【摘 要】 目的 細(xì)胞周期素D和細(xì)胞周期素E的異常表達(dá)經(jīng)常會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞周期調(diào)節(jié)出現(xiàn)異常的情況，最終引發(fā)腫瘤。方法 為了闡釋這些細(xì)胞周期素基因在人體的胃癌發(fā)生以及發(fā)展過(guò)程中的作用，本文對(duì)我院于2012年10月至2013年6月收治的108例胃癌患者、47例胃癌患者的第一代親屬實(shí)驗(yàn)者及52例健康參照者的病理組織學(xué)表現(xiàn)進(jìn)行觀察，例如：腸化生、萎縮、HP感染及胃炎的情況進(jìn)行了細(xì)胞周期素基因表達(dá)的研究，采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)的方法。結(jié)果 胃癌組織中細(xì)胞周期素D2以及D3和E的表達(dá)同癌旁正常組織相比具有明顯的增高趨勢(shì)，并且細(xì)胞周期素D2和D3的增高表達(dá)在胃癌的第一代親屬中（P<0.05）也有所發(fā)現(xiàn)。隨著不同病理組織學(xué)的改變，腸化生組織細(xì)胞周期素D2、D3和E的表達(dá)也顯著增高，胃粘膜萎縮只有細(xì)胞周期素D3的表達(dá)增高，HP感染同未感染組相比較細(xì)胞周期素D2、D3的表達(dá)增高。但是細(xì)胞周期素D1的表達(dá)狀況同病理組織學(xué)的改變沒(méi)有直接的關(guān)系。結(jié)論 本研究顯示增高的細(xì)胞周期素D2、D3和E是在胃癌發(fā)生病變過(guò)程中的一個(gè)十分常見(jiàn)的事件并且通常發(fā)生在胃癌的早期，此外研究還表明基因的異常表達(dá)可能出現(xiàn)于胃癌患者的第一代親屬中。細(xì)胞周期素D1的表達(dá)同胃癌病變過(guò)程中所出現(xiàn)的臨床以及病理學(xué)的變化并沒(méi)有明顯的關(guān)系。

【關(guān)鍵詞】 細(xì)胞周期素基因；胃癌患者；表達(dá)分析

【中圖分類(lèi)號(hào)】 R735.2 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 B

胃癌的發(fā)生是一個(gè)十分復(fù)雜的過(guò)程，這個(gè)過(guò)程要受到很多因素的影響，并且可以分成不同的階段，在這個(gè)過(guò)程中極易發(fā)生基因變異的現(xiàn)象。通過(guò)現(xiàn)有的研究可知，胃癌的發(fā)生不但是由原有癌基因的激活以及抑制癌基因的失活造成細(xì)胞的異常分化，還會(huì)受到細(xì)胞周期素以及抑制凋亡基因等多種因素的影響。本文通過(guò)對(duì)細(xì)胞周期素基因在胃癌患者以及其第一代親屬中的表達(dá)進(jìn)行分析，探討了細(xì)胞周期素在胃癌發(fā)生以及發(fā)展的過(guò)程中的作用以及產(chǎn)生的意義[1]。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取了我院于2012年10月至2013年6月收治的108例胃癌患者、47例胃癌患者的第一代親屬及52例健康參照者進(jìn)行了對(duì)比和研究。108例胃癌患者中有男患者60例，女患者48例，年齡在35歲至73歲之間，年齡中位數(shù)為54歲。47例胃癌的第一代親屬中有男患者25例，女患者22例，年齡在38歲至76歲之間，年齡中位數(shù)為57歲。52例健康參照者中有男患者25例，女患者27例，年齡在40歲至72歲之間，年齡中位數(shù)為56歲。這三組實(shí)驗(yàn)對(duì)象在性別和年齡等方面并不存在較大的差異P>0.05，因此沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 方法 在進(jìn)行細(xì)胞周期素基因蛋白的檢測(cè)時(shí)，首先需要做4微米厚的切片，按照ABC的方法進(jìn)行S-P的染色，所謂的ABC指的就是親和素-生物素辣根過(guò)氧化物酶復(fù)合物。然后再將組織切片用二甲苯進(jìn)行脫蠟，之后浸入0.088mol/L的過(guò)氧化氫之中，浸泡三十分鐘，這樣可以將內(nèi)源性氧化酶的活性加以阻斷。此外為了能夠?qū)⒖乖浞值乇┞冻鰜?lái)，可以將切片放入到0.01mol/L，PH值為6.5的檸檬酸緩沖液之中，并且將緩沖液加熱到100℃，浸泡三十分鐘。再經(jīng)過(guò)細(xì)胞周期素E單克隆抗體在4℃的條件下孵育12個(gè)小時(shí)，在室溫的條件下進(jìn)行切片，同兔抗鼠血清進(jìn)行20分鐘的反應(yīng)，在同酸性磷酶復(fù)合物進(jìn)行15分鐘的反應(yīng)。之后進(jìn)行2分鐘的過(guò)氧化氫DAB顯色，利用蘇木精進(jìn)行1分鐘的復(fù)染、脫水、透明以及封片，最后對(duì)結(jié)果進(jìn)行觀察和判定，將已知的陽(yáng)性反應(yīng)片當(dāng)作陽(yáng)性對(duì)照[2]。

