摘要：

目的：分析PAI-1 4G/5G多態(tài)性與膿毒癥發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性。方法：對(duì)我院2010年8月到2012年8月收治的60例膿毒癥患者以及60例正常人作為研究對(duì)象，進(jìn)行回顧性分析，將60例膿毒癥患者作為試驗(yàn)組，正常人員作為對(duì)照組，根據(jù)MODS的診斷標(biāo)準(zhǔn)采用聚合酶鏈反應(yīng)結(jié)合限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性方法（PCR-RFLP）分析各組中PAI-1和TLR4單個(gè)核苷酸多態(tài)性，比較試驗(yàn)組組和對(duì)照組中PAI-1基因型同等位基因的頻率分布差異，比較PAI-1 4G/5G多態(tài)性與疾病發(fā)生的相關(guān)性。結(jié)果：在兩組中，試驗(yàn)組中PAI-1 4G/5G在膿毒癥組織表達(dá)中，試驗(yàn)組膿毒癥組中，4G/5G多態(tài)性同膿毒癥的易感性與轉(zhuǎn)歸呈正相關(guān)，兩者之間有差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.5）。結(jié)論：在臨床中，檢測(cè)出PAI-1 4G/5G多態(tài)性與膿毒癥的發(fā)生有關(guān)，在膿毒癥的發(fā)生發(fā)展中與PAI-1和TLR4基因多態(tài)性有相關(guān)性，根據(jù)PAI-1 4G/5G變化提示，可以做好對(duì)膿毒癥患者預(yù)后工作，值得在實(shí)際中推廣。

關(guān)鍵詞：PAI-1 4G；PAI-1 5G5；膿毒癥；相關(guān)性

【中圖分類號(hào)】

R632.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1002-3763（2014）06-0009-01

膿毒癥在全球每年的總病例數(shù)約為1800萬(wàn)例，膿毒癥的發(fā)生多與嚴(yán)重感染有關(guān)，會(huì)導(dǎo)致人體的多器官功能障礙甚至衰竭， 因此在實(shí)際中預(yù)防手術(shù)后嚴(yán)重感染，并合理救治患者是臨床醫(yī)生以及從事感染工作者的重要使命。

1 資料與方法

1.1 研究資料：

我院2010年8月到2012年8月收治的60例膿毒癥患者作為研究對(duì)象，將其作為試驗(yàn)組，男患者為36例，女患者為24例，患者年齡在25歲～65歲，平均年齡在36.3±4.8歲，患者在檢查前均沒(méi)有使用類固醇激素以及其它免疫抑制劑；再選擇60例身體正常的人員，使其作為對(duì)照組，男性35例，女性25例，年齡在25歲～65歲，平均年齡在36.3±4.8歲；兩組中人員均簽署知情書，兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有一定的可比性。

1.2 方法：

抽取兩組人員的靜脈血2 ml，應(yīng)用2%乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）抗凝[1]，并在-80e凍存?zhèn)溆?。在DNA的提取中，應(yīng)用2% EDTA抗凝靜脈血1m，使用酚-氯仿提取DNA，在紫外分光光度儀下進(jìn)行定量。之后，擴(kuò)增目的DNA片段，可以采用聚合酶鏈，根據(jù)其反應(yīng)（PCR）特異性來(lái)擴(kuò)增PAI-1基因序列。最后，對(duì)其進(jìn)行多態(tài)性分析，可以應(yīng)用5U Bsl1限制性內(nèi)切酶對(duì)5Ll PCR產(chǎn)物進(jìn)行酶切。由于Bsl1酶，以此來(lái)識(shí)別序列，將99 bp（5G）片段酶切成77 bp片段和22 bp片段，并以16%濃度的聚丙烯酰胺凝膠電泳，設(shè)置電為壓180 V，時(shí)間為2.5 h，并在凝膠成像儀下觀察溴化乙錠染色后的結(jié)果，從而確定基因型。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：

