【摘要】目的通過觀察甲減大鼠治療前后動情期、受孕率及甲狀腺激素水平的變化，探討動情期、妊娠結局變化與甲狀腺激素水平之間的聯(lián)系。方法采用丙硫氧嘧啶建立甲減大鼠模型，觀察比較正常大鼠、甲減大鼠治療前后的動情期及妊娠結局的變化，發(fā)光免疫法測定各組大鼠血清中FT4、TPO-Ab、TSH的濃度變化。結果甲減組大鼠動情期紊亂，甲減組與正常組及甲減治療組比較，TPO-Ab、TSH水平升高，F(xiàn)T4水平呈下降趨勢，比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；正常組與甲減治療組比較TSH、TPO-Ab、FT4水平無明顯差異（P>0.05）；甲減組大鼠經(jīng)治療后有再次妊娠的機會。結論甲狀腺激素水平減低可引起大鼠動情期紊亂，同時可能是導致不孕的原因；甲減經(jīng)治療后妊娠結局有一定改善。

【關鍵詞】甲狀腺功能減退癥；動情期；大鼠；甲狀腺激素

063文章編號：1004-7484（2014）-06-3057-02

甲狀腺功能減退癥（hypothyroidism，簡稱甲減）是由各種原因導致的低甲狀腺激素血癥或甲狀腺激素抵抗而引起的全身性低代謝綜合征。國外報告的臨床甲減患病率為0.8%-1.0%，發(fā)病率為3.5/1000；我國學者報告的臨床甲減患者患病率是1.0%，發(fā)病率為2.9/1000。甲狀腺功能異?？捎绊懴虑鹉X-垂體-卵巢功能軸，過高過低均會造成排卵障礙或卵巢功能低下而導致不孕。

1材料與方法

1.1實驗材料

1.1.1實驗動物選用清潔級成年Wistar健康大鼠105只（雌性70只，均為初胎），周齡12-14周，體重200-240g，由山西醫(yī)科大學實驗動物中心提供。

1.1.2主要試劑及儀器丙硫氧嘧啶（Propylthiouracil Tablets）；左甲狀腺素（Levothyroxine Sodium Tablets）；FT4、TPO-Ab、TSH試劑盒；HE染色一系列試劑；電熱恒溫箱（美國SHEL.LAB2323型）；貝克曼DX1800微粒子化學發(fā)光分析儀。

1.2實驗方法

1.2.1實驗動物分組70只雌鼠，隨機取正常組10只，余60只造甲減模型，模型造好后隨即分為甲減組（30只），甲減治療組（30只）。大鼠在發(fā)情期按完全隨機分組法將雌性和雄性大鼠以2：1合籠過夜，次日清晨找到陰道脫落栓者為妊娠第一天。觀察1個妊娠周期（21天左右）。

1.2.2甲減大鼠模型的制備大鼠開始喂養(yǎng)，每天上午11：00喂服丙硫氧嘧啶（PropylthiouracilTablets）。采用0.1‰濃度丙硫氧嘧啶液，根據(jù)10ml/Kg體重，1日1次喂藥。

1.2.3陰道脫落細胞學檢查大鼠于實驗開始后每天15：00進行一次陰道脫落細胞學檢查，確保被選用大鼠均有正常動情周期。甲減大鼠模型造好后每天15：00進行一次陰道脫落細胞學檢查。甲減治療組在治療1個月后同前進行一次陰道脫落細胞學檢查。

1.2.4甲減大鼠的藥物治療給予喂5‰左甲狀腺素治療1個月。

1.3檢測指標及方法

1.3.1動情期的觀察方法：采用棉拭子制備陰道涂片，常規(guī)HE染色，光學顯微鏡下觀察陰道脫落細胞變化，看動情前期、動情間期、動情期、動情后期的變化。

1.3.2甲狀腺激素水平正常組、甲減組與甲減治療組大鼠均在合籠前尾靜脈采血，1500轉/分離心，獲取血清，保存于-20℃。FT4、TPO-Ab、TSH檢測采用貝克曼DXI800微粒子化學發(fā)光分析儀，檢測步驟完全按操作說明規(guī)范進行。

1.3.3比較各組受孕率。

1.4統(tǒng)計方法采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，統(tǒng)計學處理參數(shù)均采用χ±s表示，兩組間比較采用t檢驗，P<0.05為有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1陰道脫落細胞學的變化甲減大鼠光鏡下顯示大鼠動情周期紊亂化上皮細胞；D動情后期出現(xiàn)大量白細胞，混有少量角化上皮細胞。A1-D1，甲減組動情期示動情間期、后期延長，甚至無動情期。A2-D2甲減治療組動情期示正常的動情期。