1.3 臨床觀察 細(xì)胞周期素D2、D3和E的蛋白染色陽(yáng)性都是在細(xì)胞核中出現(xiàn)顆粒，這些顆粒呈現(xiàn)出棕黃褐色，對(duì)每例切片都進(jìn)行隨機(jī)的選取，選取了5個(gè)高倍視野來(lái)進(jìn)行結(jié)果的判定。按照染色的強(qiáng)度以及陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量在腫瘤細(xì)胞總數(shù)中所占的百分比來(lái)進(jìn)行綜合的計(jì)分。染色強(qiáng)度中無(wú)色計(jì)0分，淡黃色計(jì)1分，棕黃色計(jì)2分，棕褐色計(jì)3分。陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)如果小于癌細(xì)胞總數(shù)的5%那么則計(jì)0分，在5%至25%之間則計(jì)1分，26%至50%之間則計(jì)2分，在50%以上則計(jì)3分。然后再將染色強(qiáng)度的得分同陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)的得分進(jìn)行相乘，如果得分為0分，那么則為陰性，如果得分為1至3分，那么則為弱陽(yáng)性，如果得分為4至5分，那么則為中度陽(yáng)性，如果得分超過(guò)了6分，那么則可以計(jì)為強(qiáng)陽(yáng)性[3]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本組研究采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包對(duì)實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理，計(jì)數(shù)資料采用（n，%）表示，采用卡方檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用均數(shù)±平均數(shù)（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果 詳見(jiàn)表1。

細(xì)胞周期素D2以及D3和E蛋白在胃癌組織中的表達(dá)有101例，在癌旁組織中的表達(dá)為93例，這兩組細(xì)胞周期素的蛋白的陽(yáng)性率進(jìn)行比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)的意義（P<0.05）。在高分化腺癌中細(xì)胞周期素基因的表達(dá)主要是在細(xì)胞核之中，并且呈現(xiàn)出灶性或者是彌漫性的一種分布趨勢(shì)。在低分化腺癌中細(xì)胞周期素基因的表達(dá)主要出現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)當(dāng)中，也呈現(xiàn)出灶性或者是彌漫性的分布趨勢(shì)。而癌旁組織中細(xì)胞周期素基因的表達(dá)同樣主要也是在細(xì)胞質(zhì)當(dāng)中，呈現(xiàn)灶性或者是彌漫性的分布。

3 討論

在細(xì)胞周期素基因當(dāng)中，Cyclin E蛋白是一個(gè)十分重要的細(xì)胞周期素，同時(shí)也是一個(gè)十分典型的細(xì)胞周期素，它會(huì)受到細(xì)胞內(nèi)外的信號(hào)傳導(dǎo)以及反饋環(huán)路的調(diào)節(jié)和控制。當(dāng)前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了有10中細(xì)胞周期素都可以作用于細(xì)胞周期。Cyclin E屬于一種核蛋白，最初它是從釀酒酵母菌中提取出來(lái)的，在G1中期開(kāi)始逐漸出現(xiàn)了表達(dá)升高的趨勢(shì)，在G1晚期達(dá)到了表達(dá)的高峰，而當(dāng)細(xì)胞進(jìn)入到S期之后，表達(dá)開(kāi)始呈現(xiàn)出下降的趨勢(shì)，到了G2/M的時(shí)期則下降為0。Cyclin E基因的異常表達(dá)主要是表現(xiàn)為表達(dá)的過(guò)度，并且它可能在整個(gè)的細(xì)胞周期中都出現(xiàn)，此外Cyclin E的異常表達(dá)還可以將細(xì)胞的體積進(jìn)行縮小，從而減少對(duì)生長(zhǎng)因子的需要，這也可以看作是腫瘤細(xì)胞增殖的一種標(biāo)志[4，5]。

綜上所述，細(xì)胞周期素D2、D3和E基因在胃癌患者及其第一代親屬當(dāng)中都有所表達(dá)。但是細(xì)胞周期素D1的表達(dá)同胃癌病變過(guò)程中所出現(xiàn)的臨床以及病理學(xué)的變化并沒(méi)有明顯的關(guān)系。

參考文獻(xiàn)

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