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        PTEN和survivin基因在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中的表達(dá)及臨床意義

        2014-07-18 11:53:17黃海東李莉洋康景佳
        武警醫(yī)學(xué) 2014年1期
        關(guān)鍵詞:母細(xì)胞切片視網(wǎng)膜

        黃海東,李莉洋,郭 穎,趙 興,康景佳,管 迪

        PTEN和survivin基因在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中的表達(dá)及臨床意義

        黃海東,李莉洋,郭 穎,趙 興,康景佳,管 迪

        目的探討PTEN及survivin基因在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中的表達(dá)及臨床意義。方法選擇30例視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織為觀察組,30例正常視網(wǎng)膜組織為對(duì)照組,應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)兩組切片中PTEN、survivin基因的表達(dá),比較兩組PTEN和survivin表達(dá)差異。結(jié)果觀察組PTEN總陽(yáng)性表達(dá)率為53.3%,對(duì)照組PTEN總陽(yáng)性表達(dá)率為100.0%,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);觀察組survivin總陽(yáng)性表達(dá)率為60.0%,對(duì)照組survivin總陽(yáng)性表達(dá)率為0.0%,兩組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論P(yáng)TEN基因陽(yáng)性表達(dá)降低與survivin基因陽(yáng)性表達(dá)升高,是視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的發(fā)病機(jī)制之一。

        PTEN基因;survivin基因;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤;表達(dá)

        PTEN是一種抑癌基因,具有雙特異性磷酸酶活性,在細(xì)胞遷移、阻滯細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡過程中具有重要意義,在很多惡性腫瘤中PTEN基因均存在改變。survivin基因是凋亡抑制蛋白的家族成員,在正常組織中不表達(dá)或者低表達(dá),而在很多惡性腫瘤組織中出現(xiàn)高表達(dá)[1,2]。目前,視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的發(fā)病機(jī)制尚未明確[3],本研究于2012-02至2013-02選取我院存檔的視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤病理標(biāo)本,分析PTEN、survivin基因在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中的表達(dá),探討視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤發(fā)生及發(fā)展的病理機(jī)制,為臨床診治及判斷預(yù)后提供依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 材料 30例視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(觀察組)選自我院近10年來存檔的病理標(biāo)本,其中男17例,女13例,年齡10個(gè)月~4歲,平均(2.3±1.5)歲。另外取正常視網(wǎng)膜組織30例為對(duì)照組(為同期非眼部疾病死亡的嬰幼兒視網(wǎng)膜標(biāo)本,取組織切片之前均經(jīng)監(jiān)護(hù)人簽字同意),其中男16例,女14例,年齡1~5歲,平均(2.5±1.7)歲。兩組視網(wǎng)膜切片基本資料具有可比性,本研究經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

        1.2 試劑及方法 選用兔抗人survivin及PTEN多克隆抗體;DAB(二氨基聯(lián)苯胺)顯色試劑盒(博士德生物工程有限公司,武漢);試劑盒(SAl022型)。采用免疫組織化學(xué)(SABC)方法檢測(cè)切片組織中PTEN和survivin,根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行相關(guān)操作;比較兩組PTEN和survivin表達(dá)情況。

        1.3 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) PTEN陽(yáng)性染色標(biāo)準(zhǔn):切片組織細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜內(nèi)可見棕褐色的顆粒;survivin陽(yáng)性染色標(biāo)準(zhǔn):分別定位于細(xì)胞膜、細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì),染成棕黃色。表達(dá)強(qiáng)度根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞的比例及陽(yáng)性物質(zhì)染色的深淺進(jìn)行評(píng)價(jià)。在每張切片上隨機(jī)選擇高倍視野(×400)5個(gè),每個(gè)視野的腫瘤細(xì)胞為100個(gè),5個(gè)視野即500個(gè)細(xì)胞,如陽(yáng)性細(xì)胞比例≤5%則記為0分; 6%~24%記為1分;25%~49%記為2分;50%~74%記為3分;≥75%者記為4分。同時(shí)根據(jù)染色物質(zhì)顏色計(jì)分,棕褐色為3分,棕黃色為2分,淡黃色為1分,無染色為0分。表達(dá)強(qiáng)度為強(qiáng)陽(yáng)性:上述兩項(xiàng)計(jì)分之和為6~7分;陽(yáng)性:4~5分;弱陽(yáng)性:2~3分。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 運(yùn)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件,采用秩和檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié) 果

        2.1 兩組PTEN基因表達(dá)情況比較 觀察組PTEN基因總陽(yáng)性表達(dá)率為53.3%,顯著低于對(duì)照組100.0%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,表1)。PTEN表達(dá)陽(yáng)性病理圖見圖1。

        表1 兩組視網(wǎng)膜組織切片PTEN基因表達(dá)情況比較 (n;%)

        圖1 PTEN基因表達(dá)陽(yáng)性組織切片(SABC,×400)

        2.2 兩組survivin基因表達(dá)情況比較 觀察組survivin基因總陽(yáng)性表達(dá)率為60.0%,顯著高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,表2)。survivin表達(dá)陽(yáng)性病理圖見圖2。

        表2 兩組視網(wǎng)膜組織切片survivin基因表達(dá)情況比較 (n;%)

        圖2 survivin基因表達(dá)組織切片(SABC,×400)

