錢俊甫

（平煤神馬醫(yī)療集團(tuán)總醫(yī)院，河南 平頂山 467000）

原發(fā)性肝細(xì)胞癌OSM、OSMR表達(dá)與臨床資料關(guān)系及意義

錢俊甫

（平煤神馬醫(yī)療集團(tuán)總醫(yī)院，河南 平頂山 467000）

目的 探討原發(fā)性肝癌（HCC）及癌旁組織中OSM、 OSMR 表達(dá)與臨床資料的關(guān)系及意義。方法 用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測30例HCC及其癌旁組織中OSM、OSMR表達(dá)水平，常規(guī)檢測患者術(shù)前血清AFP、AST、ALT、TBIL水平，并同時(shí)將30例肝癌患者按性別、年齡、Child 分級、AFP、乙型肝炎表面抗原、肝硬化、TNM分期、腫瘤有無假包膜情況進(jìn)行分組，通過方差分析與Logistic回歸對肝癌及癌旁組織OSM、OSMR表達(dá)與以上臨床資料進(jìn)行分析，研究原發(fā)性肝細(xì)胞癌中OSM OSMR表達(dá)與臨床資料關(guān)系及意義。結(jié)果 ①肝癌及癌旁組織中OSM、OSMR表達(dá)與年齡、性別、乙型肝炎表面抗原陽性、Child分級、肝硬化、AST、ALT、TBIL等因素?zé)o關(guān)（P＞0.05）；②肝癌及癌旁組織中OSM、OSMR表達(dá)與AFP、TNM分期、腫瘤有無假包膜相關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論 OSM、OSMR與HCC發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)；肝癌及癌旁組織中OSM、OSMR表達(dá)與AFP、TNM分期、腫瘤無假包膜密切相關(guān)。

原發(fā)性肝細(xì)胞癌；腫瘤抑制素M；受體；臨床資料；表達(dá)

原發(fā)性肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)預(yù)后差、術(shù)后復(fù)發(fā)率高、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)多見、5年生存率較低等特征，常迅速侵犯肝實(shí)質(zhì)導(dǎo)致肝功能衰竭,病死率高，被認(rèn)為是常見而又難治的惡性腫瘤[1]。腫瘤抑制素M（oncostatin M，OSM）及其受體(oncostatin M receptor，OSMR)可與多種細(xì)胞因子相互作用而構(gòu)成調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，發(fā)揮著復(fù)雜的調(diào)節(jié)功能。本研究采用ELISA法檢測肝癌組織中的OSM、OSMR的表達(dá)，旨在了解OSM、OSMR表達(dá)與臨床資料關(guān)系及意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

30 例肝癌（HCC組）及癌旁組織(癌旁組)，標(biāo)本均取自平煤總醫(yī)院普外科2009年10月至2013年7月行手術(shù)治療的HCC患者，所有病例均經(jīng)病理證實(shí)的HCC。其中男24例，女6例，平均年齡52.8歲，＜60歲20例，≥60歲10例；乙肝表面抗原（HBsAg）陽性25例，肝硬化24例；甲胎蛋白(AFP)平均520.6 μg/L，＜200 μg/L者13例，≥200 μg/L者17例；腫瘤直徑平均5 cm，＜3 cm者7例，≥3 cm者23例；病理分級：Ⅰ～Ⅱ級22例，Ⅲ級8例；TNM分期采用UICC標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ～Ⅱ期18例，Ⅲ期以上12例；肝功能Child分級：A級26例，B級4例。另常規(guī)檢測患者手術(shù)前血清AFP、AST、ALT、TBIL水平。正常對照組11例，6例來源于同期手術(shù)治療的肝血管瘤患者（所有病例均經(jīng)病理證實(shí)），5例均為肝外傷術(shù)中切除的正常肝組織；11例均無乙、丙肝病毒感染史及肝硬化病史。

1.2 方法

①試劑：人OSM、OSMR ELISA檢測試劑盒購自美國ADL公司。②標(biāo)本的采集及保存：所有樣本均取自術(shù)中切除的新鮮組織標(biāo)本，癌旁組織距癌腫邊緣2 cm以上，肉眼無腫瘤組織。標(biāo)本切除離體后，采樣時(shí)選取無組織壞死或出血的部位，以研缽研磨成組織勻漿，每份標(biāo)本取組織勻漿1 g加生里鹽水200 μL，混勻，高速離心機(jī)離心（10000轉(zhuǎn)/分）20 min取上清，-20 ℃冰箱保存，待測（避免反復(fù)凍融）。③用ELISA法檢測組織勻漿OOSM、OSMRS水平。操作步驟：嚴(yán)格按照OSM、OSMR試劑盒說明書操作。

