陸敏

(昆山市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 昆山 215300)

兩臺化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測同型半胱氨酸的比對分析

陸敏

(昆山市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 昆山 215300)

目的探討同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不同的儀器檢測同一個(gè)項(xiàng)目的結(jié)果之間有無可比性。方法依據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)EP9-A文件，分別使用ABBOTT I2000和ABBOTTAxsym全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀同時(shí)檢測40例血清HCY濃度水平，對兩種不同檢驗(yàn)儀器測定的兩組結(jié)果進(jìn)行回歸分析和偏倚分析。結(jié)果兩臺儀器測定血清同型半胱氨酸的相關(guān)系數(shù)(r)為0.9998，回歸方程為y=0.9846x－0.0443，在醫(yī)學(xué)決定水平處得預(yù)期相對偏差為1.7%、1.6%，兩臺儀器檢測結(jié)果之間具有很好的相關(guān)性。結(jié)論當(dāng)同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)有兩臺儀器檢測同一項(xiàng)目時(shí)，必須對兩種方法檢測的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析和偏倚評估，以確保兩臺儀器測定同一項(xiàng)目時(shí)的結(jié)果具有可比性和一致性。

同型半胱氨酸；比對分析；偏倚評估；ABBOTT I2000；ABBOTT Axsym

隨著檢驗(yàn)技術(shù)的不斷發(fā)展，臨床檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室儀器新老儀器的交替現(xiàn)象也越來越普遍。因ABBOTT公司的停產(chǎn)，新的ABBOTT I2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀將代替我科2000年購入的ABBOTT Axsym全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進(jìn)行日常檢驗(yàn)工作。新老兩種型號的發(fā)免疫分析儀由于儀器本身、試劑以及校準(zhǔn)品等都不盡相同，這樣就會(huì)引起兩種儀器檢測結(jié)果之間可能出現(xiàn)差異的情況。如何保證同一個(gè)臨床實(shí)驗(yàn)室里不相同的檢驗(yàn)儀器檢測相同的一個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目時(shí)候的測定結(jié)果具有可比性，這是檢驗(yàn)科日常檢驗(yàn)工作中重要的組成部分，這對于臨床上對檢驗(yàn)結(jié)果的認(rèn)可也非常重要。同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室使用不同檢驗(yàn)儀器測定相同的檢驗(yàn)項(xiàng)目時(shí)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的要求，必須對其進(jìn)行相關(guān)性分析和偏倚評估，以保證不同檢驗(yàn)儀器測定的結(jié)果之間具有一致性。本研究參照NCCLS的EP9-A文件[1]的方法，對這兩臺免疫分析儀測定血清HCY的結(jié)果進(jìn)行了相關(guān)性分析和偏倚評估，判斷這兩種儀器在測定同一個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目時(shí)的結(jié)果是否具有可比性。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器與試劑美國ABBOTTAxsym全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀、美國ABBOTT I2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀；原裝試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品。ABBOTT Axsym全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀參加省室間質(zhì)控成績優(yōu)秀，作為參考方法(X)，將ABBOTT I2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀作為實(shí)驗(yàn)方法(Y)。兩臺免疫分析儀都嚴(yán)格按照儀器說明書進(jìn)行操作，同時(shí)兩臺免疫分析儀的室內(nèi)質(zhì)控均在控，以保證這兩臺免疫分析儀的測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

1.1.2 樣本批內(nèi)精密度與批間精密度使用標(biāo)本為新鮮混合血清，采集完成后分裝，存放-20℃冰箱1.5血、黃疸、脂濁。

1.2 方法

1.2.1 批內(nèi)精密度評價(jià)從冰箱取出一份混合血清，室溫下放置0.5 h，分別在兩臺化學(xué)發(fā)光免疫分析儀上連續(xù)測定20次，然后根據(jù)測定結(jié)果計(jì)算出兩臺儀器的均值()和標(biāo)準(zhǔn)差(S)以及變異系數(shù)(CV)。

1.2.2 批間精密度評價(jià)每天使用一份混合血清，室溫放置0.5 h后，分別在兩臺化學(xué)發(fā)光免疫分析儀上測定，連續(xù)測定20 d，計(jì)算出各自的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。

