陳燕 周嫣

氟化物長期應(yīng)用于抗齲的治療，但在使用過程中如果劑量控制不好使用過量易出現(xiàn)氟斑牙、氟骨癥等并發(fā)癥[1]。目前，國內(nèi)外學(xué)者都在致力于研究安全、有效的防齲用品。自從20世紀90年代科學(xué)家在小鼠齲模型中發(fā)現(xiàn)奶制品具有抗齲作用后，澳大利亞墨爾本牙科學(xué)院研究人員從牛奶中提取出了一種生物活性肽—酪蛋白磷酸多肽鈣磷復(fù)合體（complex of casein phosphopeptide and amorphous calcium phosphate，CPP- ACP），日本GC公司把它進一步提煉，進而有了Tooth Mousse護牙素，它是一種新型的口腔抗齲用品 [2]。護牙素在基礎(chǔ)研究中的再礦化原理和臨床中防齲再礦化的療效和機理是研究關(guān)注的核心，下面就目前的一些研究成果綜述如下。

1 CPP-ACP的結(jié)構(gòu)特點

CPP-ACP的基本結(jié)構(gòu)為-serp-glu-，一級結(jié)構(gòu)中均含有1個或1個以上serp-，三級結(jié)構(gòu)具有高度的可動性和可塑性。Serp具有高負電荷性，能對外源性、內(nèi)源性鈣磷具有固定作用。它的結(jié)構(gòu)特點決定其具有防齲作用 [3]。其結(jié)構(gòu)具有較大的表面積，能把鈣、磷結(jié)合形成納米大小的微小串，在出現(xiàn)大量鈣磷沉積時也可避免體積過度的增大。所以鈣、磷處于過飽和狀態(tài)時，CPP-ACP也不會出現(xiàn)磷酸鈣沉淀。Reynolds[4]報道也證實了這一特性：在pH為 7時，1%(m/V)CPP能夠穩(wěn)定溶液中60mmol/L鈣離子和36mmol/L磷離子而不發(fā)生沉淀。Reynolds[4]的研究發(fā)現(xiàn),在菌斑中即使CPP最終被致齲菌水解酶消化，serp-對鈣、磷的固定作用仍然存在,證實CPP的抗齲性在于其結(jié)構(gòu)內(nèi)的serp-能將鈣、磷固定于菌斑內(nèi)，它的結(jié)構(gòu)serp-附近的部分氨基酸殘基影響多肽對菌斑的黏附能力，從而增強抗齲能力。

2CPP-ACP的抗齲基礎(chǔ)研究

2.1 CPP-ACP對牙體組織礦化的影響：針對CPP-ACP的抗齲作用，Reynolds等[4]研究發(fā)現(xiàn)在食用致齲食物的小鼠磨牙涂布不同濃度的CPP-ACP溶液，可顯著降低平滑面齲和窩溝齲的發(fā)生率。Eichmiller[5]發(fā)現(xiàn)在牙本質(zhì)上應(yīng)用ACP，可減輕牙齒的敏感性。國內(nèi)學(xué)者對離體牙釉質(zhì)片應(yīng)用CPP-ACP再礦化液作用不同的時間，觀察其再礦化的效果。張力[6]研究表明將A、B、C、D實驗組牙釉質(zhì)片經(jīng)過人工齲液浸泡和涂0.6％磷酸多肽兩個步驟，四組經(jīng)人工齲液浸泡時間依次為1、2、12、15h，涂磷酸多肽的時間依次為10、20、120、150 min，4組的顯微硬度依次為25.29、16.24、45.30、76.80（KPa/mm2）。結(jié)果顯示：前兩組（A組和B組）的顯微硬度與對照組（只經(jīng)人工齲液浸泡而未涂磷酸多肽的組即對照組）統(tǒng)計學(xué)比較無差異，后兩組（C、D組）的顯微硬度試驗組與對照組統(tǒng)計學(xué)比較有差異(P＜0.01)，說明磷酸多肽隨作用時間的延長對牙釉質(zhì)的礦化作用更明顯。趙瓊芝[7]研究表明，將所有實驗用牙釉質(zhì)片浸于無刺激的pH 4.8脫礦液中6 天，置于37℃的恒溫箱中,每隔2日換1次脫礦液。然后均勻?qū)⑺醚烙再|(zhì)片隨機分成4組浸于37℃ 2% CPP-ACFP溶液中1、3、5、10天，每日換再礦化液，其礦化率分別9.19%、14.27%、29.07%、38.45%。余艷崧[8]研究表明，每日更換人工齲液和再礦化液，將牙釉質(zhì)片經(jīng)過人工齲液浸泡4天后在0.2%CPP液中連續(xù)浸泡7天，通過顯微硬度測試和掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)CPP可促進人工釉質(zhì)缺損和釉質(zhì)齲的再礦化。伍虹[9]研究表明,每日更換人工齲液和再礦化液，經(jīng)過人工齲液浸泡4天后將牙釉質(zhì)片隨機分組分別放入0.2%CPP液和1.0%CPP液中連續(xù)浸泡7 天，掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)CPP可促進人工釉質(zhì)缺損和釉質(zhì)齲的再礦化，但顯微硬度測試兩組硬度改變無差異。李梅等[10]對含酪蛋白磷酸多肽牙膏研究發(fā)現(xiàn)，在pH相等、鈣離子及磷酸根離子濃度一致的條件下，CPP濃度越大，再礦化能力越強。周春華等[11]研究不同濃度CPP-ACP及其與氟聯(lián)合應(yīng)用對牙釉質(zhì)表層下脫礦再礦化的影響，發(fā)現(xiàn)CPP-ACP液可于體外使脫礦牙釉質(zhì)發(fā)生再礦化，且礦化作用可被氟加強；再礦化作用與CPP穩(wěn)定的鈣磷濃度呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。劉燁[12]在體外實驗中對酸蝕后牛的牙釉質(zhì)樣本隨機分組觀察CPP-ACP和含氟 CPP-ACP( 氟濃度為 900 ppm的再礦化作用。通過顯微硬度檢測分析證實含氟CPP-ACP的再礦化作用優(yōu)于CPP-ACP，可以提高酸蝕牙釉質(zhì)的顯微硬度。