表1 各組中OSM及OSMR濃度比較（pmol/L ，）

表1 各組中OSM及OSMR濃度比較（pmol/L ，）

注：1）與肝癌組比較，P＜0.05；2）與對照組（正常肝臟和肝血管瘤）比較，P＜0.05

分組 例數(shù) OSM OSMR肝癌 30 0.796 ±0.048 1.719±0.084癌旁 30 2.847±0.1361),2) 10.805±0.8731),2)血管瘤 6 1.472±0.3511) 5.356±0.7461)正常肝臟 5 1.560±0.4271) 5.537±0.9781)

表2 肝癌、癌旁組織OSM、OSMR在不同臨床資料中表達(dá)比較

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

計(jì)量資料以 表示，數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS13.0軟件包對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，組間比較應(yīng)用單因素方差分析，與臨床資料關(guān)系用Logistic回歸分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 HCC組織中OSM、OSMR分子表達(dá)均低于癌旁組織（P＜0.05），與對照組比較明顯低于正常肝組織及血管瘤組織(P＜0.05)，見表1。

2.2 癌旁組織中OSM、OSMR分子高表達(dá)，與其他組比較有明顯差異（P＜0.05），見表1。

2.3 肝癌及癌旁組織中OSM、OSMR表達(dá)與年齡、性別、HBsAg陽性、Child分級、肝硬化、AST、ALT、TBIL因素?zé)o關(guān)(P＞0.05)，見表2。

2.4 肝癌及癌旁組織中OSM、OSMR表達(dá)與、AFP、TNM分期腫瘤有無假包膜相關(guān)（P＜0.05），見表2。

3 討 論

OSM是Zarling等[2]1986年首次從PMA活化U937細(xì)胞培養(yǎng)中分離純化時(shí)發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞因子，該因子明顯抑制A375人黑素瘤細(xì)胞生長，因而被命名為抑瘤素-M(oncostatin M，OSM)。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，它由巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞產(chǎn)生的耐熱、耐酸的單鏈糖蛋白。

OSMR廣泛分布于多種腫瘤細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞。OSM介導(dǎo)的生物學(xué)活性主要是特定受體形成異源二聚體復(fù)合物，該復(fù)合物激活、活化JAK，使受體分子酪氨酸磷酸化；同時(shí)也可激活有絲分裂原激活的蛋白激酶(MA PK)途徑，從而通過多種途徑發(fā)揮轉(zhuǎn)錄激活因子的作用。

