邵信儒,姜自軍,徐 剛,朱俊義
(1.通化師范學(xué)院 制藥與食品科學(xué)學(xué)院,吉林 通化134002;2.國(guó)家果酒及果蔬飲品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心;3.通化師范學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院,吉林 通化134002,吉林 通化134000)
霜霉病為鞭毛菌亞門(mén)真菌,是葡萄栽培過(guò)程中發(fā)生最普遍的病害之一[1].霜霉病在東北地區(qū)的發(fā)病高峰在6月下旬至8月中旬,高溫高濕通風(fēng)不良的條件發(fā)病較重[2].病菌以卵孢子在枝芽病葉、主干老皮和土壤中越冬,第二年春季在適宜條件下萌發(fā),產(chǎn)生孢囊梗和孢子囊,借助于雨水傳播和反復(fù)侵染.該病主要危害葉片,也能害新梢、花蕾和幼果.葉片發(fā)病初期出現(xiàn)水漬狀黃色斑點(diǎn),后擴(kuò)展為黃褐色不規(guī)則斑點(diǎn),葉背產(chǎn)生灰白色霉層,后期霉層變?yōu)楹稚?,病葉逐漸枯死脫落.幼果感病初期,病部變成淡綠色,后期病斑變深褐色下陷,產(chǎn)生一層霜狀白霉,果實(shí)變硬萎縮、脫落,成熟果不發(fā)?。l(fā)生后,光合作用效率降低,葉片極易脫落,影響物質(zhì)的積累,對(duì)次年的產(chǎn)量影響較大[3-7].本文利用掃描電鏡觀(guān)察了葡萄霜霉菌的超微形態(tài)特征,有助于進(jìn)一步了解霜霉菌的生物學(xué)特性.
葡萄品種為雙優(yōu),取自通化市鑫園葡萄酒股份有限公司葡萄栽培基地,海拔460 m.取材時(shí)間為2013年6月30日.采集的雙優(yōu)葡萄病害葉片,用FAA固定液固定.
在體視鏡下選取適于觀(guān)察的材料,在無(wú)水乙醇中脫水30min,換入丙酮內(nèi)30min,再放入醋酸異戊酯內(nèi)20min,而后進(jìn)行臨界點(diǎn)干燥.把樣品固定在樣品臺(tái)上,進(jìn)行離子濺射鍍金膜,用HITACHI S-3000N型掃描電子顯微鏡觀(guān)察、拍照[8].
葡萄霜霉菌的越冬卵孢子,首先傳播到寄主葉片上,形成大量的菌絲,進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng).之后再進(jìn)行繁殖生長(zhǎng),在氣孔處形成叢生的管狀孢囊梗(圖版I,1~3,9),孢囊梗上端向上生長(zhǎng)(圖版I,4~6),并形成分枝(圖版I,7~10),分枝的孢囊梗頂端膨大形成大量孢子囊,孢子囊球形(圖版I,11~14),大量孢子囊聚集在葉片表面形成“霜粉層”(圖版I,15).
圖版I 葡萄霜霉菌發(fā)生過(guò)程電鏡觀(guān)察
1~3.游動(dòng)孢子在氣孔處萌發(fā);4~6.游動(dòng)孢子萌發(fā)形成大量菌絲;7~9.菌絲上開(kāi)始形成孢子囊;10~14.孢子囊梗形成大量孢子囊;15.由孢子囊形成的“霜粉層”
濕度對(duì)霜霉菌侵入的影響最大,霜霉菌孢子囊需要在水滴里進(jìn)行萌發(fā)生長(zhǎng),濕度高對(duì)病原的侵入有利,在高濕度下,氣孔開(kāi)張度大,水孔泌水多而持久,保護(hù)組織柔軟,從而降低了植物抗侵入的能力[9].所以,在氣孔處容易觀(guān)察到叢生的霜霉菌孢囊梗.葡萄霜霉病菌的孢子囊在13~24℃時(shí)萌發(fā)所需的時(shí)間是1h,在28℃時(shí)所需時(shí)間為6h以上,而在4℃時(shí)則需要12h,說(shuō)明溫度也是葡萄霜霉菌孢子囊萌發(fā)的重要因素[9].高溫高濕是葡萄霜霉病菌發(fā)生的重要條件.
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通化師范學(xué)院學(xué)報(bào)2014年12期