崔 炯，鄧金秀，萬建新

·論著·

血管內(nèi)皮生長因子基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)慢性腎衰竭大鼠血管新生的影響

崔 炯，鄧金秀，萬建新

目的 探討血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs)對(duì)慢性腎衰竭(chronic renal failure，CRF)大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)和血管新生的影響。方法 體外分離、培養(yǎng)大鼠MSCs，Ad5-hVEGF-EGFP轉(zhuǎn)染MSCs并觀察轉(zhuǎn)染對(duì)細(xì)胞增殖，分泌VEGF的影響。50只雄性SD大鼠按數(shù)字表法隨機(jī)分為假手術(shù)組、慢性腎衰竭組、MSCs移植組、Ad-VEGF注射組和VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs移植組，每組10只。采用分階段5/6腎切除術(shù)制備大鼠慢性腎衰竭動(dòng)物模型。假手術(shù)組與慢性腎衰竭組于切除右腎之前從該側(cè)腎動(dòng)脈注射不含血清的改良杜氏伊格爾(DMEM)培養(yǎng)液，其余3組分別給予MSCs，Ad-VEGF和VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs。8周后檢測各組大鼠腎功能，并用免疫組化檢測腎小球CD31表達(dá)情況。結(jié)果 Ad5-hVEGF-EGFP轉(zhuǎn)染后對(duì)MSCs細(xì)胞增殖無影響，轉(zhuǎn)染后分泌VEGF蛋白較空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組明顯增加(P＜0.05)。MSCs移植組和VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs移植組血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)均較慢性腎衰竭組降低(P＜0.05);與MSCs移植組比較，VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs移植組Scr和BUN降低更顯著(P＜0.05)。慢性腎衰竭組腎小球中CD31表達(dá)較假手術(shù)組顯著降低(P＜0.05)，應(yīng)用MSCs和VEGF165基因轉(zhuǎn)染的MSCs干預(yù)后腎小球中CD31表達(dá)有所增加，VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs組增加更明顯(P＜0.05)。結(jié)論 慢性腎衰竭大鼠給予轉(zhuǎn)染VEGF基因的MSCs移植后毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量增多，腎臟功能改善;其作用可能與基因轉(zhuǎn)染增加VEGF表達(dá)及有利于腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮修復(fù)、血管新生有關(guān)。

血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;慢性腎衰竭;大鼠;血管新生

腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)的毀損及后續(xù)的血管新生修復(fù)反應(yīng)不全，是慢性進(jìn)展性腎臟病的顯著特征，并將導(dǎo)致腎小球硬化的發(fā)生［1］。國外研究表明，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs)能促進(jìn)腎臟血管新生和內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)［2］。Okuyama等［3］的研究認(rèn)為MSCs在轉(zhuǎn)化為血管內(nèi)皮樣細(xì)胞的過程中局部血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的刺激起了重要作用。由于VEGF生物半衰期短，注入體內(nèi)易稀釋，故外源給予VEGF蛋白誘導(dǎo)分化效力有限，而基因治療有望克服此缺陷。MSCs可接受多種載體的基因轉(zhuǎn)染并在體內(nèi)分化后保持良好的遺傳穩(wěn)定性，細(xì)胞治療結(jié)合基因治療已證實(shí)對(duì)多種動(dòng)物模型有效促進(jìn)血管再生作用，但對(duì)慢性腎衰竭(chronic renal failure，CRF)大鼠的影響尚未有研究報(bào)道。本研究在體外構(gòu)建重組VEGF腺病毒質(zhì)粒轉(zhuǎn)染MSCs并經(jīng)腎動(dòng)脈移植，探討對(duì)慢性腎衰竭大鼠腎功能和腎小球內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)和血管新生的影響，旨在為慢性腎衰竭的治療提供新思路。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和分組

3周齡雄性清潔級(jí)SD大鼠50只，用于MSC的分離及培養(yǎng)(由吳氏實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，體質(zhì)量50～100 g。8周齡雄性清潔級(jí)SD大鼠50只(由吳氏實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，體質(zhì)量150～200 g，按數(shù)字表法隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為:假手術(shù)組(組Ⅰ)、慢性腎衰竭組(組Ⅱ)、MSCs移植組(組Ⅲ)、Ad-VEGF注射組(組Ⅳ)和VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs移植組(組Ⅴ)。

