摘要：目的 探討Ki-67及P53在前列腺腺泡腺癌（Pca）組織中的表達及意義。方法 采用免疫組織化學MaxvisonTM 方法檢測60例Pca與20例BPH（BPH）組織中Ki-67及P53的表達情況。結果 Ki-67及P53在Pca中陽性表達率均高于BPH，差異有統(tǒng)計學意義，Ki-67在不同分化程度的Pca組織中表達差異有統(tǒng)計學意義，而P53在不同分化癌組織中表達差異無統(tǒng)計學意義。結論 Ki-67在Pca中的表達與其Gleason分級相關，Ki-67可協(xié)助判斷Pca的分級及評估預后。

關鍵詞：前列腺腺泡腺癌；Ki67；P53；免疫組化

前列腺癌是男性泌尿生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，其中95%以上為前列腺腺泡腺癌，在美國其發(fā)病率居男性惡性腫瘤的第1位，死亡率僅次于肺癌。近年來我國前列腺癌的發(fā)病率和檢出率也呈明顯上升趨勢。目前最能反映Pca患者的預后是Gleason評分，而Pca的診斷尤其是Gleason分級是病理診斷的難點，研究表明Ki-67及P53在多種腫瘤組織中表達，與腫瘤的分化程度及患者的預后相關，其能否協(xié)助判斷Pca的分級及判斷患者預后，目前研究得不夠透徹，本研究將進一步分析，以期為Pca的診斷和分級及預后提供一定的依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2001～2010 年我院外科住院患者Pca存檔石蠟標本及HE切片共計60例，年齡50～101歲，平均年齡72歲。所有病例經(jīng)主任醫(yī)師確診，對于可疑的Pca采用免疫組化MaxvisonTM方法標記34βE12、P63、AMACR 輔助診斷及鑒別診斷。本研究中將相同Gleason級別的組織學結構作為一組進行研究，其中含有Gleason3級的25例，Gleason4級的30例，Gleason5級的38例。收集我院2010年間BPH的存檔HE切片及石蠟標本20例做對照研究，年齡59～83歲，平均年齡70歲。

1.2方法 所有試劑購自福州邁新生物科技有限公司，所有標本均經(jīng)10%福爾馬林固定，石蠟包埋 ，4μm切片，采用免疫組化MaxvisonTM方法檢測，實驗嚴格按照說明書操作。在本研究中，在低倍鏡下觀察細胞核表達較高的區(qū)域，換在400高倍鏡觀察，計數(shù)100個細胞核陽性表達數(shù)，陽性細胞占癌細胞數(shù)的百分比，以陽性細胞數(shù)≥3%定義為陽性。

1.3統(tǒng)計學方法 采用SPSS統(tǒng)計軟件，計數(shù)資料的組間的比較采用Chi-Square（χ2）檢驗，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義，P<0.01表示差異有高度統(tǒng)計學意義，P>0.05表示差異無統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 Pca中Ki-67的表達 Ki-67陽性蛋白產(chǎn)物定位于細胞核，為粗細不一的棕黃色顆粒，陽性細胞呈彌漫分布，陽性率大多在2%～10%，以陽性細胞數(shù)>3%定義為陽性，Ki-67在Pca、BPH組織中表達陽性率分別為（33/60）55%、（1/20）5%，兩組間比較差異有高度統(tǒng)計學意義（P<0.01），在Gleason3、4、5級別組中表達陽性率分別為（8/25）32%、（13/30）43.33%、（20/38）52.63%，隨著Glason分級的升高，Ki-67陽性率逐漸升高，組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

2.2 Pca中P53的表達 P53蛋白在癌細胞核陽性，呈黃色至棕黃色，在本項目中，P53細胞核陽性表達數(shù)率為1%～30%，大多在3%～10%，以大于3%為陽性。在Pca、BPH組織中的表達陽性率分別（21/60）35%、（2/20）10%，兩組間比較有顯著差異（P<0.01）。而P53在Gleason3、4、5級別組中表達陽性率分別為（7/25）28%、（10/30）33.33%、（15/38）39.37%，組間比較表達陽性率差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

