，廣西臨桂人，碩士，講師，主要從事植物源農(nóng)藥研究及天然藥物的開發(fā)與利用。E-mail：dengzhiyong05@163.com。木荷（Schima superba Gardn. et Champ.）別稱“荷木”，屬山茶科常綠喬木。目前國內(nèi)外報道木荷的化學(xué)成分主要有水解鞣質(zhì)類、三萜及皂苷類、揮發(fā)油類、表兒茶素、α-菠甾醇等。木荷皂苷具有抑制腫瘤細(xì)胞生長、驅(qū)蟲作用[1-3]；同時木荷提取物對小菜蛾和菜粉蝶有較高的生長發(fā)育抑制作用、拒食作用等[4-6]。但是目前還沒有關(guān)于木荷皂苷提取工藝研究的報道。皂苷的定量是皂苷研究利用的最大難題，皂苷本身沒有紫外吸收，也無專一性顯色劑，直接測定難度很大。因此本試驗(yàn)對木荷樹皮提取物中總皂苷含量的比色法測定工藝進(jìn)行了研究，為木荷樹皮中總皂苷的含量測定提供了快速、簡捷、準(zhǔn)確的參考方法。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1試驗(yàn)材料與試劑木荷樹皮：采自廣西壯族自治區(qū)桂林市臨桂縣宛田鄉(xiāng)，自然晾干后，用高速多功能粉碎機(jī)粉碎，粉末于鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)60 ℃恒溫烘干至恒重，過40目標(biāo)準(zhǔn)篩備用。

無水乙醇、石油醚、正丁醇、香草醛、高氯酸、冰醋酸、皂苷標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥98%）均為國產(chǎn)分析純（廣東光華化學(xué)廠有限公司）。

1.1.2儀器設(shè)備JP-350A-8型高速多功能粉碎機(jī)（浙江省永康市久品工貿(mào)有限公司）；FA1004電子天平（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）；40目標(biāo)準(zhǔn)篩（江蘇省無錫市錫儀建材儀器廠）；SHZ-D（Ⅲ）型循環(huán)水式真空泵（河南省鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）；TU-1901雙光束紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任有限公司）；101-1型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1檢測波長的確定精確吸取對照品溶液（準(zhǔn)確稱取12 mg皂苷標(biāo)準(zhǔn)品，加無水乙醇定容到50 mL，配成 0.24 mg/mL 對照品溶液）0.5 mL和供試品溶液（稱取20 g木荷樹皮，粉碎，稱重，置于索氏提取器中，用100 mL無水乙醇回流10 h；提取結(jié)束后趁熱抽濾，并將提取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮近干，得到流浸膏，將流浸膏用無水乙醇定容至 200 mL，取用時再稀釋10倍）0.5 mL分別加入試管中，于 70 ℃ 水浴揮干溶劑。然后，依次加入7%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸0.8 mL，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻5 min，停止反應(yīng)，再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，靜置10 min。在波長400～700 nm范圍內(nèi)掃描，分別得到皂苷標(biāo)準(zhǔn)品和木荷樹皮提取液的可見光譜掃描圖。

1.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定準(zhǔn)確稱取5 mg皂苷標(biāo)準(zhǔn)品，放入50 mL容量瓶中，再加入乙醇溶解，定容至刻度。準(zhǔn)確吸取04、0.6、0.8、1.0、1.2 mL皂苷標(biāo)準(zhǔn)液置于試管中70 ℃水浴揮干溶劑；然后依次加入7%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和 0.8 mL 高氯酸，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻 5 min，停止反應(yīng)；再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，靜置 10 min，在550 nm處測定吸光度。平行測定每一個濃度3次，并以3次的平均吸光度為縱坐標(biāo)，皂苷標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量為橫坐標(biāo)作圖，建立回歸線方程。

1.2.3最佳測定條件的確定

1.2.3.1香草醛-冰醋酸溶液濃度精確吸取0.5 mL供試品溶液，70 ℃水浴揮干溶劑，依次配置1%、3%、5%、7%、9%的香草醛-冰醋酸溶液，分別加入香草醛-冰醋酸溶液 0.2 mL 和高氯酸0.8 mL，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻5 min，停止反應(yīng)，再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，測定吸光度。