1.2 藥品與試劑

Ad5-hVEGF-EGFP(北京本元正陽基因技術(shù)有限公司)、胎牛血清(Gibco，USA)、DMEM/F12培養(yǎng)液(Gibco，USA)、CD 31單克隆抗體(Abcam，英國)、抗大鼠VEGF(Abcam，英國)、大鼠VEGF ELISA試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司，中國)。

1.3 方法

1.3.1 MSC的分離、培養(yǎng)與VEGF基因轉(zhuǎn)染 3周齡雄性SD大鼠(由吳氏實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，體質(zhì)量50～100 g。頸椎脫臼法處死大鼠，獲得其長骨骨髓液，1 500×g離心5min，棄上清，用15%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。轉(zhuǎn)移至25 cm2的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，放37℃、5%CO2，飽和濕度的培養(yǎng)箱中孵育，長至80%～90%融合時(shí)用0.125%胰酶消化l:3傳代細(xì)胞。取生長狀態(tài)良好的3代MSCs，融合至60%，用無血清DMEM/F12培養(yǎng)基饑餓12 h后換成15%胎牛血清的DMEM/F12，同時(shí)按照細(xì)胞與Ad-hVEGF-EGFP質(zhì)粒=1∶100進(jìn)行共培養(yǎng)，24、48和72 h熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染率。

1.3.2 噻唑藍(lán)(MTT)法檢測細(xì)胞的增殖 取對(duì)數(shù)生長期的MSCs按每孔104個(gè)細(xì)胞/ml接種于96孔板，用15%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)液37℃，5%CO2孵育，細(xì)胞長至60%～70%融合后，按照前述方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染，濃度設(shè)6個(gè)復(fù)孔。轉(zhuǎn)染成功后每個(gè)孔加入10μl新鮮配制的MTT溶液(5 mg/ ml)，孵育4 h。吸去培養(yǎng)液，每孔加入100μl二甲基亞砜，振蕩5 min后，490 nm處讀取光密度(OD)值。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。同時(shí)設(shè)置空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組作為對(duì)照。

1.3.3 細(xì)胞上清的收集及外分泌VEGF的ELISA法檢測 轉(zhuǎn)染后第4、7、10、14天收集上清并保存于－70℃待檢，酶標(biāo)儀測各組VEGF蛋白濃度。

1.3.4 動(dòng)物模型制備及分組干預(yù) 采用分階段5/6腎切除制備大鼠慢性腎衰竭模型:10%水合氯醛腹腔麻醉后，經(jīng)側(cè)腹部切口，暴露左側(cè)腎臟，分離腎動(dòng)脈及其分支，結(jié)扎其中的左上支和中支并剪斷，使左腎梗死約2/3，3 d后再將大鼠右腎摘除。假手術(shù)組僅分離腎動(dòng)脈及其分支，不予結(jié)扎，3 d后同期手術(shù)，但僅剝離右腎包膜暴露腎臟后關(guān)腹。長至90%的Ad-VEGF-GFP的 MSCs用0.125%胰酶消化，并對(duì)其進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，用無血清的DMEM/F12重懸細(xì)胞至1×106個(gè)/m l。VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs移植組注入1×106個(gè)MSCs/Ad-VEGF，MSCs移植組注入1×106個(gè)MSCs，Ad-VEGF組注入VEGF基因質(zhì)粒，假手術(shù)組與慢性腎衰竭組注入不含血清的DMEM培養(yǎng)液。均于切除右腎之前從該側(cè)腎動(dòng)脈注射，注射量1 ml。所有大鼠均于造模后8周處死。

1.3.5 大鼠腎功能檢測 處死大鼠時(shí)經(jīng)心臟取血2 ml，用全自動(dòng)生化分析儀測定血尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)、血清肌酐(serum creatinine，Scr)。