1.2.3 相關(guān)性分析和偏倚評估每天選取8份樣本，連續(xù)測定5 d，共測定40個(gè)樣本，所有樣本雙份測定取均值，結(jié)果在2 h內(nèi)測定完成并記錄測定結(jié)果。再根據(jù)檢測數(shù)據(jù)作圖[2]，以Y軸為ABBOTT I2000雙份檢測樣本結(jié)果的均值，以X軸ABBOTT Axsym雙份檢測樣本結(jié)果的均值作散點(diǎn)圖。以Y軸為ABBOTT Axsym與ABBOTT I2000雙份檢測樣本結(jié)果的均值差，以X軸為ABBOTT Axsym檢測雙份結(jié)果的均值做偏倚圖。然后將HCY的醫(yī)學(xué)決定水平(Xc)帶入計(jì)算出的直線回歸方程，最后計(jì)算出這兩種方法間的相對偏差(SE%)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法使用EXCEL2003和SPSS11.0軟件進(jìn)行直線回歸分析和配對t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 批內(nèi)精密度以及批間精密度評價(jià)批內(nèi)精密度評價(jià)，Axsym與I2000檢測結(jié)果變異系數(shù)(CV)分別為1.5%與1.4%，組間配對t檢驗(yàn)顯示P值為0.333，兩組數(shù)據(jù)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；批間精密度評價(jià)，Axsym與I2000檢測結(jié)果變異系數(shù)(CV)分別為1.5%與1.3%，配對t檢驗(yàn)P值為0.108，顯示兩組數(shù)據(jù)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

表1 精密度評價(jià)(n=20)

2.2 兩種方法測定結(jié)果的相關(guān)性與偏倚分析Axsym與I2000檢測結(jié)果相關(guān)系數(shù)為0.999 8，回歸方程為y=0.984 6x-0.044 3，兩儀器檢測HCY結(jié)果相關(guān)性很好，結(jié)果見圖1，Axsym與I2000檢測結(jié)果偏倚分析見圖2，兩儀器檢測結(jié)果平均偏差為2.1%。

圖1 兩種方法相關(guān)性

圖2 兩種方法偏倚分析

2.3 兩種方法在醫(yī)學(xué)決定水平處的預(yù)期誤差分析將HCY的醫(yī)學(xué)決定水平濃度代入回歸方程，計(jì)算出兩儀器在25μmol/L濃度和100μmol/L濃度處的預(yù)期偏差分別為1.7%和1.6%，兩儀器檢測結(jié)果之間的預(yù)期偏差均能被臨床所接受，結(jié)果見表2。

表2 兩種方法在醫(yī)學(xué)決定水平處的預(yù)期誤差（μmol/L）

3 討論

HCY是一種含巰基的氨基酸，在人體中的含量極低，主要來源于日常飲食[3]。近年來已經(jīng)證實(shí)，高濃度的HCY在心腦血管疾病患者中有共同的表現(xiàn)[4]。研究表明[5-6]，高HCY血癥是動(dòng)脈粥樣硬化和腦卒中的危險(xiǎn)因素。本科室引進(jìn)美國ABBOTTAxsym全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測該項(xiàng)目，為臨床醫(yī)生在診治動(dòng)脈粥樣硬化和腦卒中方面提供了很大的幫助。

現(xiàn)在的醫(yī)療技術(shù)發(fā)展迅速，同一個(gè)臨床實(shí)驗(yàn)室內(nèi)同一個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目使用兩個(gè)檢測系統(tǒng)測定的情況十分普遍，為了保證檢驗(yàn)結(jié)果在患者的診療中發(fā)揮作用，同一個(gè)檢驗(yàn)標(biāo)本，同一個(gè)項(xiàng)目，不管使用什么儀器測定，得出的檢驗(yàn)結(jié)果應(yīng)該是一樣的，這也是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理的目標(biāo)之一。因技術(shù)以及設(shè)備升級，2013年ABBOTT公司停止了Axsym配套試劑和耗材的生產(chǎn)，在其上檢測的所有項(xiàng)目均可以轉(zhuǎn)移到I2000儀器上面檢測。我科也引進(jìn)了兩臺I2000代替之前的Axsym。由于兩種儀器的型號不同，配套試劑也有差異，這樣就可能導(dǎo)致檢測結(jié)果有差異，發(fā)出的報(bào)告有可能會(huì)給臨床醫(yī)生帶來不便，因此，了解兩臺儀器檢測的結(jié)果之間有無可比性是檢驗(yàn)工作的重要環(huán)節(jié)。此外，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的要求，不同的檢驗(yàn)儀器測定相同的檢驗(yàn)項(xiàng)目時(shí)，必須對兩種儀器測定的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析和偏倚評估，以保證這兩臺儀器測定的結(jié)果之間具有一致性。

