摘要：目的： 探討M2型抗線粒體抗體診斷原發(fā)性膽汁性肝硬化的臨床價值。 方法 回顧分析48例原發(fā)性膽汁性肝硬化（觀察組）和40例其他原因?qū)е赂斡不▽φ战M）患者血清M2型抗線粒體抗體、堿性磷酸酶（ALP）及氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）檢測結(jié)果。 結(jié)果 觀察組患者血清M2型抗線粒體抗體檢測陽性率91.67%；高于對照組的2.50%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。血清M2型抗線粒體抗體陽性與陰性患者ALP及GGT水平相似，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。 結(jié)論 原發(fā)性膽汁性肝硬化患者血清M2型抗線粒體抗體陽性率較高，有助于早期診斷，為臨床治療提供參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞： 原發(fā)性膽汁性肝硬化；抗線粒體抗體； M2型

【中圖分類號】R575.22 【文獻標識碼】B 【文章編號】1002-3763（2014）04-0065-01

近年來，隨著檢驗醫(yī)學的飛速發(fā)展，敏感檢測方法相繼開展，無癥狀、無黃疸的原發(fā)性膽汁肝硬化早期診斷逐漸增多。文獻報道[1]，抗線粒體抗體與原發(fā)性膽汁性肝硬化有關(guān)，高滴度的抗線粒體抗體是其主要的血清學指標，其中M2亞型具有特異性。本研究回顧性分析68例原發(fā)性膽汁性肝硬化患者M2型抗線粒體抗體檢測結(jié)果，報道如下。

1.資料與方法

1.1診斷標準 參照2009年美國肝病學會原發(fā)性膽汁性肝硬化指南中的診斷標準[2]：①存在膽汁淤積癥的生化學證據(jù)，主要是堿性磷酸酶（ALP）升高；②血清抗線粒體抗體陽性；③非化膿性破壞性膽管炎及小葉間膽管破壞的組織學證據(jù)。如果符合上述三個標準中的兩項即可診斷原發(fā)性膽汁性肝硬化。

1.2臨床資料 2010年1月～2014年1月，選取在我院診治的原發(fā)性膽汁性肝硬化患者48例（觀察組），其中男19例、女29例，年齡23～57歲，平均（45.57±8.19）歲。主要臨床表現(xiàn)：黃疸31例（64.58%）、疲乏26例（54.17%）、納差24例（50.00%）和皮膚瘙癢 19例（39.58%）。選擇同期在我院治療的其他原因?qū)е碌母斡不üＷ栊渣S疸及惡性腫瘤者除外）患者40例（對照組），其中乙肝肝硬化27例、酒精性肝硬化13例，男22例、女18例，年齡29～59歲，平均（46.90±8.43）歲。主要臨床表現(xiàn)：黃疸24例（60.00%）、疲乏20例（50.00%）、納差17例（42.50%）和皮膚瘙癢 12例（30.00%）。兩組患者年齡、性別及臨床表現(xiàn)相似，差異統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.3檢測指標及方法

1.3.1樣本收集 患者均于空腹清晨8：00時抽取靜脈血5 ml置入EDTA抗凝管中，常溫下3000 r/min離心10 min，分離血清保存于-70℃冰箱集中待測。

1.3.1生化指標 ALP及氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）采用全自動生化分析儀（日立7600—020）檢測。

1.3.2M2型抗線粒體抗體 M2型抗線粒體抗體酶免疫試劑盒由德國歐蒙醫(yī)學實驗診斷股份公司提供。操作步驟：①加樣。用100μL樣品稀釋液按1：200比例稀釋血清，將不同濃度的M2型抗線粒體抗體標準品及血清依次加入到已包被M2抗原的微孔中；在微振蕩器上進行振蕩混勻，室溫（18℃～24℃）孵育30 min，應用自動洗板機洗板3次，拍干。②酶結(jié)合物反應。將50μL已稀釋的堿性磷酸酶標記的抗人IgG加入相應微孔中，室溫條件下再次溫育30 min及洗滌、拍干。③顯色：各微孔依次加入50 μL底物液室溫下反應10 min，洗板、風干。④結(jié)果判斷：M2抗原包被區(qū)出現(xiàn)深藍或紫色條帶為陽性，無顏色為陰性。

1.4統(tǒng)計學處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析處理，計數(shù)資料比較采用卡方檢驗，計量資料比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果

2.1兩組患者血清M2型抗線粒體抗體檢測結(jié)果比較 觀察組患者血清M2型抗線粒體抗體檢測陽性44例，陽性率91.67%，陰性4例，陰性率8.33%；對照組患者血清M2型抗線粒體抗體檢測陽性1例，陽性率2.50%，陰性39例，陰性率97.5%；差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

2.2血清M2型抗線粒體抗體陽性與陰性患者生化指標比較 M2陽性組ALP為 256.91±34.75 U/L，GGT 274.33±38.41 U/L， M2陰性組ALP為 242.65±33.93 U/L， GGT 268.97±35.80 U/L. 血清M2型抗線粒體抗體陽性與陰性患者ALP及GGT水平相似，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）