1.3.6 免疫組織化學(xué)及半定量檢測CD31表達(dá)2μm的石蠟切片，常規(guī)二甲苯脫蠟和梯度乙醇水化，滴加3%H2O2去離子水孵育10 min，阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，PBS沖洗，加入適當(dāng)比例稀釋的一抗50μl，37℃孵育1 h，加入二抗，37℃孵育30 min，PBS沖洗，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色。鏡下觀察染色情況，蒸餾水及時(shí)終止反應(yīng)，自來水沖洗5 min;蘇木素淡染細(xì)胞核，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。陽性反應(yīng)物部位呈棕色，細(xì)胞核呈淡藍(lán)色。在400倍的顯微鏡視野下，每張切片于皮髓質(zhì)交界處隨機(jī)取5個(gè)不重復(fù)視野的腎小球，由攝像系統(tǒng)提取數(shù)據(jù)化病理圖象，輸入圖像分析系統(tǒng)Motic Images Advanced進(jìn)行光密度(OD)值計(jì)算，取平均OD值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，多組間比較經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)再進(jìn)行方差分析，組間兩兩比較采用LSD法。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

8周顯示造模成功，表現(xiàn)為慢性腎衰竭組BUN、Scr較假手術(shù)組明顯升高，病理示腎小球毛細(xì)血管塌陷，腎小管上皮細(xì)胞空泡變性、腫脹及脫落。成功率100%。

2.1 MSCs形態(tài)特征

大鼠MSCs在24 h就可以見到細(xì)胞貼壁，隨著時(shí)間的推移細(xì)胞呈梭形，三角形，最后成片狀，4 d后可以鋪滿瓶底，傳代之后細(xì)胞呈長梭形或者纖維狀，細(xì)胞折光性增強(qiáng)。

2.2 VEGF基因轉(zhuǎn)染

將攜帶綠熒光蛋白的Ad5-hVEGF-EGFP按細(xì)胞:Ad5-hVEGF-EGFP為 1∶100轉(zhuǎn)染 3～5代的MSCs。轉(zhuǎn)染24 h后在熒光顯微鏡下觀察，見少量MSCs出現(xiàn)綠色熒光;轉(zhuǎn)染3d后MSCs基本全部表達(dá)綠熒光蛋白，顯示轉(zhuǎn)染效率較高。見圖1。

圖1 VEGF基因轉(zhuǎn)染MSCs(DAB染色 ×100)

2.3 轉(zhuǎn)染對(duì)MSCs活性的影響

轉(zhuǎn)染對(duì)細(xì)胞增殖沒有明顯影響，見圖2。

圖2 MTT法檢測轉(zhuǎn)染對(duì)細(xì)胞活性的影響

2.4 細(xì)胞上清VEGF的表達(dá)

VEGF基因轉(zhuǎn)染組表達(dá)明顯高于空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，隨培養(yǎng)時(shí)間的延長量漸升高，4～7 d至高峰，后逐漸降低。見圖3。

圖3 轉(zhuǎn)染后上清中VEGF的累積濃度

2.5 各組腎功能的變化

于5/6腎大部切除術(shù)后8周檢測各組大鼠腎功能，結(jié)果顯示慢性腎衰竭組Scr和BUN均較假手術(shù)組增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與慢性腎衰竭組比較，注射MSCs和VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs干預(yù)后Scr和BUN均較慢性腎衰竭組降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，單純Ad-VEGF干預(yù)組未顯示降低，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與MSCs組比較，VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs移植組Scr和BUN降低更顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 VEGF基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)慢性腎衰竭大鼠腎功能的影響(±s)

表1 VEGF基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)慢性腎衰竭大鼠腎功能的影響(±s)

注:與假手術(shù)組比較aP＜0.05;與慢性腎衰組比較bP＜0.05;與MSCs移植組比較cP＜0.05。VEGF為血管內(nèi)皮生長因子，MSCs為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

組別 鼠數(shù) 肌酐(μmol/L) 尿素(mmol/L) 10 15.65±0.41 5.37±0.78慢性腎衰竭組 10 110.23±23.35a18.24±2.14aMSCs移植組 10 78.56±16.22ab14.77±2.06abAd-VEGF注射組 10 107.17±18.57a18.54±3.57aVEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs移植組 10 64.37±9.56abc11.43±2.95假手術(shù)組abc

2.6 各組腎小球CD31表達(dá)

慢性腎衰竭組腎小球中CD31表達(dá)較假手術(shù)組顯著減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，應(yīng)用MSCs和VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs干預(yù)后腎小球中CD31表達(dá)有所增加，VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs組增加更為明顯(P＜0.05)。而單純Ad-VEGF干預(yù)組未顯示出明顯增加(圖4)。半定量分析計(jì)算的IOD值(圖5)。

