王秀艷　白秀云

摘要：試驗(yàn)以蒸餾水為對(duì)照，采用搖床培養(yǎng)方法研究了乙烯利、煙酸單施對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中菌絲體及胞外多糖產(chǎn)量的影響，以確定其最佳施用量。結(jié)果表明，適量的乙烯利、煙酸單獨(dú)施用均可促進(jìn)雞腿菇菌絲的生長(zhǎng)，同時(shí)還能提高其胞外多糖得率。雞腿菇液體培養(yǎng)中乙烯利最適施用量為1.5 mg/L、煙酸最適施用量為8 mg/L。適量的乙烯利、煙酸單施均能提高雞腿菇菌絲體干重和胞外多糖得率。

關(guān)鍵詞： 乙烯利；煙酸；雞腿菇（Coprinus comatus）；搖床培養(yǎng)；菌絲體；胞外多糖

中圖分類號(hào)：S646.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2014）06-1349-03

Effects of Ethephon and Nicotinic Acid on Mycelium and Polysaccharide Yield in Coprinus comatus of Liquid Culture

WANG Xiu-yan，BAI Xiu-yun

（Department of Life Sciences， Chifeng College， Chifeng 024000， Inner Mongolia ，China）

Abstract： Using distilled water as contrast， the influences of ethephon and nicotinic acid on mycelium and extracellular polysaccharide of Coprinus comatus were studied. The results showed that proper concentrations of ethephon and nicotinic acid promoted the growth of Coprinus comatus mycelium and increased polysaccharide yield. The appropriate concentration of ethephon and nicotinic acid was 1.5 mg/L was and 8 mg/L， respectively.

Key words： Ethephon； nicotinic acid； Coprinus comatus； shaking cultivation； mycelium； polysaccharide

雞腿菇（Coprinus comatus）又名毛頭鬼傘、刺蘑菇等，是一種形似雞腿、食藥兼用的大型傘菌。其肉質(zhì)肥厚細(xì)嫩、滑脆可口，味道鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富。據(jù)分析其干品中含豐富的粗蛋白質(zhì)、脂肪、總糖等營(yíng)養(yǎng)成分[1]。蛋白質(zhì)中富含20多種氨基酸，其中有8種人體必需氨基酸[2]。同時(shí)，雞腿菇還是一種藥用菌，味甘滑、性平，有益脾胃、助消化、清心安神、治療痔瘡、糖尿病、抗腫瘤、降血壓、減少血液中膽固醇的功效，經(jīng)常食用能有效預(yù)防心腦血管硬化及肥胖癥，增強(qiáng)人體抗病能力，有助于人們達(dá)到延年益壽的目的[3]。

乙烯利是一種優(yōu)質(zhì)高效的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，具有促進(jìn)植物細(xì)胞生長(zhǎng)、調(diào)節(jié)性別轉(zhuǎn)化尤其是刺激雌花產(chǎn)生、促進(jìn)果實(shí)成熟等功效，在農(nóng)作物及蔬菜生產(chǎn)上應(yīng)用非常廣泛，但在食用菌液體培養(yǎng)中應(yīng)用較少；煙酸，也稱作維生素B3，屬于B族維生素，在人體內(nèi)與碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂肪的代謝過(guò)程密切相關(guān)。據(jù)研究B族維生素有刺激食用菌菌絲生長(zhǎng)的功效，但是在雞腿菇液體培養(yǎng)中鮮有應(yīng)用。因此，筆者總結(jié)了前人的研究成果，設(shè)置不同濃度的乙烯利和煙酸單獨(dú)施用于雞腿菇液體培養(yǎng)中，檢測(cè)兩者的應(yīng)用效果，確定乙烯利、煙酸的最佳施用量，以期為雞腿菇液體菌種工業(yè)化生產(chǎn)及深層次開(kāi)發(fā)利用奠定良好的基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)菌種