1.2.3.2高氯酸用量準(zhǔn)確量取供試樣品0.5 mL于試管中，并放入70 ℃水浴揮發(fā)溶劑，準(zhǔn)確量取7% 香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL加入，再分別依次加入高氯酸0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL，充分振蕩后于70 ℃水浴靜置加熱15 min，取出用冷水冷卻，加入1.25 mL冰醋酸，以不加供試樣品的平行樣為空白，測定吸光度。

1.2.3.3反應(yīng)溫度準(zhǔn)確量取供試樣品0.5 mL，70 ℃水浴揮干溶劑，然后依次加入7%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸0.8 mL，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻 5 min，停止反應(yīng)，再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，依次改變水浴溫度為40、50、60、70、80 ℃，再測定其吸光度。

1.2.3.4加熱時間準(zhǔn)確量取供試樣品0.5 mL，70 ℃水浴揮干溶劑，然后依次加入7%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸0.8 mL，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻 5 min，停止反應(yīng)，再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，于70 ℃水浴中分別加熱10、15、20、25、30 min，測定吸光度。endprint

1.2.4穩(wěn)定性試驗(yàn) 精確吸取0.5 mL供試品溶液，70 ℃水浴揮干溶劑，然后依次加入7%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸0.8 mL，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻5 min，停止反應(yīng)，再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，分別在10、20、30、40、50、60、70、80、90 min時在最大吸收波長處測定吸光度。

1.2.5精密度試驗(yàn)取7份供試品溶液，每份0.5 mL，70 ℃水浴揮干溶劑，然后依次加入7%香草醛-冰醋酸溶液 0.2 mL 和高氯酸0.8 mL，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻5 min，停止反應(yīng)，再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，測定吸光度。

1.2.6木荷樹皮提取物樣品總皂苷含量的測定稱取20 g木荷樹皮，粉碎，稱重，置于索氏提取器中，用100 mL無水乙醇回流10 h，提取結(jié)束后趁熱抽濾，并將提取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮近干，得到流浸膏，將流浸膏用無水乙醇定容至 200 mL，取用時再稀釋10倍。取供試品溶液3份，每份精確吸取0.5 mL，70 ℃水浴揮干溶劑，然后依次加入7%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸0.8 mL，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻5 min，停止反應(yīng)，再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，測定吸光度，計算樣品含量。

2結(jié)果與分析

2.1檢測波長的確定

由圖1、圖2可以看出，在400～700 nm波長范圍內(nèi)，皂苷標(biāo)準(zhǔn)品在550 nm附近有最大吸收峰，木荷樹皮提取物在 460 nm 處有最大吸收波長，綜合分析后選擇550 nm作為木荷樹皮提取物總皂苷吸光度的檢測波長。

2.2皂苷標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果與分析

由圖3可知，r2>0.999，說明線性關(guān)系良好，設(shè)計合理，準(zhǔn)確度高。

2.3最佳測定條件的確定

2.3.1香草醛-冰醋酸溶液濃度由圖4可知，1%～7%的香草醛-冰醋酸溶液吸光度隨濃度的升高而增大，濃度為7%時吸光度最高，濃度大于7% 時吸光度開始降低，因此顯色反應(yīng)中香草醛-冰醋酸溶液的最佳濃度為7%。

2.3.2高氯酸用量由圖5可知，在本試驗(yàn)范圍內(nèi)，高氯酸用量小于0.8 mL時，吸光度逐漸增大，在0.8 mL時有最大吸光度，大于0.8 mL后吸光度又逐漸減小，因此高氯酸最佳用量為0.8 mL。

2.3.3反應(yīng)溫度由圖6可知，在本試驗(yàn)范圍內(nèi)，溫度為 70 ℃ 時，吸光度最大，當(dāng)溫度超過70 ℃以后，吸光度開始下降，因此最佳水浴溫度為70 ℃。

2.3.4加熱時間由圖7可知，在本試驗(yàn)范圍內(nèi)，反應(yīng)時間在25 min時，吸光度最大，因此最適顯色時間為25 min。

2.4穩(wěn)定性試驗(yàn)

由圖8可以看出，經(jīng)香草醛-高氯酸法顯色后在60 min時數(shù)值基本穩(wěn)定，可以達(dá)到測定的要求。

2.5精密度試驗(yàn)

分別準(zhǔn)確量取7份皂苷樣品，每份0.5 mL，根據(jù)香草醛-高氯酸顯色用比色法在最佳條件測定供試樣品的吸光度（表1）。通過計算得出相對標(biāo)準(zhǔn)差RSD=0.42%（n=7）， 表

