【摘要】目的比較顯色培養(yǎng)基與傳統(tǒng)培養(yǎng)基在金黃色葡萄球菌(以下簡(jiǎn)稱金葡菌)中的檢出率。方法對(duì)245份食品樣品,采用同樣的增菌方法,每份樣品分別接種同樣數(shù)量的顯色平板,傳統(tǒng)培養(yǎng)基(指Baird-parker以下簡(jiǎn)稱B-P平板、血平板),觀察溶血情況,挑取疑似金葡菌菌落轉(zhuǎn)種BH肉湯和營(yíng)養(yǎng)瓊脂小斜面,再進(jìn)一步做血漿凝固酶試驗(yàn)。結(jié)果245份食品樣品中,顯色平板的金葡菌檢出率是0.82%(2/245),B-P平板和血平板的金葡菌檢出率均是8.57%(21/245),并且在顯色平板上生長(zhǎng)的金葡菌,在B-P平板和血平板上均能生長(zhǎng)。結(jié)論在金葡菌的培養(yǎng)與離中,傳統(tǒng)培養(yǎng)基(B-P平板、血平板)的檢出率明顯高于顯色平板。
【關(guān)鍵詞】顯色培養(yǎng)基;傳統(tǒng)培養(yǎng)基;金黃色葡萄球菌;檢出率
顯色培養(yǎng)基(chromogenic media)是一類利用微生物自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)顯色的原理來(lái)檢測(cè)微生物的培養(yǎng)基,這些相應(yīng)的顯色底物是由產(chǎn)色基因顯示一定的顏色,直接觀察菌落顏色即可對(duì)菌種作出鑒定。近幾年來(lái)發(fā)展迅速,應(yīng)用廣泛,在中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB4789的食品微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中,常見的食源性致病菌檢測(cè)如沙門氏菌、志賀氏菌、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌、阪崎腸桿菌等,均將相應(yīng)的顯色培養(yǎng)基列入國(guó)家食品安全標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法。但是金葡菌國(guó)家食品安全標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法,只將傳統(tǒng)培養(yǎng)基列入,而沒有將顯色培養(yǎng)基列入。為了解顯色培養(yǎng)基與傳統(tǒng)培養(yǎng)基在金葡菌檢驗(yàn)中檢出率,我們于2013年進(jìn)行了比較與分析,現(xiàn)報(bào)告如下:
1資料與方法
1.1樣品共計(jì)245份,包括甜品35份,乳制品23份,熟肉制品77份,盒飯70份,嬰幼兒食品30份,直飲水10份。
1.2主要儀器恒溫培養(yǎng)箱(上海實(shí)驗(yàn)儀器公司);高速分散均質(zhì)機(jī)(上海模型廠)。
1.3顯色培養(yǎng)基(國(guó)產(chǎn))血平板(鄭州安圖生物公司);7.5%Nacl肉湯、B-P培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、BHI肉湯、凍干血漿均由北京陸橋技術(shù)有限公司生產(chǎn)。
1.4金葡菌標(biāo)準(zhǔn)菌株,菌株號(hào)ATcc25923。
1.5檢驗(yàn)方法取均質(zhì)的樣品接種7.5%Nacl(肉湯中36℃±1℃培養(yǎng)18-24h后,每份樣品分別轉(zhuǎn)種金葡菌顯色平板、B-P平板、血平板各三個(gè),并且每種平板接種金葡萄標(biāo)準(zhǔn)菌株作為陽(yáng)性對(duì)照。經(jīng)36℃±1℃培養(yǎng)18-24h后,挑取可疑菌落涂片染色,轉(zhuǎn)種BHI肉湯和營(yíng)養(yǎng)瓊脂小斜面。再經(jīng)36℃±1℃培養(yǎng)18-24h后,進(jìn)行血漿凝固酶試驗(yàn),陽(yáng)性報(bào)告為檢出金葡菌。
2檢驗(yàn)結(jié)果
在245份食品類檢測(cè)樣品中,用顯色平板檢出2例金葡菌,檢出率是0.82%(2/245),用B-P平板和血平板均檢出21例金葡菌,檢出率是8.57%(21/245),并且在顯色平板上生長(zhǎng)的2例金葡菌,在B-P平板和血平板上均能生長(zhǎng),有19份樣品,用B-P平板和血平板均能培養(yǎng)出金葡菌,但用顯色平板未檢出。
3討論
金葡菌既是污染食品和引起食品物中毒的主要病原菌,也是引起化膿性炎癥、敗血癥及膿毒血癥的病原菌,所以,無(wú)論是國(guó)家食品安全標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法,還是醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法,以及化妝品微生物標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法,均將金葡菌列入必檢的微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目中,可見,金葡菌是一個(gè)相當(dāng)重要的衛(wèi)生指標(biāo)。傳統(tǒng)的金葡菌檢驗(yàn)方法,是金葡菌檢驗(yàn)的金標(biāo)準(zhǔn)。近幾年來(lái),隨著顯色培養(yǎng)基的迅速發(fā)展,普及使用,顯色培養(yǎng)基極大地提高了微生物檢測(cè)的工作效率,這是其最主要的優(yōu)勢(shì),但是,并不是所有細(xì)菌的顯色培養(yǎng)基的靈敏度和特異性能和傳統(tǒng)培養(yǎng)基相媲美的。從這次比較的結(jié)果來(lái)看,對(duì)同一批次的樣品,在同樣增菌的條件下,用顯色培養(yǎng)基對(duì)金葡菌的檢出率是0.82%(2/245),用傳統(tǒng)培養(yǎng)基的檢出率是8.57%(21/245),兩種培養(yǎng)基的檢出率有明顯的區(qū)別,假陰性問(wèn)題是金葡菌顯色培養(yǎng)基的主要問(wèn)題,這也是食品、化妝品、醫(yī)院消毒效果監(jiān)測(cè)等國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)沒有將顯色培養(yǎng)基列入標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法的重要原因。目前,微生物檢驗(yàn)工作正處在傳統(tǒng)培養(yǎng)基與顯色培養(yǎng)基使用的交匯處,檢測(cè)人員在選擇使用何種培養(yǎng)基時(shí),既要考慮工作效率,又要考慮培養(yǎng)基的靈敏度和準(zhǔn)確性。
參考文獻(xiàn)
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