腫瘤細(xì)胞無論在原發(fā)部位或繼發(fā)部位都與周邊環(huán)境存在著密切的關(guān)系，在周邊的腫瘤浸潤及浸潤邊緣的反應(yīng)性炎癥，往往通過調(diào)控一些細(xì)胞因子（抑制性T細(xì)胞，抑制性巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞等)以及在這些細(xì)胞因子參與下的信號傳遞，在腫瘤周邊形成一種免疫特定環(huán)境（immunological privileged milieu ）[4,5]，這種免疫特定環(huán)境在局部限制腫瘤細(xì)胞生長，防止遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，并誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞歸巢。正是該環(huán)境中T細(xì)胞、M∮活化，才使局部OSM表達(dá)增高，而正常肝細(xì)胞和肝血管瘤組織缺乏這種活化的T細(xì)胞、M∮，故OSM表達(dá)低于癌旁組織。另外HCC的發(fā)生、發(fā)展是多因素、多基因的過程，有許多癌基因、抑癌基因和細(xì)胞因子參與其中，這都可能是OSM、OSMR在HCC、癌旁、血管瘤和正常肝組織表達(dá)的可能機(jī)制。Znoyko等[3]研究認(rèn)為，OSM在肝臟被表達(dá)在Kupffre cell，而OSMRB則多表達(dá)在肝細(xì)胞上，而且在肝硬化組織中OSM表達(dá)恒定，正常肝臟組織多變；OSMRB正常肝臟組織低表達(dá)，肝硬化無表達(dá)。Lacreusette A等[6]在對惡性黑色素瘤研究發(fā)現(xiàn)OSMR低表達(dá)和缺失，這與本實(shí)驗(yàn)中OSM、OSMR在HCC癌旁及HCC臨床各期的表達(dá)是一致的。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，HCC 組織中OSM、OSMR分子表達(dá)均低于癌旁組織（P＜0.05；P＜0.05），與對照組比較明顯低于正常肝組織及血管瘤組織(P＜0.05)；癌旁組織中OSM、OSMR分子高表達(dá)，與其他組比較有明顯差異（P＜0.05）；肝癌及癌旁組織中OSM OSMR 表達(dá)與年齡、性別、乙型肝炎表面抗原 HBsAg 陽性、Child 分級肝硬化AST ALT TBIL等因素?zé)o關(guān)(P＞0.05)；肝癌及癌旁組織中OSM OSMR表達(dá)與、AFP、TNM 分期 腫瘤有無假包膜相關(guān)（P＜0.05） 本研究發(fā)現(xiàn)，OSM表達(dá)與假包膜與腫瘤的轉(zhuǎn)移和侵襲有關(guān)，轉(zhuǎn)移和侵襲程度越重，OSM表達(dá)水平越低。基因甲基化干擾了APC 的表達(dá)或功能，導(dǎo)致β-catenin 在細(xì)胞內(nèi)聚集，而該分子在介導(dǎo)上皮細(xì)胞黏附中發(fā)揮重要作用，另外OSM表達(dá)減低，從而其抑瘤活性減弱，這種作用便于HCC 的肝內(nèi)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。研究還發(fā)現(xiàn)，OSM表達(dá)和AFP濃度呈負(fù)相關(guān)，AFP濃度越高，OSM表達(dá)水平則越低。Yoshida[7]等認(rèn)為AFP2L百分比及絕對值與肝癌的分化程度密切相關(guān)，這就不難理解OSM、AFP表達(dá)情況的關(guān)系，但其二者具體相互作用的機(jī)制還不清楚。

[1] 吳孟超,張柏和.我國肝臟外科現(xiàn)狀和發(fā)展前景[J].中華外科雜志,1996,34(9):515-517.

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Expression and Effects of Oncostatin M and Its Receptor in Hepatocellular Carcinoma Tissues and the Relationship between Clinical Data

QIANG Jun-fu
(Department of Genera Surgery, the Pingdingshan Coal General Hospital, Pingdingshan 467000, China)

Objective To resarech the expression of oncostatin M and its receptor in hepatocellular carcinoma tissues,tissues surrounding hepatoma and the relationship between clinical data, to explore possiblely mechanisms and significance by which they affect hepatocellular carcinoma. Methods ELISA immunohistochemistry and ELISA absorbance method was used to detect the expression of oncostatin M and its receptor in hepatocellular carcinoma tissues and tissues surrounding hepatoma in 30 patients with corroborative HCC thyough pathology , 5 normal liver tissue and 6 cases tissue of Hemangiomas. Routinely testing the level of AFP, AST, ALT, TBIL in patients with preoperative serum, distinguishing different groups by sex, age, Child classification, AFP, HBsAg, liver cirrhosis, TNM stage, tumor pseudocapsule situation whether in 30 cases patients with HCC. Analysised the relationship between clinical data and oncostatin M and its receptor in hepatocellular carcinoma tissues,tissues surrounding hepatoma by variance analysis and Logistic regression, to resarech expression and effects of oncostatin M and its receptor in hepatocellular carcinoma tissues and the relationship between clinical data. Results ①The expression of OSM and OSMR in hepatocellular carcinoma tissues and tissues surrounding hepatoma are unrelated with the groups of sex, age, Child classification, HBsAg, liver cirrhosis in patients with HCC(P＞0.05). ②The expression of OSM and OSMR in hepatocellular carcinoma tissues and tissues surrounding hepatoma are interrelated with the AFP,TNM stage, tumor pseudocapsule situation whether in patients with HCC(P＜0.05). Conclusion ①The expression of oncostatin M and its receptor in hepatocellular carcinoma is very important to intffer the occurrence and progress of HCC. ②The expression of OSM and OSMR in hepatocellular carcinoma tissues and tissues surrounding hepatoma are closely interrelated with the AFP,TNM stage, tumor pseudocapsule situation whether in patients with HCC.

HCC; OSM; OSMR; Clinical data; Expression

R735.7

B

1671-8194（2014）20-0084-03