【摘要】目的:探討婦科千金片治療盆腔炎的作用機制。方法:選用Wistar大鼠,行子宮內(nèi)接種混合菌液造急性盆腔炎模型。將大鼠隨機分為空白組、假手術(shù)組、模型組、婦科千金片低、中、高劑量組、婦炎康組、羅紅霉素組,藥物治療后,取子宮組織,采用超微電鏡觀察組織病理變化。結(jié)果:正常組、假手術(shù)組的子宮內(nèi)膜細胞超微結(jié)構(gòu)正常;模型組的子宮內(nèi)膜上皮細胞脫落、壞死、變性、纖維增生;婦科千金片低、中劑量組的子宮內(nèi)膜上皮細胞水腫、脫落、壞死,纖維增生。婦科千金片高劑量組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞線粒體水腫、空泡化外,均正常。婦炎康組子宮內(nèi)膜上皮脫落、膠原纖維增生、間質(zhì)細胞胞漿水腫、細胞萎縮、粘膜下層細胞線粒體廣泛空泡化;羅紅霉素組子宮內(nèi)膜細胞超微結(jié)構(gòu)基本正常。結(jié)論:婦科千金片對盆腔炎模型大鼠均有一定的治療作用。
【關(guān)鍵詞】婦科千金片;急性盆腔炎;超微結(jié)構(gòu)
婦科千金片對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌和白色念珠菌均有抑菌作用,對環(huán)磷酰胺所致免疫低下的小鼠,具有增加小鼠血清溶血抗體、提高小鼠細胞吞噬百分率和吞噬指數(shù)的作用[1]。為了進一步探討其藥理作用, 我們運用超微電鏡觀察組織病理變化。將婦科千金片對大鼠盆腔炎模型子宮內(nèi)膜細胞超微結(jié)構(gòu)的影響進行了實驗研究, 現(xiàn)將結(jié)果報告如下。
1.1 實驗動物 雌性Wistar大鼠120只,體重180~220g,鼠齡8周,由上海西普爾—必凱實驗動物有限公司提供(SPF級,合格證號2008-0016),每籠圈5只。
1.2造模及分組 將實驗大鼠分別稱重,腹部常規(guī)消毒,10%烏拉坦按0.075ml/kg體重,大鼠腹腔注射,待大鼠麻醉后,用1ml注射器針頭抽取0.2ml含3×109個/ml的混合菌液(此混合菌液由金黃色葡萄球菌、大腸桿菌,解脲脲原體),左手持鼠尾提起大鼠,用10ml注射器的針頭于陰道底部的子宮頸分叉處小心進入一側(cè)宮腔內(nèi),針頭宮腔內(nèi)來回抽拉2次,然后朝卵巢方向推注菌液0.1ml,同樣操作步驟將0.lml菌液注入另一側(cè)子宮,注射完畢后,明膠海綿放置于陰道底部的子宮頸,以防菌液漏出。假手術(shù)組,手術(shù)操作同上,但針頭進入子宮后不來回抽動,注射等量0.9%生理鹽水,空白組不予任何處理。
大鼠造模造模術(shù)后第4天隨機分為正常組、假手術(shù)組各10只,模型組、婦科千金片低、中、高劑量組、婦炎康組、羅紅霉素組各9只。按大鼠與人等效劑量換算方法計算出各大鼠給藥劑量,各藥均配成10ml/kg給藥溶液,每天定時經(jīng)口灌胃給藥治療,每日1次,連續(xù)21天。
1.3 收集標本
給藥結(jié)束后的第2天,以10%烏拉坦0.075ml/kg 腹腔注射麻醉。取大鼠子宮組織稱重,用2.5%戊二醛固定,4℃冰箱保存,供電鏡觀察子宮內(nèi)膜組織的超微結(jié)構(gòu)。
1.4 檢測方法
大鼠子宮內(nèi)膜超微結(jié)構(gòu)的電鏡標本制作程序:子宮組織用2.5%戊二醛固定24小時,2%鋨酸2小時,50%、70%、90%、100%丙酮梯度脫水,每級10分鐘,純環(huán)氧樹脂包埋劑(Epon812、MNA、DMP-30、DDSA)包埋成塊,60℃修塊定位,超薄切片(厚度為500A°),電子染色,透射電鏡觀察子宮內(nèi)膜組織的超微結(jié)構(gòu),拍照。
2 結(jié)果與分析
電鏡觀察結(jié)果:正常組子宮內(nèi)膜上皮柱狀排列、皮下固有層正常,微絨毛正常;假手術(shù)組子宮內(nèi)膜上皮細胞、皮下固有層正常;模型組子宮內(nèi)膜上皮細胞脫落、壞死、變性、纖維增生;婦科千金片低劑量組子宮內(nèi)膜上皮細胞水腫、脫落、壞死,纖維增生;中劑量組子宮內(nèi)膜上皮有少量微絨毛、間質(zhì)細胞水腫;高劑量組子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞線粒體水腫,空泡化外,均正常;婦炎康組子宮內(nèi)膜上皮脫落、膠原纖維增生、間質(zhì)細胞胞漿水腫、細胞萎縮、粘膜下層細胞線粒體廣泛空泡化;羅紅霉素組子宮粘膜下層、腺體及間質(zhì)細胞正常。
3 討論
正常大鼠子宮內(nèi)膜上皮的超微結(jié)構(gòu):上皮細胞呈柱狀,形態(tài)規(guī)則、一致,細胞排列整齊,細胞基底面位于基底膜上,細胞頂部圍成腺腔;分泌細胞頂部呈圓頂狀,游離面的微絨毛短少且直、直徑大小一致,頂部胞質(zhì)中可見較多大小不一的電子致密顆粒;纖毛細胞游離面的纖毛短而少,結(jié)構(gòu)典型,纖毛的基底小體位于頂部胞質(zhì)內(nèi);胞質(zhì)內(nèi)線粒體為卵形或長形;粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分散,其池短而窄;細胞核規(guī)則,呈卵圓形,位于細胞中部,輪廓平滑;核仁明顯,呈網(wǎng)線狀;核質(zhì)著色淡、均勻?;啄ね暾?、清晰,較平直[2] 。有研究盆腔炎模型大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞的超微結(jié)構(gòu):微絨毛明顯大量脫失,黏膜上皮明顯變薄,柱狀上皮矮平,線粒體及粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)減少,糖原顆粒明顯減少,胞核雙層膜結(jié)構(gòu)局部融合,黏膜下炎細胞浸潤[3]。
本研究模型組大鼠的子宮的內(nèi)膜上皮細胞脫落、壞死、變性、纖維增生,顯示模型成功。婦科千金片高劑量組及羅紅霉素組的子宮內(nèi)膜上皮細胞均較模型組有所好轉(zhuǎn),顯示婦科千金片對大鼠急性急性盆腔炎有一定的治療作用。至于婦炎康對大鼠急性盆腔炎子宮內(nèi)膜上皮細胞的作用不明顯,尚有待擴大樣本,進一步研究。
參考文獻:
[1] 張祖蕩,潘善慶.婦科千金片的藥效學研究.湖南中醫(yī)雜志[J].1998,14(2):57。
[2] 張延齡.細胞凋亡與外科.國外醫(yī)學外科學分冊[J].1998,25(l):2-4。
[3] 王歷,李秀明. 桃核承氣湯治療熱郁血瘀型盆腔炎大鼠的實驗研究[J].2007,35(5):30-31。