2.2 對致齲菌的抑制作用：有文獻報道，CPP-ACP能抑制致齲菌的粘附和生長。劉興榮等[13]研究發(fā)現(xiàn)CPP-ACP具有抑制變形鏈球菌生長、黏附作用,隨濃度升高抑制作用增強。進一步研究發(fā)現(xiàn)CPP-ACP對變形鏈球菌產(chǎn)酸的影響，發(fā)現(xiàn)隨著CPP-ACP濃度的升高,變形鏈球菌的產(chǎn)酸量降低，證實CPP-ACP對變形鏈球菌產(chǎn)酸具有抑制作用,且隨CPP-ACP濃度的升高抑制作用增強[14]。李艷萍等[15]研究發(fā)現(xiàn)，CPP-ACP對發(fā)酵乳桿菌產(chǎn)酸有一定抑制作用。而嚴焱等[16]體外觀察CPP-ACP對主要致齲菌變形鏈球菌、遠緣鏈球菌的直接作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CPP對變形鏈球菌和遠緣鏈球菌無直接抑菌作用，認為CPP如作為生物防齲制劑用于臨床，尚需添加其他無毒有效抑菌劑。

CPP-ACP的抑菌作用主要有以下四個方面：①抑制表兄鏈球菌和變異鏈球菌在獲得性膜上的黏附；②間接抑菌、殺菌作用；③緩沖菌斑酸性環(huán)境并抑制釉質(zhì)脫礦；④增加釉質(zhì)齲損再礦化速率。有效促進了齲損處鈣、磷的沉積[17]。

3CPP-ACP抗齲的研究現(xiàn)狀

3.1 CPP-ACP對正畸牙早期齲再礦化的研究：廖福琴等[18] 將離體牙每日涂護牙素上、下午各1次，每次保持30min，晚上樣本置于人工唾液中過夜，連續(xù)使用35天。付洪等[19]將牛的離體牙按正畸方法上牙托槽，模仿口腔環(huán)境每日放入人工唾液和人工致齲液中，模擬三餐進食時間，并用軟毛牙刷進行刷牙，每天更換液體1次，連續(xù)作用60天。采用偏光顯微鏡觀察及電子探針分析發(fā)現(xiàn)在人工致齲環(huán)境中，CPP-ACP能顯著減少釉質(zhì)脫礦，并有效促進其再礦化。姜濤[20]以護牙素局部涂抹正畸托槽及頰面管周圍牙釉質(zhì)面 2～3min，此后每周重復(fù)1次，平均觀察 18.7個月，通過觀察實驗組與對照組治療前后脫礦牙數(shù)，證實CPP-ACP 能顯著促進其再礦化。嚴維[21]采用自身對照觀察正畸托槽周圍牙釉質(zhì)面用護牙素，安裝矯治器后即刻以及每個月使用護牙素1次，每次維持5min，1年后用齲探測筆檢測上頜兩側(cè)側(cè)切牙的牙釉質(zhì)脫礦情況，分析總結(jié)出正畸治療過程中采用CPP-ACP在托槽周圍封閉牙釉質(zhì)能夠有效預(yù)防牙釉質(zhì)的脫礦。韓元華等[22]通過觀察實驗組正畸患者在托槽周圍每日晚上至少使用GC護牙素1次，對照組只清潔護理未用護牙素。比較1年后釉白斑、齲病的發(fā)生情況，證實護牙素配合科學(xué)的護理能有效避免正畸治療過程中齲病及釉白斑發(fā)生。

