【摘要】目的對MAGLUMI分析儀檢測甘膽酸的分析性能進行評價并報告。方法按照國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會（ICSH）制定的評價標(biāo)準(zhǔn)進行。用普通促凝管采集早晨空腹靜脈血后分離血清，測試MAGLUMI分析儀的批內(nèi)重復(fù)性、日間重復(fù)性、攜帶污染率、準(zhǔn)確性及線性性能，并與上海日華γ技術(shù)儀測定結(jié)果進行相關(guān)分析。結(jié)果各參數(shù)皆符合ICSH的要求。MAGLUMI分析儀批內(nèi)、日間精密度的CV均<10%；攜帶污染率<5%；測定定值血清質(zhì)控物，準(zhǔn)確性滿意，線性良好；測定結(jié)果與放射免疫分析法結(jié)果相關(guān)性分析，r2=0.9946。結(jié)論MAGLUMI分析儀可直接用于對人血清中甘膽酸含量進行定量分析且批內(nèi)重復(fù)性、日間重復(fù)性、攜帶污染率、準(zhǔn)確性、線性及比較實驗均較好，報告結(jié)果準(zhǔn)確可靠。MAGLUMI分析儀是一種較理想的適用于判斷肝硬化程度和預(yù)后及提示孕婦羊水污染胎兒宮內(nèi)窘迫的檢測儀，值得推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】甘膽酸；MAGLUMI分析儀；性能評價

725文章編號：1004-7484（2014）-06-3576-02

甘膽酸參與機體內(nèi)許多生理、病理過程，測定甘膽酸的在人體血清中的含量，不僅可以有效鑒別慢性活動性肝炎和慢性遷延性肝炎，協(xié)助臨床判斷肝硬化程度和預(yù)后，且在提示羊水污染、早產(chǎn)、胎兒宮內(nèi)窘迫等方面有重要意義。目前，常采用化學(xué)發(fā)光和放射免疫分析兩種方法檢測甘膽酸含量。放射免疫分析法存在放射性核素易衰變以及放射性標(biāo)記物不穩(wěn)定，試劑有效期短，放射性核素易對周邊環(huán)境和實驗室造成污染的缺陷，MAGLUMI甘膽酸分析儀是國產(chǎn)的甘膽酸分析儀，可直接對血清中甘膽酸濃度進行快速簡便的定量檢測分析。最近，我們參照美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會（The Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI原NCCLS）的儀器性能驗證方法，參照美國臨床實驗室改進修正法案（Clinical Laboratory Improvement Amendment 88）簡稱CLIA’88法案為評價標(biāo)準(zhǔn)，對該儀器進行了分析性能評估，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1資料與方法

1.1儀器

1.1.1MAGLUMI2000分析儀深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程有限公司。

1.1.2上海日華γ技術(shù)儀上海核所日環(huán)光電儀器有限公司。

1.2試劑MAGLUMI2000分析儀相關(guān)配套試劑和碘[125I]甘膽酸放射免疫藥盒。

1.3樣品普通促凝管采集的空腹靜脈血經(jīng)離心所得血清，樣本均來自本院門診體檢者的空腹靜脈血；定值質(zhì)控由伯樂生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品（上海）有限公司（批號070130329）提供。

1.4MAGLUMI2000分析儀主要性能評估方法參照CLSI文件推薦的方法進行：

1.4.1批內(nèi)精密度按照CLSI的EP5-A文件的要求，選取新鮮血清，

取高、中、低值各20份，將高值的20份血清混勻為同一管，中值和低值的各20份同上混勻，將混勻后的高中低三管血清在MAGLUMI2000分析儀上各重復(fù)測定20次，得出甘膽酸的CV%。

1.4.2日間精密度按照CLSI的EP5-A文件的要求，選取新鮮血清，取高、中、低定值質(zhì)控物各一份，在MAGLUMI2000分析儀上測定，每天重復(fù)測兩次，取均值，共20天，得出甘膽酸的CV%。

1.4.3攜帶污染率按CLSI EP10-A文件要求，取新鮮血清，選取1個高值和1個低值標(biāo)本，先測高值標(biāo)本，重復(fù)測3次，得出H1、H2、H3；隨即測低值標(biāo)本，得出L1、L2、L3。根據(jù)公式：攜帶污染率=（L1-L3）/（H3-L3）×100%，計算MAGLUMI2000分析儀的攜帶污染率。

1.4.4線性分析按EP6-A文件的方法，對系統(tǒng)的線性進行驗證，將一高值的血清，用生理鹽水作100%、80%、60%、40%、20%、10%、5%不同濃度的稀釋，測定各項參數(shù)，使用EXCEL軟件計算測定值與理論值間的相關(guān)系數(shù)（r），要求r≥0.995。

1.4.5準(zhǔn)確性由深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程有限公司提供的定值質(zhì)控物，分別連續(xù)測3次，取平均值計算偏倚，偏倚=（測定均值-靶值）的絕對值/靶值×100%。

1.4.6甘膽酸含量對比試驗按照CLSI EP9-A的要求，①甘膽酸含量重復(fù)性：取1份新鮮血清標(biāo)本，分別用MAGLUMI2000分析儀和上海日華γ技術(shù)儀重復(fù)測定10次，分別得出甘膽酸的CV%；②相關(guān)性分析：取40份新鮮血清標(biāo)本，分別用MAGLUMI2000分析儀和上海日華γ技術(shù)儀測定，每份標(biāo)本2次測定間隔時間不超過5min。結(jié)果進行相關(guān)及直線回歸分析。

