摘 要:目的:為了測定山茶油中的4類功能性組分的含量。方法:采用分光光度法測定茶皂素、茶多酚的含量,氣相色譜法測定角鯊烯和維生素E的含量。結果:試驗結果表明橄欖油包含的角鯊烯和茶皂素最多,分別為540.03mg/100g和12.26mg/g;山茶油A和山茶油B包含茶多酚最多,分別為41.21μg/g和41.63μg/g,山茶油B包含的維生素E最多,為23.93mg/100g。結論:綜合比較得知山茶油茶多酚含量最高。
關鍵詞:山茶油;功能性成分;測定
油茶籽油具有預防心腦血管疾病、抗氧化和清除自由基等功效,茶皂素是一種天然非離子型表面活性劑,廣泛應用于洗滌、毛紡、針織、醫(yī)藥、日用化工等領域,多酚類物質是油脂主要的天然抗氧化劑,角鯊烯和維生素E均可以抑制脂質過氧化,增加機體免疫功能,預防和治療心血管疾病。
1 方法與材料
1.1 試劑與材料
沒食子酸、維生素E、角鯊烯、茶皂素、正二十六烷標準品,香草醛,福林酚。實驗中選用2種產地不同的山茶油作為分析材料,名稱分別為山茶油A和山茶油B,同時與優(yōu)質的橄欖油和花生油相比較。
1.2 設備與儀器
日本生產的GC-2014型氣相色譜儀;TU-1810SPC紫外可見分光光度計;HH-S數顯恒溫水浴鍋;旋轉蒸發(fā)儀。
1.3 實驗方法
1.3.1 茶多酚的含量測定
(1)沒食子酸標準曲線的制備。準確稱取0.05g的沒食子酸標準品,置于100mL的容量瓶中,加水定容。分別吸取沒食子酸標準溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于10mL的容量瓶中,加水至10mL,混勻,配成濃度不同的標準溶液。分別取1.0mL到50mL的容量瓶中。先加20mL的水,再加3mL的福林酚試劑,搖勻,在8min時間內加入12mL10%的Na2CO3溶液,加水定容,混勻。在30℃的溫度下避光放置2小時,以空白液作參比,在765nm下測定吸光度,繪制標準曲線。
(2)茶多酚的測定。分別稱取四種植物油樣品10g,置于250mL的錐形瓶中,加140mL的甲醇,在65℃溫度下冷凝回流提取90分鐘,取出,放置到室溫,用正己烷萃取,直至淺黃色或無色,提取液轉移至50mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度。按上述方法測定吸光度,并與標準曲線相比較,計算茶多酚的含量。
1.3.2 茶皂素的含量測定
(1)茶皂素標準曲線的制備。準確稱取茶皂素標準品0.9400g,加80%乙醇溶解定容到100mL,搖勻。分別吸取茶皂素標準溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL于10mL容量瓶中,加水定容,搖勻,配成不同濃度的標準溶液。依次取0.5mL置于10mL的冰浴的具塞試管中,再依次添加0.5mL的濃度為8%的香草醛溶液和77%的硫酸溶液5mL,充分搖勻。在60℃的水浴中加熱,顯色20分鐘后,置于冰浴中冷卻10分鐘,取出,放置到室溫,以空白液作參比,在545nm處測量吸光度,繪制標準曲線。
(2)茶皂素的測定。分別稱取四種植物油樣品5.000g置于100mL燒瓶中,加入50mL70%的乙醇溶液,于80℃回流提取2小時,提取液旋轉蒸發(fā)濃縮至粘稠狀,加入20mL水溶解,再加入正丁醇溶液,于分液漏斗中等體積萃取3次。合并正丁醇萃取液,濃縮至干,用70%的乙醇溶液定容至100mL,搖勻備用。按上述方法測定吸光度,并與標準曲線相比較,計算茶皂素的含量。
1.3.3 角鯊烯、維生素E的含量測定
(1)校正因子的測定。配制1.0mg/mL正二十六烷標準溶液和0.8mg/mL的角鯊烯、維生素E標準溶液。準確吸取角鯊烯和維生素E標準溶液各0.125、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL置于10mL容量瓶中,分別加入1mL內標標準溶液,用正己烷定容,按照下面的條件進行氣相色譜分析,根據樣品濃度與樣品和峰面積之比計算校正因子。色譜柱:KB-5MS毛細管柱(30m×0.32mm×0.25μm);程序升溫:200,1min℃→5/min℃→280,10℃;進樣方式:分流進樣,分流比為10:1;進樣量:1μL。
(2)維生素E和角鯊烯的測定。分別稱取四種植物油樣品1.000g,加入0.5mL正二十六烷標準溶液,用正己烷定容至5mL,搖勻備用。按上述的方法進行氣相色譜分析,計算各組分與內標物峰面積之比,計算樣品中角鯊烯和維生素E含量。
2 結果分析與討論
測定結果如下表:
樣品名稱 茶多酚(μg/g) 茶皂素(mg/g) 維生素 E(mg/100g) 角鯊烯(mg/100g)
山茶油A 41.21±2.15 3.85±0.40 17.41±3.87 10.10±0.94
山茶油B 41.63±2.05 3.70±0.21 23.93±4.37 0
一級壓榨花生油 24.30±1.52 8.84±0.90 22.52±3.41 29.48±2.19
特級初榨橄欖油 24.56±0.87 12.26±0.80 29.48±2.19 540.03±0.26
四種植物油中茶多酚、茶皂素、維生素E、角鯊烯測定結果(n=3)
結果表明四種植物油中的茶多酚含量都比茶皂素含量低很多,而維生素E含量差距較小,特級初榨橄欖油中角鯊烯含量最高。與其他油樣相比,山茶油中茶多酚的含量最高。實驗所用山茶油A和山茶油B均來自油茶籽,但二者功能性成分差異較大,山茶油B的維生素E含量比山茶油A的高,并且未測出角鯊烯,這可能與山茶油產地或加工方式有關。這些研究結果對山茶油的進一步開發(fā)和利用具有重要的指導作用。
參考文獻:
[1]姚東等.油茶資源與科學利用研究[J].科學出版社,2012(01):12-23.
[2]鐘彬.油茶籽油中角鯊烯含量的氣相色譜法測定[J].分析試驗室,2011(01):14-16.
[3]王偉.山茶油中成分含量的測定[J].科學出版社,2012(02):1-5.
作者簡介:羅月紅(1967-),女,廣東清遠人,本科,講師、實驗師。