摘要：由于食品工業(yè)的迅速發(fā)展，食品添加劑在食品加工方面扮演著越來(lái)越重要的角色。如何確保食品添加劑的安全性問(wèn)題，如何加強(qiáng)對(duì)食品安全的檢測(cè)和鑒定，也成為了社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)問(wèn)題。本文通過(guò)對(duì)檢測(cè)方法的優(yōu)化，將國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的不同檢測(cè)方法測(cè)定的五種食品添加劑進(jìn)行一次性測(cè)定，提高了食品質(zhì)量監(jiān)督工作的效率。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜 食品添加劑 食品安全

中圖分類號(hào)：TS202文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-5336（2014）14-0036-03

1 快速檢測(cè)方法的提出

在食品質(zhì)量監(jiān)督工作中，由于同一種食品一般含有多種食品添加劑，因此在對(duì)食品進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，往往需要進(jìn)行多次檢測(cè)，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，而且容易發(fā)生漏檢的情況，降低了檢驗(yàn)工作的工作效率，不利于加強(qiáng)對(duì)食品添加劑的控制。本文利用高效液相色譜儀，可以實(shí)現(xiàn)在同條件下的五種常見(jiàn)食品添加劑的同時(shí)檢測(cè)，如此可以使檢測(cè)的周期縮短，滿足消費(fèi)者的需求，方便了檢測(cè)機(jī)構(gòu)的檢驗(yàn)工作，使產(chǎn)品質(zhì)量得到了更好地控制，同時(shí)也能極大降低漏檢情況發(fā)生的可能性。

2 檢測(cè)準(zhǔn)備

2.1 檢測(cè)儀器

氮吹儀，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；壓縮空氣機(jī)；FID檢測(cè)器；HP——`5毛細(xì)管柱；高效液相色譜儀；二極管陣列檢測(cè)器；自動(dòng)進(jìn)樣器；超聲波振蕩儀；反相色譜柱。

2.2 實(shí)驗(yàn)樣品和試劑

超純水（18MΩ.cm），219g/L乙酸鋅溶液，20g/L NaHCO3溶液，106g/L亞鐵氰化鉀溶液，0.02mol/L乙酸銨，甲醇（HPLC）。苯甲酸、糖精鈉、安賽蜜、山梨酸，脫氫乙酸，尼泊金乙醋、丙酯，乙醚，丙酮，10g/L碳酸氫鈉溶液，1g/100mL碳酸氫鈉溶液。

3 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

3.1 儀器條件

DiamonsilC185μm250x4.6nnn反相色譜柱，檢測(cè)波長(zhǎng)：230nn，流速：1.0ml/min；流動(dòng)相：0.02mol/L NH4As+甲醇梯度洗脫，柱溫：35℃；進(jìn)樣量為：20μL。

3.2 樣品前處理方法

對(duì)于液體樣品，要取用適量，使用超聲進(jìn)行脫氣，將酸堿度控制在6—7左右之后，選用蒸餾水進(jìn)行稀釋操作，對(duì)于含有蛋白質(zhì)的液體樣品，要沉淀蛋白質(zhì)，可以在定容之前，使用少量的亞鐵氰化鉀及乙酸鋅做沉淀劑使蛋白質(zhì)沉淀，最后使用0.45μm的濾膜進(jìn)行過(guò)濾操作，得到濾液；對(duì)于固體樣品，首先需要切碎樣品，不含或者含蛋白質(zhì)較少的固體樣品，可以在切碎后直接使用蒸餾水溶解、定容，按照實(shí)驗(yàn)檢測(cè)要求稀釋到相應(yīng)倍數(shù)，經(jīng)過(guò)濾后收集濾液。對(duì)于含蛋白質(zhì)較多的樣品，將固體溶解后，需要執(zhí)行與液體相同的操作，即先沉淀蛋白質(zhì)后過(guò)濾，獲得濾液。

4 實(shí)驗(yàn)環(huán)境的選擇

4.1 色譜柱的選擇

由于我們檢測(cè)的樣品通常溶于水相體系，所以我們選擇DiamonsilC185μm250x4.6nnn反相色譜柱進(jìn)行分析。

4.2 選擇檢測(cè)波長(zhǎng)

我們通過(guò)光電二極管陣列檢測(cè)器，得到檢測(cè)的5種食品添加劑的光譜圖分別如圖4.1-圖4.5所示。

以圖4.1-圖4.5可見(jiàn)安賽蜜在229nm處出現(xiàn)最大吸收峰；苯甲酸在227nm處出現(xiàn)最大吸收峰；山梨酸在257nm處出現(xiàn)最大吸收峰；糖精鈉在最大吸收峰在216nm處出現(xiàn)最大吸收峰；脫氫乙酸在234nm處出現(xiàn)最大吸收峰。根據(jù)這些數(shù)據(jù)可發(fā)現(xiàn)這幾種樣品在檢測(cè)波長(zhǎng)230nm處相對(duì)都比較靈敏，因此，我們可以考慮使用230nm作為同時(shí)進(jìn)行5種食品添加劑檢測(cè)的檢測(cè)波長(zhǎng)。這樣可以簡(jiǎn)化工作量，簡(jiǎn)短檢測(cè)時(shí)間，降低漏檢發(fā)生頻率，便于加強(qiáng)對(duì)食品安全的監(jiān)督工作。