1.5統(tǒng)計學(xué)分析用EXCEL軟件進行統(tǒng)計分析，對比實驗數(shù)據(jù)比較用直線回歸分析。

2結(jié)果

2.1批內(nèi)與日間精密度見表1。測定結(jié)果表明，MAGLUMI2000分析儀對甘膽酸測定具有很高的精密度，批內(nèi)和日間精密度的CV均<10%，測定所得的變異系數(shù)達到CLIA’88規(guī)定的要求。

2.2攜帶污染率見表2。MAGLUMI2000分析儀攜帶污染率實際測定值均低于5%，完全滿足CLIA’88規(guī)定的要求。

2.3線性分析各項參數(shù)都隨濃度的稀釋而相應(yīng)減低，相關(guān)系數(shù)（r）均大于0.99，表3結(jié)果表明，評估選用的線性范圍與CLIA’88規(guī)定的要求基本一致，能滿足臨床需求。

2.4準(zhǔn)確性定值質(zhì)控物測得結(jié)果與其靶值及偏倚。在偏倚范圍內(nèi)，其準(zhǔn)確性可以接受。

2.5甘膽酸測定比對試驗①MAGLUMI2000分析儀與上海日華γ技術(shù)儀測定甘膽酸濃度重復(fù)性比對：MAGLUMI2000分析儀測定樣本的CV%分別為：6.5%；上海日華γ技術(shù)儀測定樣本的CV%為：7%；②MAGLUMI2000分析儀與上海日華γ技術(shù)儀測定甘膽酸含量相關(guān)性分析：結(jié)果見圖1。MAGLUMI2000分析儀與上海日華γ技術(shù)儀測定40份樣品測定結(jié)果比較：兩種方法測定的相關(guān)性很好，r2=0.9946。

3討論

甘膽酸（Cholylglycine）是膽酸與甘氨酸結(jié)合而成的結(jié)合膽酸，在血清中主要以蛋白結(jié)合形式存在，是主要膽酸之一，也是妊娠晚期血清中最主要的膽汁酸組分。測定甘膽酸在血清中的含量，不僅有助于臨床上鑒別慢性活動性肝炎和慢性遷延性肝炎，而且血清甘膽酸含量升高程度與肝硬化的病理發(fā)展進程呈正相關(guān)，是臨床判斷肝硬化程度和預(yù)后很好的指標(biāo)，若孕婦血清中甘膽酸水平顯著增高，則提示羊水污染、早產(chǎn)、胎兒宮內(nèi)窘迫及剖宮產(chǎn)的風(fēng)險率增大。目前，測定甘膽酸血清含量的方法主要有化學(xué)發(fā)光法和放射免疫分析法。不同的方法和不同種類的儀器，測得的甘膽酸含量也不盡相同?；瘜W(xué)發(fā)光法是目前應(yīng)用最廣泛的血清甘膽酸含量檢測方法。

我們對MAGLUMI2000分析儀的精密度、攜帶污染率、線性、準(zhǔn)確性及對比實驗進行了測定。結(jié)果顯示，MAGLUMI2000分析儀的線性好，基本上覆蓋正常及普遍的病理范圍，線性測定范圍廣；批內(nèi)和日間CV值<10%，在要求范圍內(nèi)，有較好的重復(fù)性；攜帶污染率<5%，不同標(biāo)本之間交叉污染小；MAGLUMI2000分析儀與上海日華γ技術(shù)儀測定結(jié)果比較，結(jié)果有較好的相關(guān)性及可比性。

MAGLUMI2000分析儀就是采用了化學(xué)發(fā)光免疫競爭法檢測甘膽酸濃度，化學(xué)反應(yīng)簡單，快速而無需催化劑，化學(xué)發(fā)光劑與待測抗原結(jié)合穩(wěn)定，易于實現(xiàn)自動化，具有快捷，簡單，靈敏，特異等特點，且相對于放射免疫分析法而言，避免了放射性核素易衰變及放射性標(biāo)記物不穩(wěn)定，試劑有效期短，易對周邊環(huán)境和實驗室造成污染的缺陷。不僅如此，放射免疫法檢測甘膽酸采用的是125I標(biāo)記物，有可能影響原物質(zhì)的免疫活性，且較容易發(fā)生輻射損傷而使標(biāo)記抗原變性，再者125I一般只能應(yīng)用6-8周，對商品化的試劑來說，其產(chǎn)品的貨架期較短，對標(biāo)本量相對較小的醫(yī)療單位而言，可造成試劑成本的浪費。最后，放射性廢物的儲存和銷毀，均會對環(huán)境造成一定的放射性污染。MAGLUMI2000分析儀檢測甘膽酸采用的是化學(xué)發(fā)光免疫競爭法，ABEI直接標(biāo)記抗原，結(jié)合穩(wěn)定，不影響標(biāo)記物的理化特性，標(biāo)記物穩(wěn)定性好，具有檢測靈敏度高，線性范圍寬，反應(yīng)時間短，易于實現(xiàn)自動化，簡便，特異性強等優(yōu)點，為臨床檢測甘膽酸濃度提供更方便，有效的手段。MAGLUMI2000分析儀不僅應(yīng)用于甘膽酸的檢測，也可應(yīng)用于各種激素，腫瘤標(biāo)志物，藥物及其他微量生物活性物質(zhì)的測定。MAGLUMI2000分析儀總體設(shè)計新穎合理，具有良好的技術(shù)性能，檢測靈敏度較高，操作簡單，同時該機數(shù)據(jù)處理快，及時提示異常情況，方便檢驗人員復(fù)查，是一種值得推廣使用的較理想的新型甘膽酸分析儀。

參考文獻

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