3 討論

腎臟內(nèi)皮功能紊亂、內(nèi)皮細(xì)胞凋亡增加、微血管網(wǎng)減少與腎小球硬化及間質(zhì)纖維化直接相關(guān)。在殘余腎模型中，腎小球毛細(xì)血管數(shù)目隨內(nèi)皮細(xì)胞凋亡而進(jìn)行性減少［4］。MSCs是一種具有多項(xiàng)分化潛能的多能干細(xì)胞，不僅能分化成內(nèi)皮細(xì)胞，形成新生血管，而且還可上調(diào)促血管生長因子的表達(dá)，分泌多種細(xì)胞因子，如VEGF等［5］，促進(jìn)MSCs遷移、分化和血管新生［6］。VEGF是存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞的特異性促血管生長因子，對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞有強(qiáng)烈的促分裂、趨化、再生和修復(fù)的作用。轉(zhuǎn)染VEGF基因的MSCs能分化為形成血管的細(xì)胞［7］。以VEGF和MSCs為基礎(chǔ)的基因－細(xì)胞聯(lián)合治療，有望為血管再生和損傷腎臟組織修復(fù)提供應(yīng)用前景。

本研究采用攜帶VEGF基因的重組腺病毒轉(zhuǎn)染MSCs，倒置相差共聚焦熒光顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)其轉(zhuǎn)染率較高。ELISA法檢測外發(fā)現(xiàn)分泌VEGF蛋白的表達(dá)較空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組明顯升高，并且細(xì)胞生長未受到影響，提示VEGF轉(zhuǎn)染有效且轉(zhuǎn)染后不影響MSCs的增殖并分泌VEGF，轉(zhuǎn)染的腺病毒并不影響細(xì)胞的活性。MSCs具備較強(qiáng)的增殖能力，易于轉(zhuǎn)染外源性基因且有較高的轉(zhuǎn)染率，可作為基因治療的靶細(xì)胞。

圖4 VEGF基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)CRF大鼠腎組織CD31表達(dá)的影響(免疫組織化學(xué)染色 ×400)

圖5 VEGF基因轉(zhuǎn)染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)各組大鼠腎組織CD31表達(dá)的影響

CD31是表達(dá)于血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的抗原，是檢測血管內(nèi)皮細(xì)胞的常用標(biāo)志物。本研究發(fā)現(xiàn)慢性腎衰竭組腎小球中CD31表達(dá)明顯降低，應(yīng)用MSCs和VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs干預(yù)后表達(dá)增加，VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs組增加更為明顯。研究證實(shí)殘腎內(nèi)皮細(xì)胞減少，毛細(xì)血管毀損，MSCs移植促進(jìn)腎臟內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù);而VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs移植修復(fù)腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量及增加毛細(xì)血管密度效果更為顯著。VEGF直接特異地促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，促進(jìn)側(cè)支血管的形成［8］;有研究表明剔除VEGF基因片段的MSCs的腎臟保護(hù)作用明顯下降［9］。因此，筆者推測VEGF轉(zhuǎn)染MSCs后仍可以保持其干細(xì)胞的多向分化潛能;同時(shí)表達(dá)VEGF增加，通過自分泌和旁分泌功能，創(chuàng)造了有利于MSCs向血管內(nèi)皮樣細(xì)胞分化的微環(huán)境，這種正反饋?zhàn)饔么龠M(jìn)了血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖分化和血管新生。

Yuan等［10］將VEGF基因轉(zhuǎn)染至人胚胎間充質(zhì)干細(xì)胞，再通過尾靜脈輸入順鉑誘導(dǎo)的急性腎損傷小鼠模型后發(fā)現(xiàn)，VEGF-MSCs對(duì)腎臟的保護(hù)作用優(yōu)于單純的MSCs，腎臟功能和結(jié)構(gòu)的損傷明顯改善。筆者研究發(fā)現(xiàn) MSCs移植組、VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs移植組腎功能均較慢性腎衰竭組、單純Ad-VEGF干預(yù)組改善;VEGF基因轉(zhuǎn)染的MSCs移植組改善更明顯。而單純基因干預(yù)組腎功能及腎血管內(nèi)皮細(xì)胞減少均無明顯改善，分析原因殘腎組織存活細(xì)胞數(shù)量減少，單純基因轉(zhuǎn)染缺乏有效的反應(yīng)靶細(xì)胞。而攜帶VEGF基因的重組腺病毒轉(zhuǎn)染MSCs的基因－細(xì)胞聯(lián)合治療既提供了外源性細(xì)胞補(bǔ)充，又能高效表達(dá)VEGF，對(duì)促進(jìn)腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞新生和損傷腎臟修復(fù)較單純干細(xì)胞顯示出更大的優(yōu)越性。