2.6木荷樹皮提取物樣品總皂苷含量的測定

根據(jù)香草醛-高氯酸顯色用比色法在最佳條件測定供試樣品的吸光度，由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到木荷試樣品的質(zhì)量濃度，再計算出木荷樹皮總皂苷的含量為2.25%。

3結(jié)論與討論

通過香草醛-高氯酸比色法對木荷樹皮提取物總皂苷含量進(jìn)行了詳細(xì)的條件試驗(yàn)，建立了木荷樹皮提取物總皂苷含量的測定方法。由試驗(yàn)結(jié)果可以得出，以0.8 mL的高氯酸溶液和7%的香草醛-冰醋酸溶液作為顯色劑，顯色時間為 25 min，顯色溫度為70 ℃時，比色體系最佳、最穩(wěn)定。在 550 nm 下測定所得的回歸線方程為y=4.915x+0.083 2（r2=0.999 6），精密度試驗(yàn)相對標(biāo)準(zhǔn)差RSD=0.42%。該方法操作簡單，準(zhǔn)確，穩(wěn)定性較好，失擬性小，在該條件下測得木荷樹皮提取物總皂苷含量為2.25%。

參考文獻(xiàn)：

[1]Ohtsuki T，Miyagawa T，Koyano T，et，al. Acylated triterpenoid saponins from Schima noronhae and their cell growth inhibitory activity[J]. J Nat Prod，2008，71：918-921.

[2]Ohtsuki T，Sato M，Koyano T，et al. Steroidal saponins from Calamus insignis，and their cell growth and cell cycle inhibitory activities[J]. Bioorg Med Chem，2006，14（3）：659-665.

[3]陳維新，吳大剛. 銀木荷皂苷元研究[J]. 化學(xué)學(xué)報，1977，36（3）：229-232.

[4]鄧志勇，鄧業(yè)成，劉艷華. 木荷提取物對小菜蛾和菜青蟲的拒食活性[J]. 農(nóng)藥，2007，46（12）：854-856.

[5]鄧志勇. 木荷提取物對小菜蛾和菜粉蝶生長發(fā)育的抑制效果[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（4）：129-130.

[6]鄧志勇，鄧業(yè)成，周國永，等. 木荷樹皮殺蟲活性成分追蹤的初步試驗(yàn)[J]. 農(nóng)藥，2010，49（8）：612-614.endprint

1.2.4穩(wěn)定性試驗(yàn) 精確吸取0.5 mL供試品溶液，70 ℃水浴揮干溶劑，然后依次加入7%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸0.8 mL，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻5 min，停止反應(yīng)，再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，分別在10、20、30、40、50、60、70、80、90 min時在最大吸收波長處測定吸光度。

1.2.5精密度試驗(yàn)取7份供試品溶液，每份0.5 mL，70 ℃水浴揮干溶劑，然后依次加入7%香草醛-冰醋酸溶液 0.2 mL 和高氯酸0.8 mL，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻5 min，停止反應(yīng)，再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，測定吸光度。

1.2.6木荷樹皮提取物樣品總皂苷含量的測定稱取20 g木荷樹皮，粉碎，稱重，置于索氏提取器中，用100 mL無水乙醇回流10 h，提取結(jié)束后趁熱抽濾，并將提取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮近干，得到流浸膏，將流浸膏用無水乙醇定容至 200 mL，取用時再稀釋10倍。取供試品溶液3份，每份精確吸取0.5 mL，70 ℃水浴揮干溶劑，然后依次加入7%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸0.8 mL，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻5 min，停止反應(yīng)，再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，測定吸光度，計算樣品含量。

2結(jié)果與分析

2.1檢測波長的確定

由圖1、圖2可以看出，在400～700 nm波長范圍內(nèi)，皂苷標(biāo)準(zhǔn)品在550 nm附近有最大吸收峰，木荷樹皮提取物在 460 nm 處有最大吸收波長，綜合分析后選擇550 nm作為木荷樹皮提取物總皂苷吸光度的檢測波長。

2.2皂苷標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果與分析

由圖3可知，r2>0.999，說明線性關(guān)系良好，設(shè)計合理，準(zhǔn)確度高。

2.3最佳測定條件的確定

2.3.1香草醛-冰醋酸溶液濃度由圖4可知，1%～7%的香草醛-冰醋酸溶液吸光度隨濃度的升高而增大，濃度為7%時吸光度最高，濃度大于7% 時吸光度開始降低，因此顯色反應(yīng)中香草醛-冰醋酸溶液的最佳濃度為7%。