雞腿菇CC900（江蘇省天達(dá)食用菌研究所提供）。

1.2 試驗(yàn)用培養(yǎng)基

1）綜合馬鈴薯培養(yǎng)基：20%馬鈴薯煮汁1 000 mL，葡萄糖20 g，MgSO4 1.5 g，KH2PO4 3 g，瓊脂18 g。

2）基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基：20%馬鈴薯煮汁1 000 mL，葡萄糖20 g，MgSO4 1.5 g，KH2PO4 3 g。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 雞腿菇二級(jí)母種的擴(kuò)大繁殖 在超凈工作臺(tái)或接種箱內(nèi)鏟取一塊約0.5 cm2的雞腿菇母種接到綜合馬鈴薯培養(yǎng)基斜面的中央，然后將接入菌塊的試管在26 ℃、無(wú)光、空氣對(duì)流緩慢的條件下培養(yǎng)14～16 d，菌絲滿管即得到雞腿菇二級(jí)母種。

1.3.2 雞腿菇液體種子液的制備 取250 mL錐形瓶10個(gè)，每瓶裝入100 mL的基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基，在超凈工作臺(tái)或接種箱內(nèi)接入一塊約1 cm2的雞腿菇二級(jí)母種，在26 ℃、無(wú)光條件下靜置培養(yǎng)48 h，然后在26 ℃、無(wú)光、160 r∕min的條件下振蕩培養(yǎng)6 d，得到液體澄清、小菌絲球均勻且有淡淡菇香的雞腿菇液體種子液。

1.3.3 用不同濃度的乙烯利處理雞腿菇液體菌種 ①取250 mL錐形瓶24個(gè)，每瓶裝入100 mL的基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基，然后平均分為6組。②以不加乙烯利的基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基作為對(duì)照組，其余5組分別加入不同濃度（0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L）的乙烯利，每組4個(gè)重復(fù)，在1.47×105 Pa壓力下滅菌30 min。③待液體培養(yǎng)基冷卻至26 ℃以下，向每個(gè)錐形瓶中加入10 mL的雞腿菇液體種子液后放入恒溫?fù)u床，在26 ℃、無(wú)光、160 r/min的條件下連續(xù)培養(yǎng)5 d，待大部分液體菌種成熟后停止培養(yǎng)。④將液體菌種過(guò)濾，菌絲在60 ℃下烘干并測(cè)重；濾液用苯酚—硫酸法[4]測(cè)定其多糖含量。

1.3.4 用不同濃度的煙酸處理雞腿菇液體菌種 分組方法同“1.3.3”，以不加煙酸的基礎(chǔ)液體培養(yǎng)基作為對(duì)照組，另5組分別加入不同濃度（2、5、8、12、15 mg/L）的煙酸[5]。其他處理方法同“1.3.3”。

1.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel軟件處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 施用乙烯利對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中菌絲體和胞外多糖產(chǎn)量的影響[6]

2.1.1 施用乙烯利對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中菌絲體產(chǎn)量的影響 由表1、圖1可以看出，乙烯利在一定濃度范圍內(nèi)能有效地促進(jìn)雞腿菇菌絲的生長(zhǎng)，其中經(jīng)1.5 mg/L處理的效果最佳，其菌絲體干重得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了極顯著水平，比對(duì)照增加了65.58%；經(jīng)1.0、2.0 mg/L處理的效果也較好，其菌絲體干重得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了顯著水平，分別比對(duì)照增加了31.45%、37.54%。

2.1.2 施用乙烯利對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中胞外多糖產(chǎn)量的影響 由表2、圖2可以看出，乙烯利在一定濃度范圍內(nèi)能有效地提高雞腿菇胞外多糖得率，其中經(jīng)1.5 mg/L處理的效果最佳，其胞外多糖得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了極顯著水平，比對(duì)照增加了123.47%；經(jīng)1.0、2.0 mg/L處理的效果也較好，其胞外多糖得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了顯著水平，分別比對(duì)照增加了63.63%、102.92%。

2.2 施用煙酸對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中菌絲體和胞外多糖產(chǎn)量的影響

2.2.1 施用煙酸對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中菌絲體產(chǎn)量的影響 由表3、圖3可以看出，煙酸在一定濃度范圍內(nèi)能很好地促進(jìn)雞腿菇菌絲的生長(zhǎng)，其中經(jīng)8 mg/L處理的效果最佳，其菌絲體干重得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了極顯著水平，比對(duì)照增加了154.24%；經(jīng)5、12 mg/L處理的效果也較好，其菌絲體干重得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了顯著水平，分別比對(duì)照增加了107.38%、116.49%。

