摘要：目的： 通過(guò)一系列的試驗(yàn)證明鹽酸小檗堿膠囊含量測(cè)定中使用濾紙進(jìn)行過(guò)濾對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。 方法： 通過(guò)過(guò)濾不同體積的樣品液進(jìn)行試驗(yàn)，證明濾過(guò)的體積越大，越能減少因?yàn)V紙吸附所帶來(lái)的影響。 結(jié)論： 檢測(cè)結(jié)果表明，濾紙對(duì)鹽酸小檗堿的吸附嚴(yán)重影響含量測(cè)定結(jié)果的真實(shí)性，使含量測(cè)定結(jié)果偏低。

關(guān)鍵詞： 鹽酸小檗堿膠囊；含量測(cè)定；濾紙吸附

【中圖分類號(hào)】R927.2 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1002-3763（2014）04-0050-02

小檗堿又名黃連素，是黃連、黃柏等級(jí)植物中含有的一種生物堿，也可以合成得到，主要用于腸道感染的治療。主要用于治療胃腸炎、細(xì)菌性痢疾等腸道感染、眼結(jié)膜炎、化膿性中耳炎等有效。還發(fā)現(xiàn)本品有阻斷 α-受體，抗心律失常作用。小檗堿的鹽酸鹽（俗稱鹽酸黃連素）已廣泛用于治療胃腸炎、細(xì)菌性痢疾等，對(duì)肺結(jié)核、猩紅熱、急性扁桃腺炎和呼吸道感染也有一定療效。

鹽酸小檗堿膠囊在《中國(guó)藥典》1995年版[1]、2000年版[2]、2005年版[3]和2010年版[4]均有收載，1995年版和2000年版的是采用重鉻酸鉀滴定液進(jìn)行測(cè)定，自2005年版起修訂為高效液相色譜法，2010年版所載的方法大體與2005年版所載的方法一致，只作了部份修改，把“用濾膜（0.45μm）過(guò)濾，棄去初濾液約8ml，精密量取續(xù)濾液2ml置25ml量瓶中[2]”修訂為“棄去初濾液約8ml，精密量取續(xù)濾液2ml置25ml量瓶中[3]”。在沒(méi)有明確規(guī)定過(guò)濾操作所采用的材質(zhì)的情況下，我們一般會(huì)使用濾紙進(jìn)行過(guò)濾，這也是我這篇文章想要說(shuō)明的主要問(wèn)題，同時(shí)“棄去初濾液約8ml”，這一點(diǎn)可能很多人會(huì)把它忽視掉，一般會(huì)理解為8ml以上或更多，但我司就曾出現(xiàn)這種情況，被抽檢該品種，抽檢的檢驗(yàn)所堅(jiān)持按照藥典所描述的“棄去初濾液約8ml”進(jìn)行檢驗(yàn)，但結(jié)果確是偏低甚至是不合格，為了證明是濾紙吸附造成的不合格，我司做了大量的實(shí)驗(yàn)去論證。

方案設(shè)計(jì)如下：嚴(yán)格按照藥典所描述的“棄去初濾液約8ml”，那為了證明濾紙是有吸附的，或者說(shuō)如何消除濾紙對(duì)主成份的吸附，我們將采用續(xù)濾不同量的方法進(jìn)行論證，在初濾量相同的情況下，只有續(xù)濾更多的溶液才會(huì)減少濾紙對(duì)主成份吸附的影響。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

島津LC2010-C高效液相色譜儀，色譜柱：迪馬C18；梅特勒AB135-S電子天平，定性濾紙：杭州新華紙業(yè)有限公司

1.2試藥

鹽酸小檗堿對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110713-201212，分子式：C20H18ClNO4，分子量：371，純度86.7%）；水為純化水；鹽酸小檗堿膠囊（規(guī)格0.1g，批號(hào)120901，均為我公司所生產(chǎn)）

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液[0.05mol/l磷酸二氫鉀溶液和0.05mol/l庚烷磺酸鈉溶液（1：1），含0.2%三乙胺，并用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0]-乙腈（60：40）；檢測(cè)長(zhǎng)：263nm；流速：1.0ml/min；理論板數(shù)：按鹽酸小檗堿峰計(jì)算不低于3000，鹽酸小檗堿峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。

2.2 含量測(cè)定方法[4]

取裝量差異項(xiàng)下內(nèi)容物，混合均勻，精密稱取適量（約相當(dāng)于鹽酸小檗堿40mg0，置100ml量瓶中，加沸水適量，使鹽酸小檗堿溶解，放冷，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，棄去初濾液8ml，精密量取續(xù)濾液2ml，置25ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，精密20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，另取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，精密稱定，用沸水溶解，放冷，用水定量稀釋制成每1ml約含32μg的溶液，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

3.3 本實(shí)驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)

由三位檢驗(yàn)員對(duì)該批品進(jìn)行測(cè)定。在棄去初濾液8ml是固定的情況下，如何才能減少或消除濾紙對(duì)主成份的吸附致使含量偏低的影響，我們將以過(guò)濾不同體積的供試品來(lái)進(jìn)行比較，同時(shí)分取10ml離心后取上清液進(jìn)行稀釋，同法測(cè)定。結(jié)果見表1。

3 討論

結(jié)果顯示，過(guò)濾不同體積的供試品，含量數(shù)據(jù)程一定的梯度增長(zhǎng)；而離心處理的結(jié)果明顯比濾紙過(guò)濾高2.6%-5.3%，可見使用濾紙過(guò)濾對(duì)主成份有較大的吸附作用，而且過(guò)濾的量越大，越能減少濾紙的吸附影響。

鹽酸小檗堿膠囊含量測(cè)定法中，《中國(guó)藥典》2010年版修訂時(shí)與2005年版最大的區(qū)別就是去掉了“用濾膜（0.45μm）過(guò)濾”這一操作，在孔愛英[5]的研究中發(fā)現(xiàn)，使用濾膜進(jìn)行過(guò)濾，雖然對(duì)產(chǎn)品的含量影響不大，但有檢測(cè)過(guò)該產(chǎn)品的人員不易發(fā)現(xiàn)，實(shí)際操作中，使用濾膜棄去8ml的初濾液是很難做到的。

使用濾紙進(jìn)行過(guò)濾操作，雖然過(guò)濾的體積越多，越能減少吸附的影響，但要全部過(guò)濾完也是很難做到的，同時(shí)在實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)，即使是相同品牌相同批號(hào)的濾紙，過(guò)濾的速度也不盡相同，經(jīng)常能過(guò)濾80ml已經(jīng)是極限，而且很費(fèi)時(shí)，當(dāng)然也有能完全濾完的。

在供試品溶液的制備過(guò)程中，使用沸水溶解，沸水的溫度和振搖的方式對(duì)含量的測(cè)定也存在一定的局限性，對(duì)含量的真實(shí)結(jié)果也有一定的影響，建議未來(lái)方法的修訂可更多的考濾供試品溶液制備的方法。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家藥典委員會(huì). 《中國(guó)藥典》2000年版. 二部[S]. 1995：569.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì). 《中國(guó)藥典》2000年版. 二部[S]. 2000：550.

[3]國(guó)家藥典委員會(huì). 《中國(guó)藥典》2005年版. 二部[S]. 2005：466.

[4]國(guó)家藥典委員會(huì). 《中國(guó)藥典》2010年版. 二部[S]. 2010：640.

[5]孔愛英，陶勝源. 有關(guān)HPLC法測(cè)定鹽酸小檗堿征含量的問(wèn)題探討[J]. 中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn)2011年第12卷第2期： 83-86