2.3.2高氯酸用量由圖5可知，在本試驗(yàn)范圍內(nèi)，高氯酸用量小于0.8 mL時，吸光度逐漸增大，在0.8 mL時有最大吸光度，大于0.8 mL后吸光度又逐漸減小，因此高氯酸最佳用量為0.8 mL。

2.3.3反應(yīng)溫度由圖6可知，在本試驗(yàn)范圍內(nèi)，溫度為 70 ℃ 時，吸光度最大，當(dāng)溫度超過70 ℃以后，吸光度開始下降，因此最佳水浴溫度為70 ℃。

2.3.4加熱時間由圖7可知，在本試驗(yàn)范圍內(nèi)，反應(yīng)時間在25 min時，吸光度最大，因此最適顯色時間為25 min。

2.4穩(wěn)定性試驗(yàn)

由圖8可以看出，經(jīng)香草醛-高氯酸法顯色后在60 min時數(shù)值基本穩(wěn)定，可以達(dá)到測定的要求。

2.5精密度試驗(yàn)

分別準(zhǔn)確量取7份皂苷樣品，每份0.5 mL，根據(jù)香草醛-高氯酸顯色用比色法在最佳條件測定供試樣品的吸光度（表1）。通過計算得出相對標(biāo)準(zhǔn)差RSD=0.42%（n=7）， 表

2.6木荷樹皮提取物樣品總皂苷含量的測定

根據(jù)香草醛-高氯酸顯色用比色法在最佳條件測定供試樣品的吸光度，由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到木荷試樣品的質(zhì)量濃度，再計算出木荷樹皮總皂苷的含量為2.25%。

3結(jié)論與討論

通過香草醛-高氯酸比色法對木荷樹皮提取物總皂苷含量進(jìn)行了詳細(xì)的條件試驗(yàn)，建立了木荷樹皮提取物總皂苷含量的測定方法。由試驗(yàn)結(jié)果可以得出，以0.8 mL的高氯酸溶液和7%的香草醛-冰醋酸溶液作為顯色劑，顯色時間為 25 min，顯色溫度為70 ℃時，比色體系最佳、最穩(wěn)定。在 550 nm 下測定所得的回歸線方程為y=4.915x+0.083 2（r2=0.999 6），精密度試驗(yàn)相對標(biāo)準(zhǔn)差RSD=0.42%。該方法操作簡單，準(zhǔn)確，穩(wěn)定性較好，失擬性小，在該條件下測得木荷樹皮提取物總皂苷含量為2.25%。

參考文獻(xiàn)：

[1]Ohtsuki T，Miyagawa T，Koyano T，et，al. Acylated triterpenoid saponins from Schima noronhae and their cell growth inhibitory activity[J]. J Nat Prod，2008，71：918-921.

[2]Ohtsuki T，Sato M，Koyano T，et al. Steroidal saponins from Calamus insignis，and their cell growth and cell cycle inhibitory activities[J]. Bioorg Med Chem，2006，14（3）：659-665.

[3]陳維新，吳大剛. 銀木荷皂苷元研究[J]. 化學(xué)學(xué)報，1977，36（3）：229-232.

[4]鄧志勇，鄧業(yè)成，劉艷華. 木荷提取物對小菜蛾和菜青蟲的拒食活性[J]. 農(nóng)藥，2007，46（12）：854-856.

[5]鄧志勇. 木荷提取物對小菜蛾和菜粉蝶生長發(fā)育的抑制效果[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（4）：129-130.

[6]鄧志勇，鄧業(yè)成，周國永，等. 木荷樹皮殺蟲活性成分追蹤的初步試驗(yàn)[J]. 農(nóng)藥，2010，49（8）：612-614.endprint

1.2.4穩(wěn)定性試驗(yàn) 精確吸取0.5 mL供試品溶液，70 ℃水浴揮干溶劑，然后依次加入7%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸0.8 mL，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻5 min，停止反應(yīng)，再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，分別在10、20、30、40、50、60、70、80、90 min時在最大吸收波長處測定吸光度。