4.3 流動(dòng)相比例的選擇

根據(jù)國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，選擇乙酸銨與甲醇作為流動(dòng)相。有關(guān)數(shù)據(jù)表明，前17分鐘流動(dòng)相等度洗脫以比例（19+9）混合，17至25分鐘進(jìn)行梯度洗脫，流動(dòng)相在（75+25）的比例比較適合。試驗(yàn)譜圖見(jiàn)圖4.6。

4.4 柱溫的選擇

液相色譜檢測(cè)器受溫度影響不大，但為了提高精確度，降低噪音，此次實(shí)驗(yàn)選擇柱溫在35℃。

4.5 液體流速的選擇

流動(dòng)相的流速會(huì)影響被分析對(duì)象的保留時(shí)間、靈敏度、分離度等。流速過(guò)慢會(huì)延長(zhǎng)出峰時(shí)間，容易造成峰變形，出現(xiàn)拖尾峰，而流速過(guò)高，又會(huì)對(duì)系統(tǒng)產(chǎn)生壓力，所以綜合考慮，為了保證能夠較好實(shí)現(xiàn)分離，我們選擇流速在1.0mL/min。

4.6 進(jìn)樣量和進(jìn)樣時(shí)間的選擇

為避免柱過(guò)載的發(fā)生，進(jìn)樣量應(yīng)控制在峰高或峰面積與進(jìn)樣量呈線性關(guān)系的范圍內(nèi)，而不宜過(guò)大，否則極易造成重疊峰、平頂峰等現(xiàn)象，影響實(shí)驗(yàn)分析，同時(shí)還容易對(duì)柱子造成污染，降低柱效；而當(dāng)進(jìn)樣量太小時(shí)，又可能造成不能出峰的問(wèn)題。因此，根據(jù)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，我們選擇進(jìn)樣量在5到20匹之間。此次實(shí)驗(yàn)我們選定20匹。

5 結(jié)果與討論

5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定

對(duì)于能夠溶于水的安賽蜜，糖精鈉，山梨酸，分別稱取各0.1000g，使用蒸餾水進(jìn)行溶解，之后使用100mL容量瓶定容，獲得1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液；對(duì)于不能溶于睡的苯甲酸和脫氫乙酸，在分別稱取樣品0.1000g后，使用5mL碳酸氫鈉溶液（20g/L）進(jìn)行加熱溶解，之后，再將溶解得到的溶液轉(zhuǎn)移到100rnL容量瓶中進(jìn)行定容，配制成1mg/mL的儲(chǔ)備溶液；分別吸取部分各儲(chǔ)備溶液，稀釋得到0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.04mg/mL以及0.05mg/mL的使用液，然后測(cè)定這些混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。我們選取x軸表示質(zhì)量濃度，y軸表示峰面積，可以得到相應(yīng)的線性回歸方程。如圖 5.1～5.5所示。

5.2 儀器的靈敏度和穩(wěn)定性

隨著濃度的升高，到達(dá)一定程度時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)曲線會(huì)出現(xiàn)明顯衰減，這就說(shuō)明高濃度和低濃度的線性規(guī)律并不相同，所以標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制應(yīng)該根據(jù)實(shí)際情況具體來(lái)制作。本文根據(jù)具體情況繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性相關(guān)系數(shù)都在0.9990以上。儀器有相對(duì)較高的靈敏度，檢出限比較低，液相測(cè)尼泊金乙醋，丙酷，安賽蜜，糖精鈉，山梨酸，苯甲酸，脫氫乙酸分別為0.0012，0.0018， 0.0002，0.0005，0.0002，0.0001，0.0022mg/kg，完全滿足實(shí)驗(yàn)分析的要求。

6 優(yōu)勢(shì)分析

氣相法進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí)，需要經(jīng)過(guò)繁瑣的前處理，步驟繁多，從而影響回收率，尤其是對(duì)于固體樣品，帶來(lái)的影響更大。而本文將原本根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用氣相法檢測(cè)的脫氫乙酸，經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)和優(yōu)化，與日常檢測(cè)中經(jīng)常遇到的食品添加劑同時(shí)處理檢測(cè)，如此可以提高效率。而且對(duì)于脫氫乙酸來(lái)說(shuō)，使用國(guó)標(biāo)通用的氣相色譜法的回收率僅僅在80%左右，而本文中的方法回收率能達(dá)到90%以上，而且方便快捷。

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