2.2血清甲狀腺激素水平

2.2.1甲減組中FT4水平呈下降趨勢與甲減治療組及正常組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），正常組與甲減治療組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

2.2.2甲減組TSH、TPO-Ab水平呈上升趨勢與正常組及甲減治療組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），正常組與甲減治療組比較無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。

2.3正常組全部受孕甲減組25只大鼠受孕，受孕率為83.33%，甲減治療組中29只大鼠受孕，受孕率96.67%，甲減組大鼠受孕率小于甲減治療組。

3討論

甲狀腺功能異常的婦女容易發(fā)生月經(jīng)紊亂、不孕，在妊娠期，易并發(fā)各種疾病，如流產(chǎn)、胎盤早剝、妊娠期高血壓疾病等。目前我國還在不斷深入對甲狀腺疾病與不孕及妊娠的分析與研究，甲狀腺疾病一經(jīng)發(fā)現(xiàn)，即給予治療，故對甲狀腺疾病合并不孕及妊娠的流行病學及研究進展造成了一定的困難。且我國孕前檢查，缺乏對甲狀腺功能檢查的明確性，國內(nèi)外研究已表明不孕與甲狀腺疾病有關，故應引起重視。

本研究通過光鏡下觀察甲減不孕大鼠的動情周期變化，顯示甲減大鼠動情周期紊亂，動情間期、后期延長，甚至無動情期（圖A1-D1），治療后動情期恢復正常。正常大鼠動情周期包括：動情前期（此期相當于人類月經(jīng)周期的卵泡期），動情期（此期相當于排卵期，卵泡發(fā)育成熟并排卵），動情后期（此期相當于黃體期，黃體生成并逐漸成熟）和動情間期（此期相當于月經(jīng)期，黃體退化并向卵泡期轉換）。甲狀腺功能減退時，可影響下丘腦-垂體-卵巢軸，TH分泌減少，對促甲狀腺激素釋放激素（TRH）和TSH的反饋抑制作用減弱，可引起高泌乳素（PRL）血癥，使正常的卵泡發(fā)育及排卵所需的促性腺激素釋放激素（GnRH）的分泌節(jié)律改變，LH排卵峰延遲，黃體功能不足。Kakuno等發(fā)現(xiàn)輕中度甲狀腺功能減退患者月經(jīng)紊亂的發(fā)病率為10.2%，重度甲減患者為34.8%。Krassas等的研究表明甲減患者月經(jīng)紊亂的發(fā)生率為正常健康人群的3倍，以月經(jīng)稀發(fā)最為常見。

本研究通過喂0.1/1000的丙硫氧嘧啶（10ml/kg）成功構建了甲狀腺功能減退大鼠模型，通過發(fā)光免疫法測定正常組、甲減組及甲減治療組血清中FT4、TPO-Ab及TSH水平，給予左甲狀腺素片治療。甲減組中FT4水平呈下降趨勢，TPO-Ab、TSH呈上升趨勢，與正常組及甲減治療組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），正常組與甲減治療組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。這與上面正常組、甲減大鼠及甲減治療后動情期的變化方向相一致，表明甲減大鼠體內(nèi)甲狀腺激素水平的變化與動情期的變化存在著一定的聯(lián)系。Arojoki等的研究發(fā)現(xiàn)，TSH升高患者中出現(xiàn)排卵障礙比例達6.3%，而甲狀腺功能恢復正常后，甾體激素的代謝也隨之正常。

本研究還顯示甲減治療組大鼠的妊娠結局。甲減大鼠經(jīng)治療后，甲狀腺激素水平升高，受孕率升高，可有再次妊娠的機會。

4結論

甲狀腺激素水平減低時，可出現(xiàn)大鼠動情期間期、后期的延長，甚至無動情期，可能是導致不孕的原因之一；甲減經(jīng)治療后妊娠結局有一定改善。

綜上所述，甲狀腺激素水平可作為影響排卵及甾體激素水平的一項指標，育齡期婦女孕前檢查應常規(guī)進行甲功檢測，早期發(fā)現(xiàn)并治療甲狀腺功能減退，及早去除不孕及不良妊娠結局的高危因素。

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