林玉芳　謝倩　陳清西

摘 要 橄欖的苦澀味及藥用成分都與多酚類物質(zhì)密切相關(guān)。本試驗利用高效液相色譜法測定橄欖果實中的多酚組分。結(jié)果表明：橄欖中主要的多酚物質(zhì)為鞣花酸，其次是蘆丁、沒食子酸甲酯、金絲桃苷。不同地區(qū)、品種（株系）之間多酚組分含量不相同。‘馬坑22號和‘霞溪本所含的鞣花酸含量最高，分別達(dá)2 484.633、2 214.457 mg/100 g；蘆丁含量最高為‘檀頭和‘霞溪本，分別為490.137、478.545 mg/100 g。

關(guān)鍵詞 橄欖；高效液相色譜；多酚類化合物

中圖分類號 S667.5 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A

橄欖作為藥食兩用的果品，其中所含的橄欖多酚是重要的藥效功能成分。據(jù)悉，橄欖多酚具有解酒護(hù)肝、抗菌、抗炎鎮(zhèn)痛、抑制血糖升高、增加骨密度、抗乙肝病毒等作用[1]，橄欖中的多酚主要有沒食子酸、沒食子酸甲酯、短葉蘇木酚、金絲桃苷以及鞣質(zhì)類多酚化合物等。因其自身的營養(yǎng)保健功能，橄欖中的多酚物質(zhì)已被廣泛應(yīng)用于食品、生化制藥以及日?；瘖y品等各項高科技領(lǐng)域。鞣花酸作為國外正在大力開發(fā)的藥物和保健食品，具有抗突變、抗癌變、抗菌、抗病毒等作用[2-4]。蘆丁被廣泛應(yīng)用在臨床診治中，具有抗脂質(zhì)過氧化、抗自由基活性、抗急性胰膜炎、抗病毒等作用[5-6]。金絲桃苷是多酚類化合物中的黃酮醇苷類物質(zhì)，具有廣泛的藥理作用，包括鎮(zhèn)痛作用、抗氧化、保肝以及抗乙肝病毒等，具有良好的發(fā)展應(yīng)用前景，倍受重視[7-9]。

之前關(guān)于橄欖多酚的研究僅僅局限于沒食子酸總量以及黃酮總量等的研究，除何志勇[10]對一個品種的橄欖多酚進(jìn)行純化鑒定外，橄欖各個品種的多酚類化合物組分研究還未曾見過報道。本試驗利用HPLC法對福建省若干橄欖品種（株系）多酚類化合物進(jìn)行分析，確定各個品種中橄欖多酚組分差異，為今后橄欖的開發(fā)利用提供針對性的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 材料 從福建省各個地區(qū)選取20個橄欖品種（株系），均為露地栽培。選擇成熟度一致、無病蟲、無畸形的橄欖果實，進(jìn)行清洗、去核、-40 ℃冷藏等前處理，然后進(jìn)行真空干燥，干燥果肉用多功能粉碎機磨成粉末，過80目篩，置于-40 ℃冰箱中備用。各個橄欖品種（株系）見表1。

1.1.2 試劑 所用試劑甲醇、乙腈均為色譜純；水為雙蒸水；標(biāo)樣綠原酸、咖啡酸、香豆酸、阿魏酸、鞣花酸、短葉蘇木酚、沒食子酸、金絲桃苷、山萘酚、沒食子酸甲酯、蘆丁、槲皮素等均為色譜純。

1.2 方法

1.2.1 多酚類化合物的提取 精確稱取0.1 g橄欖干粉，用1 mL甲醇提取，10 min后于9 000 g，4 ℃下離心15 min，重復(fù)3次，合并上清液于5 mL容量瓶中，用甲醇定容，以0.45 μm微孔有機膜過濾備用。

1.2.2 HPLC分析 用高效液相色譜（Hitachi L-2000，四元梯度洗脫，自動進(jìn)樣器）檢測橄欖果實多酚類化合物組分。色譜柱：Agilent C18柱（150 mm×4.6 mm），為日立UV-VIS L2419紫外檢測器，配有EZ Chrom Elite D-2000工作站。流動相由A、B 2相組成，A相為水/乙酸（100/0.5，V/V），B相為乙腈，流速為1 mL/min，進(jìn)樣量20 μL，洗脫梯度見表2。

1.3 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)采用Excel與SPSS 17.0軟件進(jìn)行處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 橄欖多酚組分差異分析

從橄欖酚類化合物的HPLC色譜圖（圖1、圖2）可知，圖中顯示提取物中有12種酚類組分，其中出峰時間為11.88 min的組分吸收信號最強，在部分品種中，含量高達(dá)90.41%，確定為橄欖提取物的主要酚類物質(zhì)。通過比較橄欖各酚類組分與各個標(biāo)樣的HPLC出峰時間，可以確定出峰時間為11.88 min的酚類組分為鞣花酸，由此初步推斷，橄欖中的主要酚類物質(zhì)為鞣花酸。

