馮月華 吳小璐 梁法亮

（江門市婦幼保健院，廣東 江門 529000）

育齡婦女紅細(xì)胞葉酸水平的檢測分析

馮月華 吳小璐 梁法亮

（江門市婦幼保健院，廣東 江門 529000）

目的檢測本地區(qū)育齡婦女紅細(xì)胞葉酸水平，分析其影響因素，為本地區(qū)制定育齡及孕期婦女增補(bǔ)葉酸預(yù)防NTDs的方案提供依據(jù)。方法募集53例健康育齡婦女志愿者，抽取靜脈血4 mL，化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測紅細(xì)胞葉酸水平。結(jié)果53例育齡婦女的平均紅細(xì)胞葉酸水平為（788.6±204.0）nmol/L，有32例濃度低于預(yù)防NTDs的最低水平906 nmol/L，占總例數(shù)的60.4%。文化程度高者，其濃度低于預(yù)防NTDs的最低水平的人群比例漸降。結(jié)論本地區(qū)育齡婦女紅細(xì)胞葉酸水平大多低于預(yù)防NTDs的最低水平，應(yīng)加強(qiáng)對孕前增補(bǔ)葉酸相關(guān)知識的宣教。

葉酸；育齡婦女；紅細(xì)胞葉酸水平；神經(jīng)管畸形

葉酸是一種廣泛存在于綠色蔬菜中的水溶性B族維生素，對細(xì)胞的分裂生長及核酸、氨基酸、蛋白質(zhì)的合成起著重要的作用[1]。胎兒神經(jīng)管畸形（neural tube defects，NTDs）是一組嚴(yán)重影響胎兒大腦和脊髓發(fā)育的先天畸性，可能的病因主要包括葉酸缺乏、葉酸代謝路徑發(fā)生異常等[2]。研究表明，育齡婦女孕前增補(bǔ)葉酸對NTDs具有很好的預(yù)防作用[3，4]。但葉酸水平的個(gè)體差異大，各地婦女紅細(xì)胞葉酸水平現(xiàn)狀不一。本文通過檢測本地區(qū)53例育齡婦女的紅細(xì)胞葉酸水平，觀察其低于預(yù)防NTDs最低水平（906 nmol/L）的人群比例，分析影響個(gè)體紅細(xì)胞葉酸水平的因素，為江門地區(qū)育齡婦女葉酸水平調(diào)查，以及制定育齡及孕期婦女增補(bǔ)葉酸預(yù)防NTDs等出生缺陷的方案提供依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 研究對象

募集53例健康育齡婦女志愿者，納入標(biāo)準(zhǔn)為：①于江門地區(qū)工作生活達(dá)2年或以上；②年齡20～35歲；③體質(zhì)量40～62 kg；④無吸煙、酗酒史；⑤無服食精神類藥物史；⑥無慢性肝、腎疾病及血液病等；⑦治療期間保證不服食其他藥物。對研究對象的資料保密，并簽署書面知情同意書。

1.2 檢測方法

①儀器與試劑：DPC Immulite 2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（德國Siemens），全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（法國Horiba ABX），葉酸測定試劑盒（化學(xué)發(fā)光法，包括檢測試劑、葉酸定標(biāo)品、沖洗緩沖液、紅細(xì)胞緩沖液、底物和質(zhì)控品）（美國Beckman）。②樣品收集與處理：使用肝素抗凝真空管采集空腹靜脈血4 mL，溶血前取適量于全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測紅細(xì)胞比容（HCT/%）并記錄。全血樣本溶血檢測前可于2～8 ℃最多保存4 h。將紅細(xì)胞葉酸溶血?jiǎng)┯?5 mL去離子水復(fù)溶，放置至少40 min，直到完全溶解。慢慢的顛倒混勻全血標(biāo)本數(shù)次以確定完全混勻后，吸取50 μL全血加入到1 mL溶血?jiǎng)┲羞M(jìn)行溶血。慢慢的顛倒混勻數(shù)次并在室溫下避光保存至少90 min以使其穩(wěn)定，此溶血液可在3 h內(nèi)使用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測葉酸含量或在-20 ℃下保存30 d。③檢測方法：準(zhǔn)備葉酸定標(biāo)品S0、S1、S2、S3、S4和S5，濃度分別約為0、2.3、5.7、11.3、22.7和45.3 nmol/L，根據(jù)說明書進(jìn)行設(shè)置定標(biāo)、定標(biāo)要求的輸入和回顧定標(biāo)數(shù)據(jù)等內(nèi)容，檢測各定標(biāo)品的光量子值，根據(jù)光量子值和已知濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系建立定標(biāo)曲線。葉酸檢測試劑于2～10 ℃下保存2 h后才置于儀器使用，每個(gè)血液樣品設(shè)置3個(gè)復(fù)孔，根據(jù)儀器操作指南設(shè)置參數(shù)，檢測各樣品孔的光量子值，并根據(jù)存儲的定標(biāo)曲線自動(dòng)計(jì)算葉酸含量。

表1 不同年齡組育齡婦女紅細(xì)胞葉酸水平

表2 不同居住地育齡婦女紅細(xì)胞葉酸水平

表3 不同文化程度育齡婦女紅細(xì)胞葉酸水平

紅細(xì)胞葉酸含量（RBC Folate/nmol/L）：檢測結(jié)果乘以溶血液制備時(shí)的稀釋倍數(shù)21，將此結(jié)果除以該樣品的紅細(xì)胞比容。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)的分析；計(jì)量資料用均值±標(biāo)準(zhǔn)差（xˉ±s）表示，組間比較用t檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)處理前經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)及方差齊性檢驗(yàn)，顯著性水平定為雙側(cè)P ＜ 0.05。