綜上所述，Ad-VEGF能有效轉(zhuǎn)染MSCs，慢性腎衰竭大鼠給予轉(zhuǎn)染VEGF基因的MSCs移植后腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)量增多，腎臟功能改善;較單純MSCs移植療效更為顯著。其作用可能與基因轉(zhuǎn)染增加VEGF表達(dá)，有利于腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮修復(fù)、血管新生有關(guān)。以VEGF和MSCs為基礎(chǔ)的基因－細(xì)胞聯(lián)合介入治療，為血管再生和損傷腎臟組織修復(fù)和血管再生方面顯示了良好的應(yīng)用前景?；蜣D(zhuǎn)染的MSCs在體內(nèi)是否還可以通過轉(zhuǎn)分化機(jī)制修復(fù)慢性腎衰竭大鼠腎臟損害，還需要熒光組化等方法觀察MSCs向血管內(nèi)皮細(xì)胞的分化情況。

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Effects of bone marrow mesenchymal stem cell gene transfection by VEGF gene on angiogenesis in rats with chronic renal failure

CUIJiong，DENG Jin-xiu，WAN Jian-xin

(First Affiliated Hospital of Fujian Medical University，F(xiàn)uzhou 350005，China)

Objective To investigate the effects of bone marrow mesenchymal stem cell(MSCs)gene transfection by VEGF (vascular endothelial growth factor)gene on the repair of glomerular endothelia and angiogenesis in ratswith chronic renal failure(CRF).Methods MSCs isolated from rat bone marrow were cultured and transfected with recombinant Ad5-hVEGF-EGFP.Then，effects of transfection on cell proliferation and secretion of VEGF were observed closely.Fiftymale SD ratswere randomly divided into5 groups:the sham operation group，the CRF group，the MSCs transplantation group，the Ad-VEGF injection group and the MSCs transfected by VEGF gene group.The animal CRFmodelwas established by a two-stage5/6 nephrectomy procedure in rats.For the animals of the sham operation group and the CRF group，DMEM culture solution without serum was injected through the right renal artery prior to nephrectomy of the right kidney.The animals of the other3 groupswere treated with MSCs，Ad-VEGF and MSCs transfected by VEGF genes.After8 weeks，the renal function ofall the groupswas detected and CD31 expression in glomeruluswasmeasured by immunohistochemistry.Results The effect of Ad5-hVEGF-EGFP on the proliferation ofMSCs could notbe detected after transfection.The level of VEGF protein in supernatantafter VEGF gene transfection was significantly higher than that of the control group(P＜0.05).The Scr and BUN levels in the MSCs transplantation group and the MSCs transfected by VEGF gene group were lower than those of the CRF group(P＜0.05).As compared with those of the MSCs transplantation group，the levels of Scr and BUN for the MSCs transfected by VEGF gene group were even lower (P＜0.05).CD31 expression in glomerulus for the CRF group was decreased，as compared with thatof the sham operation group(P＜0.05).However，CD31 expression in glomerulus was increased to some extent following treatment by MSCs or MSCs transfected by VEGF gene(P＜0.05).CD31 expression level was increased more significantly for the MSCs transfected by VEGF gene group(P＜0.05).Conclusion The number of capillary endothelia was increased and renal function improved，following transplantation ofMSCs transfected by VEGF gene in ratswith chronic renal failure，whichmightbe associated with the increased expression of VEGF gene after gene transfection，its beneficial effect on the repair of glomerular capillary endothelia and angiogenesis aswell.

Vascular endothelial growth factor;Mesenchymal stem cells;Chronic renal failure;Rat;Angiogenesis

R692.5

A

10.3969/j.issn.1009－0754.2014.06.001

2014－08－07)

(本文編輯:莫琳芳)

福建省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2012J01343)

350005 福州，福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腎內(nèi)科

萬建新，電子信箱:wanjx@263.net