一致性指在統(tǒng)一的計(jì)量單位基礎(chǔ)上，無論用哪種檢測儀器，其檢測的結(jié)果必須在給定的區(qū)間內(nèi)保持一致，檢測結(jié)果應(yīng)該是可重復(fù)的、可再現(xiàn)和可比較的[7]。當(dāng)同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室有同一個(gè)項(xiàng)目使用兩個(gè)儀器或者兩個(gè)以上儀器檢測時(shí)，應(yīng)對兩種儀器檢測的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析和偏差評估，以確定兩種儀器檢測的偏差是否在臨床允許范圍內(nèi)，從而保證兩者之間的檢測結(jié)果具有準(zhǔn)確性和一致性[8]。使用EP9-A文件對兩種方法測定同一項(xiàng)目進(jìn)行比對分析和偏倚評估，可以為臨床實(shí)驗(yàn)室提供方法學(xué)比較的標(biāo)準(zhǔn)化途徑，然后將醫(yī)學(xué)決定水平代入線性回歸方程，將所得的值與醫(yī)學(xué)決定水平進(jìn)行偏差分析，不僅能得出兩臺檢驗(yàn)儀器測定結(jié)果之間的相關(guān)性，還能獲得偏差的大小[9]。

本研究結(jié)果顯示，兩種儀器的批內(nèi)精密度和批間精密度都非常好，這也是兩個(gè)儀器能進(jìn)行比對試驗(yàn)的前提，此外配對t檢驗(yàn)顯示兩組數(shù)據(jù)之間差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。然后對這兩種免疫分析儀測定HCY的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析和偏倚評估，相關(guān)性分析顯示這兩種免疫分析儀測定HCY結(jié)果之間的相關(guān)系數(shù)為0.999 8，使用直線回歸分析，回歸方程為y= 0.984 6x-0.044 3，計(jì)算斜率為0.984 6，截距為-0.044 3，表明兩個(gè)儀器檢測結(jié)果之間的相關(guān)性很好。偏倚評估分析，兩種儀器檢測結(jié)果之間平均偏差為2.1%，其在兩個(gè)醫(yī)學(xué)決定水平濃度處的預(yù)計(jì)相對偏差分別為1.7%、1.6%。由此可見這兩臺全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀測定HCY的結(jié)果之間具有較好的相關(guān)性和一致性，達(dá)到了臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理的要求，同時(shí)也證明了這兩種儀器測定HCY的結(jié)果之間的預(yù)期誤差能被臨床接受。

[1]National Committee for Clinical Laboratory Standards.Method comparison and bias estimation using patient samples[S].2nd ed. Approved Guideline,EP92A2,2002.

[2]孫虹,臺虹,趙崇吉,等.不同生化分析系統(tǒng)間檢測結(jié)果的偏差評估及應(yīng)用[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2003,26(10)∶587-590.

[3]孫寧玲,秦獻(xiàn)輝,李建平,等.依那普利葉酸片固定復(fù)方與依那普利和葉酸自由聯(lián)合在H型高血壓人群中降低同型半胱氨酸的療效比較[J].中國新藥雜志,2009,18(17)∶1635-1640.

[4]Veland PM,Rcum H,Stabler SP,et al.Total homcysteine in plasma or serum methods and clinical applications[J].Clin Chem,1993,39 (9)∶1764-1779.

[5]劉毅,徐維家,薛邦祿,等.血漿半胱氨酸水平與腦卒中的關(guān)系研究[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2009,30(6)∶597-598.

[6]李忠,滕偉禹,魏艷花.腦梗死患者血漿同型半胱氨酸、葉酸、維生素B12水平的研究[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥,2009,16(15)∶60-61.

[7]楊振華.臨床實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理[M].北京∶人民衛(wèi)生出版社,2003∶143-146.

[8]邱玲,程歆,劉荔,等.多臺生化分析儀多項(xiàng)目同時(shí)進(jìn)行比對的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及應(yīng)用[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,30(9)∶1001-1004.

[9]房玉珠,姚冬明,顧紅兵,等.三種檢測系統(tǒng)測定血清電解質(zhì)的方法學(xué)對比與評估[J].江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2008,18(1)∶73-76.

Comparative analysis of detection results for homocysteine levels by two chemical luminescence immunity analyzers.

LU Min.Department of Clinical Laboratory,the First People's Hospital of Kunshan,Kunshan 215300,Yunnan,CHINA

ObjectiveTo explore the comparability of the results between different instruments in the same laboratory.MethodsForty patients were included.The HCY in serum was detected by ABBOTT I2000 and ABBOTT Axsym separately and the results were studied by correlation coefficient analysis.ResultsThe results showed that the correlation coefficient(r)was 0.9998 and its regression equation was y=0.9846x－0.0443.The expected relative deviations were 1.7%and 1.6%respectively at medical decision level.There was closely correlation between the results from the two different machines.ConclusionWhen different instruments are used to detect the same project in one lab,the correlation analysis and bias evaluation should be carried out to ensure the comparability and consistency of the different instruments.

Homocysteine;Comparative analysis;Bias assessment;ABBOTT I2000;ABBOTTAxsym

R446.6

A

1003—6350（2014）19—2866—03

2014-02-18)

陸敏。E-mail：lm8724@126.com

doi∶10.3969/j.issn.1003-6350.2014.19.1128