1.2.5精密度試驗(yàn)取7份供試品溶液，每份0.5 mL，70 ℃水浴揮干溶劑，然后依次加入7%香草醛-冰醋酸溶液 0.2 mL 和高氯酸0.8 mL，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻5 min，停止反應(yīng)，再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，測定吸光度。

1.2.6木荷樹皮提取物樣品總皂苷含量的測定稱取20 g木荷樹皮，粉碎，稱重，置于索氏提取器中，用100 mL無水乙醇回流10 h，提取結(jié)束后趁熱抽濾，并將提取液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮近干，得到流浸膏，將流浸膏用無水乙醇定容至 200 mL，取用時再稀釋10倍。取供試品溶液3份，每份精確吸取0.5 mL，70 ℃水浴揮干溶劑，然后依次加入7%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL和高氯酸0.8 mL，70 ℃水浴15 min，水浴后立即用冷水冷卻5 min，停止反應(yīng)，再加入1.25 mL冰醋酸，充分振蕩，測定吸光度，計算樣品含量。

2結(jié)果與分析

2.1檢測波長的確定

由圖1、圖2可以看出，在400～700 nm波長范圍內(nèi)，皂苷標(biāo)準(zhǔn)品在550 nm附近有最大吸收峰，木荷樹皮提取物在 460 nm 處有最大吸收波長，綜合分析后選擇550 nm作為木荷樹皮提取物總皂苷吸光度的檢測波長。

2.2皂苷標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果與分析

由圖3可知，r2>0.999，說明線性關(guān)系良好，設(shè)計合理，準(zhǔn)確度高。

2.3最佳測定條件的確定

2.3.1香草醛-冰醋酸溶液濃度由圖4可知，1%～7%的香草醛-冰醋酸溶液吸光度隨濃度的升高而增大，濃度為7%時吸光度最高，濃度大于7% 時吸光度開始降低，因此顯色反應(yīng)中香草醛-冰醋酸溶液的最佳濃度為7%。

2.3.2高氯酸用量由圖5可知，在本試驗(yàn)范圍內(nèi)，高氯酸用量小于0.8 mL時，吸光度逐漸增大，在0.8 mL時有最大吸光度，大于0.8 mL后吸光度又逐漸減小，因此高氯酸最佳用量為0.8 mL。

2.3.3反應(yīng)溫度由圖6可知，在本試驗(yàn)范圍內(nèi)，溫度為 70 ℃ 時，吸光度最大，當(dāng)溫度超過70 ℃以后，吸光度開始下降，因此最佳水浴溫度為70 ℃。

2.3.4加熱時間由圖7可知，在本試驗(yàn)范圍內(nèi)，反應(yīng)時間在25 min時，吸光度最大，因此最適顯色時間為25 min。

2.4穩(wěn)定性試驗(yàn)

由圖8可以看出，經(jīng)香草醛-高氯酸法顯色后在60 min時數(shù)值基本穩(wěn)定，可以達(dá)到測定的要求。

2.5精密度試驗(yàn)

分別準(zhǔn)確量取7份皂苷樣品，每份0.5 mL，根據(jù)香草醛-高氯酸顯色用比色法在最佳條件測定供試樣品的吸光度（表1）。通過計算得出相對標(biāo)準(zhǔn)差RSD=0.42%（n=7）， 表

2.6木荷樹皮提取物樣品總皂苷含量的測定

根據(jù)香草醛-高氯酸顯色用比色法在最佳條件測定供試樣品的吸光度，由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到木荷試樣品的質(zhì)量濃度，再計算出木荷樹皮總皂苷的含量為2.25%。

3結(jié)論與討論

通過香草醛-高氯酸比色法對木荷樹皮提取物總皂苷含量進(jìn)行了詳細(xì)的條件試驗(yàn)，建立了木荷樹皮提取物總皂苷含量的測定方法。由試驗(yàn)結(jié)果可以得出，以0.8 mL的高氯酸溶液和7%的香草醛-冰醋酸溶液作為顯色劑，顯色時間為 25 min，顯色溫度為70 ℃時，比色體系最佳、最穩(wěn)定。在 550 nm 下測定所得的回歸線方程為y=4.915x+0.083 2（r2=0.999 6），精密度試驗(yàn)相對標(biāo)準(zhǔn)差RSD=0.42%。該方法操作簡單，準(zhǔn)確，穩(wěn)定性較好，失擬性小，在該條件下測得木荷樹皮提取物總皂苷含量為2.25%。

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