2 結(jié) 果

2.1 不同年齡組育齡婦女紅細(xì)胞葉酸水平

53例育齡婦女中，年齡組20～30歲有34例，年齡超過30歲的有19例，兩年齡組的紅細(xì)胞葉酸含量相比沒有顯著性差異。年齡組20～30歲的34例中，有21例濃度低于預(yù)防胎兒神經(jīng)管畸形的最低水平906 nmol/L，比例為61.8%。年齡超過30歲的19例中，有11例濃度低于906 nmol/L，比例為57.9%。見表1。

2.2 不同居住地育齡婦女紅細(xì)胞葉酸水平

53例育齡婦女中，20例居住地為農(nóng)村，33例居住地為城市，兩組的紅細(xì)胞葉酸含量相比沒有顯著性差異。但農(nóng)村組中紅細(xì)胞葉酸含量低于906 nmol/L的有13例，比例為65.0%，明顯高于城市組的57.6%。見表2。

2.3 不同文化程度育齡婦女紅細(xì)胞葉酸水平

文化程度在初中及以下的育齡婦女有12例，高中組的有20例，兩組的紅細(xì)胞葉酸含量沒有顯著性差異，大專及以上組的平均紅細(xì)胞葉酸含量比前兩組高，具有顯著性差異（P＜0.05）。三組中紅細(xì)胞葉酸含量低于906 nmol/L的比例分別為66.7%、60.0%和57.1%，文化程度高者，其比例漸降。見表3。

3 討 論

我市出生缺陷發(fā)生率近幾年也居高不下，據(jù)市新篩中心對新生嬰兒的篩查，我市2007年的出生缺陷發(fā)生率為111.6/萬，2008年為112.6/萬，2009年為143.2/萬。因此，實(shí)施出生缺陷“三級干預(yù)措施”，加強(qiáng)葉酸增補(bǔ)預(yù)防NTDs的宣教，將優(yōu)生知識普及到基層迫在眉睫。

本研究53例育齡婦女的平均紅細(xì)胞葉酸水平為（788.6± 204.0）nmol/L，有32例濃度低于預(yù)防NTDs的最低水平906 nmol/L，占總例數(shù)的60.4%。不同年齡組和不同居住地組的紅細(xì)胞葉酸水平?jīng)]有明顯差異，但30歲以上者和居住在城市的育齡婦女中濃度低于預(yù)防NTDs的最低水平的比例相對較低，這一方面可能是由于本研究中的19例30歲以上者和33例居住于城市的多為學(xué)歷較高，對增補(bǔ)葉酸的認(rèn)知程度深；另一方面可能是膳食結(jié)構(gòu)、生活習(xí)慣以及對保健知識的認(rèn)知程度等的不同而導(dǎo)致。文化程度越高，紅細(xì)胞葉酸水平越高，濃度達(dá)到906 nmol/L的比例數(shù)也越高，其中農(nóng)村育齡婦女的文化程度較低者居多，主要原因可能是不同文化程度婦女的保健知識水平、來源途徑不同，從而對葉酸知識的掌握程度不同。此外，本文所檢測的例數(shù)較少，難以形成大樣本的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)以作影響因素分析，后續(xù)研究中可考慮抽區(qū)江門市三區(qū)四轄市的育齡及孕期婦女做研究樣本，對其紅細(xì)胞葉酸水平以及增補(bǔ)葉酸預(yù)防胎兒NTDs的知曉率以及態(tài)度、行為的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)進(jìn)行收集統(tǒng)計(jì)，為實(shí)施增補(bǔ)葉酸預(yù)防NTDs的干預(yù)措施提供科學(xué)依據(jù)，指導(dǎo)增補(bǔ)葉酸預(yù)防NTDs的方案制定。

食物中葉酸分布廣泛，以肝臟、綠葉蔬菜、豆類及水果含量最豐富，但葉酸極易被光、熱破壞，在食物貯存加工過程中損失率達(dá)80%，且生物利用率僅為45%左右，因此烹調(diào)不當(dāng)、貯存損失等會導(dǎo)致葉酸利用率低[5]。我國于2009年發(fā)布的《增補(bǔ)葉酸預(yù)防神經(jīng)管缺陷項(xiàng)目管理方案》中提出，一般待孕婦女從懷孕前3個(gè)月至懷孕后3個(gè)月以0.4 mg/d的劑量增補(bǔ)葉酸。因此，育齡婦女在計(jì)劃懷孕時(shí)，除了日常生活注重膳食結(jié)構(gòu)外，還須通過口服葉酸制劑，體內(nèi)的紅細(xì)胞葉酸水平才可達(dá)到預(yù)防NTDs的最低水平。

[1] Czeizel AE,Dudas I,Vereczkey A,et al.Folate deficiency and folic acid supplementation: the prevention of neural-tube defects and congenital heart defects[J].Nutrients,2013,5(11):4760-4775.

[2] 譚春英,王燕,楚嚴(yán),等.孕婦紅細(xì)胞葉酸水平與胎兒出生缺陷發(fā)病關(guān)系的研究[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2011,19(8):81-83.

[3] 王珊,潘新娟,余增麗.妊早期婦女血清葉酸水平與胎兒出生缺陷發(fā)病關(guān)系的隊(duì)列研究[J].中國婦幼保健,2012,27(33):5266-5268.

[4] 沈佩芳,胡惠敏.葉酸預(yù)防胎兒神經(jīng)管缺陷的效果觀察[J].中國藥業(yè),2011,20(11): 67-68.

[5] Osterhues A,Ali NS,Michels KB.The role of folic acid fortif i cation in neural tube defects: a review[J].Crit Rev Food Sci Nutr,2013,53(11): 1180-1190.

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1671-8194（2014）21-0194-03