從表3的橄欖多酚組分含量可以看出，所測20個品種（株系）中，含量最高的基本都為鞣花酸，在124.43～2 484.63 mg/100 g之間，占總多酚物質(zhì)的90.41%～17.11%，其中以‘馬坑22號和‘霞溪本含量最高，‘南安1號含量最低。其次是蘆丁和沒食子酸甲酯，含量分別在110.23～490.14 mg/100 g、73.63～185.94 mg/100 g之間。從表3還可以看出，香豆酸、山萘酚和短葉蘇木酚在各個品種中含量很少，幾乎檢測不出；而槲皮素在部分品種中也幾乎沒有，如‘上丈21號和‘長營株系。各個品種中多酚類組分含量均不相同，所占總多酚比例也不盡相同，由此可以推測，橄欖中所含多酚組分的比例與橄欖口感、風(fēng)味等關(guān)系密切。

2.2 橄欖多酚及品種聚類分析

2.2.1 橄欖多酚類組分聚類分析 根據(jù)橄欖多酚組分聚類分析可知（圖3），鞣花酸自成一類，無相似項；蘆丁和沒食子酸甲酯聚為一類，即為相似水平類；其他多酚組分聚為同一類，相似程度較高。

2.2.2 橄欖品種聚類分析 從20個橄欖品種（株系）的聚類距離和先后步驟可以看出（圖4），D1和B1（‘馬坑22號、‘霞溪本）在各個多酚組分含量上相似水平較高，首先聚為一類；D2和D4（‘惠圓、‘檀頭）聚為一類，即二者為相似水平類；其次是A1、A3、C1、D3、D7、E1、C4聚為一類，同為相似類；最后剩下的9個品種聚為一類。

3 討論與結(jié)論

橄欖的苦澀味及藥用成分均與其所含多酚類物質(zhì)密切相關(guān)。根據(jù)何志勇[10]報道，橄欖果實中主要的酚類化合物為沒食子酸，其次為鞣花酸。陳崗[11]報道，橄欖中主要酚類物質(zhì)是蘆丁。本研究發(fā)現(xiàn)，橄欖中主要的多酚物質(zhì)是鞣花酸。關(guān)于鞣花，已在石榴皮[12]、葡萄[13]、烏帕[14]以及紅木莓、草莓等[15]植物中提取得到。本試驗中，‘馬坑22號和‘霞溪本所含的鞣花酸含量最高，達(dá)2 484.633、2 214.457 mg/100 g，可作為鞣花酸提取來源進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)。

本試驗研究還得出，在20個橄欖品種中，蘆丁含量相對較高，最高的為‘檀頭和‘霞溪本，含量分別為490.137、478.545 mg/100 g，在所測品種中，所有橄欖的蘆丁含量均遠(yuǎn)高于同是藥食兩用的桑葚蘆丁含量（51.05 mg/100 g）[16]，可見，橄欖也可作為蘆丁工業(yè)化生產(chǎn)的原料。沒食子酸甲酯含量相對較高的是‘上丈21號，為199.527 mg/100 g，最低的是‘惠園，為61.958 mg/100 g，目前對沒食子酸甲酯的藥效研究較少，主要在工業(yè)上進(jìn)行合成[17]，因此有必要對橄欖中的沒食子酸甲酯進(jìn)行深入研究，以確定其藥效作用。

在橄欖中，因品種不同，金絲桃苷含量高低相差較大，最高的可達(dá)236.517 mg/100 g（‘攀岐18號），而最低含量僅為12.082 mg/100 g（‘惠圓），可見不同品種之間，金絲桃苷含量差異顯著，應(yīng)根據(jù)不同需要對不同品種進(jìn)行有針對性的開發(fā)利用。

不同的橄欖所含的多酚組分不同，即使含量很少的香豆酸、槲皮素、山萘酚以及短葉蘇木酚等也都呈現(xiàn)不一樣的差異，且各個組分在藥理作用上均有所差別，無法判定品種的優(yōu)劣，應(yīng)對橄欖的藥理及食用價值進(jìn)行判斷，并有針對性地進(jìn)行分析研究，以確定橄欖今后的加工及藥物開發(fā)利用方向，為其提供一定的研究基礎(chǔ)。目前，關(guān)于橄欖中多酚組分的具體藥效尚未進(jìn)行試驗認(rèn)證，因此今后可進(jìn)一步對橄欖各個多酚組分進(jìn)行小白鼠試驗，以明確橄欖多酚的具體藥理作用，為更好地利用其奠定良好的基礎(chǔ)。

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