3.討論

原發(fā)性膽汁性肝硬化發(fā)病與自身免疫、病原微生物感染、接觸化學物品、遺傳和家庭因素有關(guān)，臨床主要表現(xiàn)為皮膚瘙癢、進行性黃疸、黃色瘤、肝脾腫大和后期出現(xiàn)門脈高壓癥，好發(fā)于中老年女性[3]。本研究顯示男：女為0.66：1，平均年齡（45.57±8.19）歲。原發(fā)性膽汁性肝硬化目前尚無有效的治療方法，所以早期診斷、及時治療對于改善患者的預后至關(guān)重要?？咕€粒體抗體共有9各亞型，與原發(fā)性膽汁性肝硬化相關(guān)的有M2、M4、M8及M9亞型。M2是線粒體內(nèi)膜抗體，可與多個抗原發(fā)生反應，最主要是與丙酮酸脫氧酶E2亞基，其次則是2-氧戊二酸脫氫酶復合物與2-氧戊二酸脫氫酶復合體的E2亞基。中M2診斷原發(fā)性膽汁性肝硬化的特異性抗體，主要原因：①靈敏度及特異度均達到95%以上[4]。②在疾病早期已經(jīng)出現(xiàn)，甚至在無癥狀的體檢者中可出現(xiàn)，多年后大多數(shù)發(fā)展為原發(fā)性膽汁性肝硬化患者；③動物實驗證實M2抗原可誘導建立小鼠原發(fā)性膽汁性肝硬化模型，其生化與病理特征和人類相似， 進一步證實了M2在原發(fā)性膽汁性肝硬化發(fā)病中的重要作用[5]。本研究顯示，48例原發(fā)性膽汁性肝硬化患者血清M2型抗線粒體抗體陽性率高達91.67%，進一步證實了上述結(jié)論。國內(nèi)文獻報道[6]，5011名健康體檢者，8例檢出血清M2型抗線粒體抗體陽性，其中5例符合美國肝病學會推薦的原發(fā)性膽汁性肝硬化診斷標準，提示無癥狀者在我國也不少見，也說明懷疑該病者應早做M2亞型篩查。許峰[7]報道采用ELISA法檢測原發(fā)性膽汁性肝硬化患者血清M2型抗線粒體抗體水平，以25 RU/mL（95%上限為25 RU/mL）為臨界值，其靈敏度為95.2%，特異度為97.4%，診斷符合率達95.6%，陰性預測值98.7%，陽性預測值 90.9%，對其診斷原發(fā)性膽汁性肝硬化進一步量化。本研究還發(fā)現(xiàn)，M2型抗線粒體抗體無論是陰性還是陽性患者，其肝臟均具有以下病理改變：①膽管改變明顯，以小膽管最具特征性，膽管周圍見炎性細胞浸潤；②匯管區(qū)細胞浸潤現(xiàn)象明顯，甚至形成淋巴濾泡；③肝細胞改變相對較輕，缺乏特異性。所以，對M2型抗線粒體抗體陰性者，病理學檢查十分重要。ALP及GGT升高是原發(fā)性膽汁性肝硬化患者肝功能損害的特征性改變。本研究48例患者肝功能ALP及GGT均為陽性，較正常值高4～6倍。并且M2型抗線粒體抗體陰性及陽性患者，ALP及GGT水平無差異。

綜上所述，原發(fā)性膽汁性肝硬化早期臨床癥狀輕微且無特異性，極易誤診為病毒性肝炎或肝炎性肝硬化，臨床醫(yī)師有必要加強對原發(fā)性膽汁性肝硬化及M2型抗線粒體抗體的認識，將有助于患者獲得早期診斷和有效治療，對患者預后具有十分重要的意義。

參考文獻：

[1]陳乃玲，楊新玲，劉曉彬，等.血清抗線粒體抗體亞型對原發(fā)性膽汁性肝硬化診療的臨床評估[J].中華臨床醫(yī)師雜志（電子版），2008，2（10）：1114-1122.

[2]American Association for Study of Liver Diseases.AASLD practice guidelines：primary biliary cirrhosis. Hepatology[J].2009，50（1）：291-308.

[3]李金祥，楊晉輝.原發(fā)性膽汁性肝硬化AMA-M2陰性患者的臨床及病理特點[J].世界華人消化雜志，2009，17（16）：1676-1679.

[4]Jones DE. Pathogenesis of primary biliary cirrhosis[J].Gut，2007，56 （11）：1615-1624.

[5]姜小華，仲人前，方曉云，等.抗線粒體抗體M2抗原誘導小鼠原發(fā)性膽汁性肝硬化模型的建立[J].中華肝臟病雜志，2006，14（3）：202-204.

[6]姜小華，仲人前，方曉云，等.原發(fā)性膽汁性肝硬化特異性AMA-M2抗體在5011名體檢者中的篩查分析[J].中華檢驗醫(yī)學雜志，2003，26（8）：553-555.

[7]許峰.血清抗線粒體抗體M2亞型檢測在原發(fā)性膽汁性肝硬化臨床診斷中的價值[J].診斷學理論與實踐， 2013，12（5）：556-558.