對(duì)本次的試驗(yàn)結(jié)果，采用SPSS13.O統(tǒng)計(jì)軟件[2]對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并且對(duì)于試驗(yàn)組與對(duì)照組指標(biāo)的陽(yáng)性率將會(huì)采用APACHⅡ評(píng)分；計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)的資料采用x2檢驗(yàn)，以P<0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組中膿毒癥患者同正常人員的研究中，分析兩組中的PAI-1基因型電泳結(jié)果，PAI-1基因4G/5G多態(tài)性與膿毒癥發(fā)生發(fā)展表現(xiàn)出相關(guān)性，兩組對(duì)象中的PAI-1 4G/5G基因型分布中，兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.5），患者的PAI-14G/5G基因型攜帶頻率是0.44， 5G等位基因攜帶頻率是0.65；對(duì)照組中的分別是0.25與0.50，同時(shí)在實(shí)驗(yàn)組膿毒癥死亡與存活患者中的PAI-1 4G/5G基因也存在多態(tài)性，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 兩組中PAI-1 4G/5G基因型分布對(duì)比

表2 試驗(yàn)組存活與死亡患者PAI-1 4G/5G基因型分布

結(jié)果PAI-1 4G/5G的多態(tài)性，同膿毒癥的易感性與轉(zhuǎn)歸呈正相關(guān)，具有一定相關(guān)性，對(duì)改善膿毒癥患者預(yù)后有積極的影響。

3 討論

據(jù)悉，膿毒癥的基礎(chǔ)病因目前還不清楚，先前研究中多認(rèn)為與細(xì)胞因子炎癥、纖維化有關(guān)。PAI-1 4G/5G多態(tài)性，就是指在基因轉(zhuǎn)錄的起始上游-675bp位置中，存在鳥苷插入與缺失，從而表現(xiàn)出三種多態(tài)性，導(dǎo)致 PAI-1基因的PCR產(chǎn)物也形成三種基因型，產(chǎn)生4G/5G基因型、5G/5G基因型、4G/5G基因型。

3.1 當(dāng)前膿毒癥治療進(jìn)展：

在醫(yī)院臨床治療中，膿毒癥作為預(yù)后差的疾病，及早發(fā)現(xiàn)、及早治療已成為治愈膿毒癥的關(guān)鍵。明確攜帶PAI-1那種基因型及等位基因膿毒癥患者容易發(fā)展成MODS，攜帶那種PAI-1基因型及等位基因患者死亡率高，比較PAI-1 4G/5G，TLR4 Asp299Gly和Thr399Ile基因型的分布在各組的差異，根據(jù)PAI-1和TLR4基因多態(tài)性結(jié)果，綜合膿毒癥患者臨床表現(xiàn)進(jìn)行全面分析，科學(xué)提出膿毒癥患者預(yù)后情況。

3.2 PAI-1 4G/5G多態(tài)性與發(fā)病之間的相關(guān)性：

PAI-1基因多態(tài)性與膿毒癥發(fā)病相關(guān)性研究結(jié)果表明，患者PAI-1 4G/5G基因型頻率高于正常人群，攜帶4G/5G基因型的個(gè)體，其發(fā)生膿毒癥的風(fēng)險(xiǎn)較高；還有就是4G/5G基因型個(gè)體PAI-1活性水平高， 降低纖溶活性，使細(xì)胞的外基質(zhì)更加穩(wěn)定，加速了膿毒癥的發(fā)展。

3.3 預(yù)后措施：

在膿毒癥患者預(yù)后中，4G純合子以及4G等位基因，是人體易感膿毒癥的預(yù)警指標(biāo)，基因多態(tài)性與膿毒癥的發(fā)生發(fā)展具有一定的相關(guān)性，對(duì)此有助于實(shí)現(xiàn)對(duì)膿毒癥的個(gè)體化防治。

由上可知，在臨床膿毒癥治療中，根據(jù)PAI-1 4G/5G多態(tài)性與病情發(fā)展具有相關(guān)性，通過(guò)PAI-1 4G/5G多態(tài)性變化對(duì)膿毒癥進(jìn)行診治，降低誤診的發(fā)生，提高診治準(zhǔn)確率，而且也將會(huì)提高患者的預(yù)后效果。

參考文獻(xiàn)

[1] 倪俊學(xué)，王亞軍，李平，付紅敏，馬燕，萬(wàn)健. 膿毒癥患兒血漿膽固醇、白細(xì)胞介素-6水平變化與病情危重度的關(guān)系[J]. 實(shí)用兒科臨床雜志，2012，07（18）：41-42.

[2] 饒小平，朱綠綺. 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)血乳酸對(duì)評(píng)估小兒膿毒癥的臨床意義[J]. 南昌大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2011，14（12）：76-77. [J]. 實(shí)用藥物與臨床，2011，06（34）：45-46.