2.2.2 施用煙酸對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中胞外多糖產(chǎn)量的影響 由表4、圖4可以看出，煙酸在一定濃度范圍內(nèi)能有效地提高雞腿菇胞外多糖得率，其中經(jīng)8 mg/L處理的效果最好， 其胞外多糖得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了極顯著水平，比對(duì)照增加了92.93%；經(jīng)5、12 mg/L處理的效果也較好，其胞外多糖得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了顯著水平，分別比對(duì)照增加了71.87%、56.34%。

3 結(jié)論

在雞腿菇液體培養(yǎng)中單獨(dú)施用乙烯利和煙酸，均能有效地促進(jìn)雞腿菇菌絲的生長(zhǎng)，顯著提高菌絲體干重和胞外多糖產(chǎn)量。雞腿菇液體培養(yǎng)中乙烯利最佳施用量為1.5 mg/L，煙酸最佳施用量為8 mg/L。

參考文獻(xiàn)：

[1] 崔頌英，馬 蘭，駱玉岐.食用菌生產(chǎn)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2011.

[2] 王桂芹，王秀艷.食用菌栽培[M].內(nèi)蒙古赤峰：內(nèi)蒙古科學(xué)技術(shù)出版社，2001.

[3] 劉振祥，張 勝.食用菌栽培技術(shù)[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2007.

[4] 徐志祥，李 剛，李寶健.苯酚硫酸法測(cè)定靈芝多糖含量條件的研究[J].食用菌，2000（3）：7-8.

[5] 李春喜，邵 云，姜麗娜.生物統(tǒng)計(jì)學(xué)[M].北京：科學(xué)出版社，2008.

[6] 豐 碩.夏秋黃瓜噴施乙烯利可增產(chǎn)[J].農(nóng)村財(cái)務(wù)會(huì)計(jì)，2001（4）：16-17.

1.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel軟件處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 施用乙烯利對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中菌絲體和胞外多糖產(chǎn)量的影響[6]

2.1.1 施用乙烯利對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中菌絲體產(chǎn)量的影響 由表1、圖1可以看出，乙烯利在一定濃度范圍內(nèi)能有效地促進(jìn)雞腿菇菌絲的生長(zhǎng)，其中經(jīng)1.5 mg/L處理的效果最佳，其菌絲體干重得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了極顯著水平，比對(duì)照增加了65.58%；經(jīng)1.0、2.0 mg/L處理的效果也較好，其菌絲體干重得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了顯著水平，分別比對(duì)照增加了31.45%、37.54%。

2.1.2 施用乙烯利對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中胞外多糖產(chǎn)量的影響 由表2、圖2可以看出，乙烯利在一定濃度范圍內(nèi)能有效地提高雞腿菇胞外多糖得率，其中經(jīng)1.5 mg/L處理的效果最佳，其胞外多糖得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了極顯著水平，比對(duì)照增加了123.47%；經(jīng)1.0、2.0 mg/L處理的效果也較好，其胞外多糖得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了顯著水平，分別比對(duì)照增加了63.63%、102.92%。

2.2 施用煙酸對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中菌絲體和胞外多糖產(chǎn)量的影響

2.2.1 施用煙酸對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中菌絲體產(chǎn)量的影響 由表3、圖3可以看出，煙酸在一定濃度范圍內(nèi)能很好地促進(jìn)雞腿菇菌絲的生長(zhǎng)，其中經(jīng)8 mg/L處理的效果最佳，其菌絲體干重得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了極顯著水平，比對(duì)照增加了154.24%；經(jīng)5、12 mg/L處理的效果也較好，其菌絲體干重得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了顯著水平，分別比對(duì)照增加了107.38%、116.49%。