3 討論

腫瘤的異質性是某些惡性腫瘤的特征之一。在組織形態(tài)方面，腫瘤的異質性表現(xiàn)為同一種腫瘤有多種不同組織結構的腫瘤細胞組成，Pca就是一種異質性明顯的腫瘤。大多Pca由多種組織學結構亞型交替重疊，由分化好的1級到未分化的5級，將腫瘤組織內占主要和次要組織結構的分級數(shù)相加得出Gleason評分，研究表明，Gleason評分與患者的預后有較好的相關性。因Pca由多種Gleason分級組織混合存在，在本研究不同于其他研究而是將相同Gleason級別的組織結構歸為一組進行研究。

本研究未將Gleason1～2級列入，因為，Gleaons1級腫瘤由均一圓形至卵圓形中等大小的腺體構成邊界清楚的腺瘤樣結節(jié)，腺體排列緊密，腺體之間的間質成分少，腫瘤不浸潤周圍良性前列腺組織，Gleason2級腫瘤邊界比較清楚，但邊緣有微小浸潤，腺體排列比較松散，腺體之間的間質成分開始增多，腺體大小形態(tài)也較不一致。本研究項目中Pca大多為穿刺標本，少數(shù)為經(jīng)尿道前列腺內鏡切除的標本，僅2例為手術切除標本，應用基底細胞標記抗體的免疫組織化學檢查后，未見Gleason1級組織結構，而穿刺活檢不能看到病變的邊界，穿刺標本中未能明確判斷Gleason2級組織，僅在2例經(jīng)尿道內鏡電切標本中有Gleason2級，因組織少范圍少，本組未納入研究。根據(jù)Helpap B報道[1]，當前穿刺活檢Gleason評分2～4分的比例從降至0%，同樣，在穿刺中Gleason5分也降至0.3%。

增殖細胞核抗原Ki-67是一種較為理想的評價細胞增生活性的標記物，在所有增殖細胞（正常及腫瘤）核的細胞周期表達，其表達隨細胞周期的不同而不同。國內外研究[2]發(fā)現(xiàn)Ki-67抗原與淋巴瘤、肺癌、消化道癌相關，且與腫瘤的分級和預后相關，陽性率與預后呈反比。多數(shù)學者研究證實[3-7]，Ki-67在前列腺癌中有明顯表達，與前列腺癌的分化程度相關，而在正常前列組織中不表達。研究表明[8]，Ki-67增殖指數(shù)與腫瘤的遠處轉移和疾病相關存活率有相關關系，當Ki-67增殖指數(shù)是≤3.5%和>3.5時，5年內腫瘤遠處轉移的風險由顯著性差異。本研究結果顯示，Ki-67 在前列腺腺泡癌中表達顯著高于BPH，在高級別前列腺癌中表達高于低級別的前列腺癌，說明Ki-67能為前列腺癌的診斷和預后提供依據(jù)。

P53基因位于人類第17號染色體短臂上，分為野生型和突變型P53，野生型P53的半衰期短，突變型P53半衰期長，在腫瘤組織中用免疫組織化學檢測到的是突變型P53蛋白的表達。野生型P53能抑制細胞的增殖，監(jiān)視損傷和誘導細胞凋亡，是一種抑癌基因。在多種腫瘤和癌家族中，P53蛋白突變時腫瘤形成的重要原因。許多研究[3，5]表明，在前列腺癌中P53蛋白的表達的陽性率高于前列腺增生組織，其在前列腺癌中的表達與前列腺癌的分級無關，與本研究結果基本一致。有研究表明，P53表達陰性的前列腺癌的預后比陽性的要好。本研究結果顯示P53 尚不能做為前列腺癌預后的指標。

綜上所述：增殖細胞核抗原Ki-67可作為Pca輔助分級診斷和判斷預后的分子標記物，其在前列腺各種級別組織中的表達有待更大樣本量的進一步研究。

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