        3 討 論

        視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤在嬰幼兒期常見,是眼內(nèi)的惡性腫瘤,嚴(yán)重?fù)p害患兒的視力并對(duì)生命健康產(chǎn)生威脅[4]。PTEN基因具有脂質(zhì)磷酸酶及蛋白磷酸酶活性,是一種多功能的蛋白質(zhì),自從被報(bào)道后一直為臨床研究的熱點(diǎn)[5]。PTEN是一種抑癌基因,對(duì)正常細(xì)胞具有促進(jìn)生長(zhǎng)的作用,同時(shí)抑制其異常增殖、分裂及凋亡。在很多癌癥細(xì)胞中,PTEN均有著較低的表達(dá)率。因此,PTEN可以成為評(píng)價(jià)眾多惡性腫瘤預(yù)后的指標(biāo),對(duì)其作用機(jī)制進(jìn)行研究有助于診斷癌癥及進(jìn)行基因治療。Survivin基因具有調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的作用,僅在胚胎組織及腫瘤組織中表達(dá),其在癌癥細(xì)胞浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移及分化增殖中具有重要意義。另外,在內(nèi)源性及外源性細(xì)胞的凋亡過程中也有survivin的參與。目前尚不能明確腫瘤分子中survivin的作用機(jī)制,但是如果survivin在腫瘤細(xì)胞中表達(dá)過度,則預(yù)示著不良的預(yù)后。臨床上通過對(duì)患者放療及化療,能夠在一定程度上控制survivin的表達(dá)。本研究結(jié)果顯示,PTEN在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為53.3%,明顯低于其在正常視網(wǎng)膜組織中的表達(dá)率;Survivin在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中的陽(yáng)性表達(dá)率為60.0%,而在正常視網(wǎng)膜組織中無表達(dá)。

        綜上所述,抑癌基因及致癌基因所產(chǎn)生的抑癌及致癌作用,并不僅僅是某個(gè)或者某幾個(gè)基因參與,均是共同作用產(chǎn)生的結(jié)果。PTEN和survivin在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中的異常表達(dá)是視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的發(fā)病機(jī)制之一,明確兩種基因在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤組織中的具體表達(dá)機(jī)制對(duì)于視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的診治具有重要意義[6]。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,可以從分子基因角度對(duì)臨床上難治疾病進(jìn)行診療,由于PTEN對(duì)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤具有抑制作用,而survivin對(duì)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤可能產(chǎn)生了一定的促進(jìn)作用,因此應(yīng)用分子靶細(xì)胞藥物激活PTNE基因同時(shí)抑制survivin基因,對(duì)于治愈視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤具有指導(dǎo)意義。

        [1] 吳子旭,郭曉銘,姚 宏,等.PTEN和Survivin在視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中的表達(dá)和意義[J].中國(guó)藥物與臨床,2010,10(6):1645-1647.

        [2] 李 雁,張軍軍.視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤發(fā)病機(jī)制的分子生物學(xué)研究回顧與進(jìn)展[J].國(guó)際眼科雜志,2010,10(4):703-705.

        [3] Dimaras H,Dimba E A,Gallic B L.Challenging the global retinoblastoma survival disparity through a collaborative research effort[J].Br J Ophthalmol,2010,94(11):1415-1416.

        [4] 喬麗珊,方 嚴(yán).視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的臨床特點(diǎn)和治療分析[J].臨床眼科雜志,2007,15(3):239-241.

        [5] 苗麗霞,李 明,王亞峰,等.CIK細(xì)胞聯(lián)合化療治療兒童中晚期視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的安全性及初步療效觀察[J].武警醫(yī)學(xué),2012,23(11):135-137.

        [6] 趙水喜,曹京旭,王迎選.視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的外照射放療[J].武警醫(yī)學(xué),2012,23(10):768-769.

        (2013-02-27收稿 2013-09-12修回)

        (責(zé)任編輯 尤偉杰)

        ExpressionsandclinicalsignificanceofPTENandsurvivininretinoblastomatissues

        HUANG Haidong,LI Liyang,GUO Ying,ZHAO Xing,KANG Jingjia,and GUAN Di.
        Department of Ophthalmology, Liaoning Provinial Corps Hospital, Chinese People’s Armed Police Forces. Shenyang 110034,China

        ObjectiveTo study the expressions and clinical significance of PTEN and survivin in retinoblastoma tissues.MethodsRetinoblastoma tissue sections from 30 patients were selected as observation group, 30 healthy retinal tissue sections were selected as control group. Immunohistochemical method was used to detect the PTEN and survivin expressions, Expressions of PTEN and survivin were compared between the two groups, and their clinical significance was discussed.ResultsIn the observation group, PTEN-positive expression rate was 53.3%;in the control group,the total positive expression rate of PTEN was 100%. In the observation group,the total positive expression rate of survivin was 60%;in the control group,the total positive expression rate of survivin was 0%;the difference between the two groups was significant(P<0.05).ConclusionsIn retinoblastoma tissues, the survivin-positive expression was significantly increased and PTEN-positive expression was significantly reduced.

        PTEN; survivin; retinoblastoma; expressions

        黃海東,本科學(xué)歷,主治醫(yī)師,E-mail: hhd91980@sina.com

        110034沈陽(yáng),武警遼寧總隊(duì)醫(yī)院眼科

        R774.1

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