2.2.2 施用煙酸對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中胞外多糖產(chǎn)量的影響 由表4、圖4可以看出，煙酸在一定濃度范圍內(nèi)能有效地提高雞腿菇胞外多糖得率，其中經(jīng)8 mg/L處理的效果最好， 其胞外多糖得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了極顯著水平，比對(duì)照增加了92.93%；經(jīng)5、12 mg/L處理的效果也較好，其胞外多糖得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了顯著水平，分別比對(duì)照增加了71.87%、56.34%。

3 結(jié)論

在雞腿菇液體培養(yǎng)中單獨(dú)施用乙烯利和煙酸，均能有效地促進(jìn)雞腿菇菌絲的生長(zhǎng)，顯著提高菌絲體干重和胞外多糖產(chǎn)量。雞腿菇液體培養(yǎng)中乙烯利最佳施用量為1.5 mg/L，煙酸最佳施用量為8 mg/L。

參考文獻(xiàn)：

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[6] 豐 碩.夏秋黃瓜噴施乙烯利可增產(chǎn)[J].農(nóng)村財(cái)務(wù)會(huì)計(jì)，2001（4）：16-17.

1.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel軟件處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 施用乙烯利對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中菌絲體和胞外多糖產(chǎn)量的影響[6]

2.1.1 施用乙烯利對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中菌絲體產(chǎn)量的影響 由表1、圖1可以看出，乙烯利在一定濃度范圍內(nèi)能有效地促進(jìn)雞腿菇菌絲的生長(zhǎng)，其中經(jīng)1.5 mg/L處理的效果最佳，其菌絲體干重得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了極顯著水平，比對(duì)照增加了65.58%；經(jīng)1.0、2.0 mg/L處理的效果也較好，其菌絲體干重得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了顯著水平，分別比對(duì)照增加了31.45%、37.54%。

2.1.2 施用乙烯利對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中胞外多糖產(chǎn)量的影響 由表2、圖2可以看出，乙烯利在一定濃度范圍內(nèi)能有效地提高雞腿菇胞外多糖得率，其中經(jīng)1.5 mg/L處理的效果最佳，其胞外多糖得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了極顯著水平，比對(duì)照增加了123.47%；經(jīng)1.0、2.0 mg/L處理的效果也較好，其胞外多糖得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了顯著水平，分別比對(duì)照增加了63.63%、102.92%。

2.2 施用煙酸對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中菌絲體和胞外多糖產(chǎn)量的影響

2.2.1 施用煙酸對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中菌絲體產(chǎn)量的影響 由表3、圖3可以看出，煙酸在一定濃度范圍內(nèi)能很好地促進(jìn)雞腿菇菌絲的生長(zhǎng)，其中經(jīng)8 mg/L處理的效果最佳，其菌絲體干重得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了極顯著水平，比對(duì)照增加了154.24%；經(jīng)5、12 mg/L處理的效果也較好，其菌絲體干重得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了顯著水平，分別比對(duì)照增加了107.38%、116.49%。

2.2.2 施用煙酸對(duì)雞腿菇液體培養(yǎng)中胞外多糖產(chǎn)量的影響 由表4、圖4可以看出，煙酸在一定濃度范圍內(nèi)能有效地提高雞腿菇胞外多糖得率，其中經(jīng)8 mg/L處理的效果最好， 其胞外多糖得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了極顯著水平，比對(duì)照增加了92.93%；經(jīng)5、12 mg/L處理的效果也較好，其胞外多糖得率與對(duì)照相比差異達(dá)到了顯著水平，分別比對(duì)照增加了71.87%、56.34%。

3 結(jié)論

在雞腿菇液體培養(yǎng)中單獨(dú)施用乙烯利和煙酸，均能有效地促進(jìn)雞腿菇菌絲的生長(zhǎng)，顯著提高菌絲體干重和胞外多糖產(chǎn)量。雞腿菇液體培養(yǎng)中乙烯利最佳施用量為1.5 mg/L，煙酸最佳施用量為8 mg/L。

參考文獻(xiàn)：

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[5] 李春喜，邵 云，姜麗娜.生物統(tǒng)計(jì)學(xué)[M].北京：科學(xué)出版社，2008.

[6] 豐 碩.夏秋黃瓜噴施乙烯利可增產(chǎn)[J].農(nóng)村財(cái)務(wù)會(huì)計(jì)，2001（4）：16-17.