摘要:果膠是植物中的一種酸性多糖物質,具有水溶性,在食品上用作膠凝劑,增稠劑,穩(wěn)定劑,懸浮劑等。目前,國內外尚未出臺關于蜂產品中果膠含量測定的相關標準。本文綜合其他類產品現(xiàn)有的關于果膠含量的測定方法,研究用咔唑-半乳糖醛酸比色法測定蜂蜜中果膠含量,從準確度、精密度等因素討論其對蜂蜜產品的適用性。文章著重討論咔唑-半乳糖醛酸比色法對蜂蜜中果膠含量測定的適用性,通過試驗得出結論,該方法準確度高,精密度好,適用于摻假蜂蜜中果膠含量的測定,可以應用于常規(guī)檢驗,提供數(shù)據(jù)可靠。
關鍵詞:蜂蜜 果膠 咔唑-半乳糖醛酸比色法
中圖分類號:S896.1 文獻標識碼:A 文章編號:1672-5336(2014)22-0030-02
蜂蜜是一種營養(yǎng)豐富的天然滋養(yǎng)食品,也是最常用的滋補品之一。由單糖類的葡萄糖和果糖構成,可以被人體直接吸收,而不需要酶的分解。據(jù)分析,蜂蜜含有與人體血清濃度相近的多種無機鹽和維生素、鐵、鈣、銅、錳、鉀、磷等多種有機酸和有益人體健康的微量元素,以及果糖、葡萄糖、淀粉酶、氧化酶、還原酶等,具有滋養(yǎng)、潤燥、解毒、美白養(yǎng)顏、潤腸通便之功效,是婦、幼、特別是老年人的滋補佳品。我國早在唐朝經濟繁榮時期,蜂蜜產業(yè)就得以發(fā)展?,F(xiàn)階段,隨著國民生活水平的提高,蜂蜜成為更多消費者青睞的營養(yǎng)品。但是蜂蜜市場假貨泛濫,有些不法商販為了利益更大化,以次充好,在蜂蜜中添加果膠等增稠劑,改變蜂蜜原有的感官性狀,蒙騙消費者。
1 實驗部分
1.1 原理
果膠是一種植物膠,用乙醇作為沉淀劑,可使其沉淀分離。其水解產物——半乳糖醛酸在強酸中與咔唑發(fā)生縮合反應,生成紫紅色化合物,其顏色深淺與含量成正比,可對其溶液進行比色定量。
1.2 儀器與試劑
1.2.1 儀器
電子天平(0.0001g)、紫外-可見分光光度計(0.001)、恒溫水浴鍋(±1℃)、離心機。
1.2.2 試劑
乙醇溶液:95%乙醇、63%乙醇水溶液。
濃硫酸。
氫氧化鈉水溶液:1mol/L。
咔唑溶液:0.1%咔唑乙醇溶液。
1.3 分析步驟
1.3.1 沉淀果膠及提取液的制備
稱取15g左右蜂蜜置于200ml燒杯中,加入95%熱(75℃)乙醇溶液100ml,在85℃水浴中加熱10min,充分攪拌提取。將懸浮液置于離心管中,于6000-8000r/min離心10-15min,棄去上清液。在85℃水浴上用63%乙醇洗滌沉淀。離心分離,棄去上清液。上述步驟反復操作,直至清液中不再產生糖反應為止。
將以上步驟制備出的果膠沉淀,全部洗入100ml容量瓶中。加入5ml1mol/L氫氧化鈉溶液,用水稀釋至刻度,混勻。至少放置15min,并不時搖蕩。過濾后,濾液用于比色測定。
1.3.2 比色測定
(1)取1ml提取液于大試管(25×200mm)中,加入 0.5ml0.1%咔唑乙醇溶液,并產生白色絮狀沉淀,不斷搖動試管,再加入6ml濃硫酸。立刻將試管放入85℃水浴里10min,再使之冷卻15min。然后立刻用分光光度計在525nm波長處,用1cm比色皿測量吸光值。用試劑空白調零。
(2)標準曲線繪制:準確稱取半乳糖醛酸100mg,溶解于水中,加入0.5ml1mol/L氫氧化鈉溶液,并定容至100ml,混勻。得1mg/ml的半乳糖醛酸原液。移取原液0.5、1.0、3.0、7.0ml,分別注入100ml容量瓶中,稀釋至刻度,即得一組濃度為5、10、30、70μg/ml的半乳糖醛酸標準溶液。按3.2.1中(取1ml……冷卻15min)步驟在525nm處測定吸光值,繪制標準曲線。
對照標準曲線計算樣品中果膠含量。
2 結果與討論
2.1 精密度分析
取某一摻假蜂蜜樣本10份,按本方法測定其果膠含量,結果見表1。
由上述結果可以看出,本方法具有良好的精密度,重現(xiàn)性好,適用于蜂蜜中果膠含量的測定。
2.2 回收率測定
取蜂蜜樣品,測定其果膠含量,取四份該已知果膠含量的蜂蜜,分別加入含半乳糖醛酸1.00、2.00、3.00、5.00mg的果膠標準溶液,按本方法測定果膠含量,結果見表2。
本方法回收率在93.0%-98.2%之間,準確性好,符合檢驗要求。
3 結論
咔唑-半乳糖醛酸比色法,適用于蜂蜜中果膠含量的測定。結果準確率高,精密度良好??蓱糜谌粘z驗,為鑒別摻假蜂蜜提供可靠數(shù)據(jù)。