3.2 CPP-ACP預(yù)防牙本質(zhì)敏感的臨床研究：陳琛等[23]研究觀察實驗組患者在Beyond 冷光美白術(shù)后使用GC護牙素，對照組患者只行 Beyond 冷光美白術(shù)治療。術(shù)后 1、3、7、14天試驗組術(shù)后溫度敏感性及化學(xué)敏感性顯著低于對照組。臨床試驗證明 GC 護牙素能有效預(yù)防氟斑牙冷光美白術(shù)后的敏感。易黔林[24]采用為期8周的單中心、隨機、對照、雙盲的臨床研究發(fā)現(xiàn)GC 護牙素在4周及8周時冷刺激實驗及探針檢測患牙的敏感度都優(yōu)于對照組，證實GC護牙素治療牙本質(zhì)敏感具有較好療效。許建芳等[25]采用隨機分組方法，實驗組用護牙素對活髓牙烤瓷全冠預(yù)備后進行脫敏，對照組未用護牙素。比較兩組24h、1周、1個月后基牙敏感的程度， 實驗證實運用護牙素可以降低基牙的敏感程度。

3.3 CPP-ACP對牙齒耐磨性的影響：劉燁等[26]研究觀察基牙金屬烤瓷全冠預(yù)備后實驗組表面開窗區(qū)涂布護牙素后掃描電鏡下的形態(tài)改變。掃描電鏡下實驗組牙面表面痕跡較淺，見密集鈣質(zhì)小團的沉積覆蓋牙面，對照組基牙表面條紋狀痕跡明顯，凹凸不平，牙面呈凌亂的疏松無定形狀態(tài)。證實含氟酪蛋白磷酸肽-磷酸鈣復(fù)合物可以提高酸蝕牙釉質(zhì)的耐磨性。

3.4 CPP-ACP對鄰面去釉牙釉質(zhì)再礦化的影響： 李海清[27]采用隨機分組的方法觀察CPP-ACP和氟保護漆對鄰面去釉牙釉質(zhì)再礦化的作用。實驗連續(xù)處理3次，其余時間放入人工唾液中， 每天重復(fù)以上的操作，共用20天。酪蛋白磷酸肽鈣磷復(fù)合體對牙釉質(zhì)再礦化的硬度要比氟保護漆高。

4小結(jié)

CPP-ACP具有廣泛的應(yīng)用前景，其商品制劑GC 護牙素的應(yīng)用可以有效降低齲病的發(fā)病率，但短期連續(xù)使用后牙釉質(zhì)再礦化的改變及不同時間段連續(xù)使用其再礦化與時間的關(guān)系，臨床上如何使用才能發(fā)揮其最佳的療效，對臨床正畸后牙釉質(zhì)脫礦的療程及療效，口腔干燥綜合征，對兒童猖獗齲、鼻咽癌放療患者的猛性齲的防齲作用還有待進一步研究，并將產(chǎn)生深遠的社會效應(yīng)，在疾病預(yù)防與治療上將節(jié)約大量的經(jīng)濟成本。

[參考文獻]

[1]王蕓，唐榮銀．再礦化藥物的研究進展[J]．牙體牙髓牙周病學(xué)雜志，2005，15(9)：523-526．

[2]Rahiotis C，Vougiouklakis G．Effect of a CPP—ACP agent on the demineralization and remineralization of dentine in vitro[J]．J Dent，2007，35 (8)：695-698PMID: 17614188.

[3]Adamson NJ，Peter F，Reynolds EC．The analysis of multiple phosphosey1．containing casein peptides using capillary zone eleetmphoresis[J]．J Chromatography，1993,646:391 PMID: 8408437.

[4]ReynoldsEC，Cain cj，Webber FL．Amicariogenicity of tryptic casein and synthetic-phosphopeptides in the rat[J].J DentRes，1995，74：1272PMID: 7629336.

[5]Eichmiller FC．Promising new dental materials on the horizon[J]．Compend ContinEduc Dent,1997，18(3)：254-260．PMID: 9533324.

[6]張力，李宗同，石玉琢.磷酸多肽對牙齒再礦化的實驗研究[J].現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志,1999，13（1）:15-17

[7]趙瓊芝，蔡 瑤.酪蛋白磷酸多肽鈣氟磷復(fù)合體對牙釉質(zhì)缺損再礦化的實驗研究[J].中華口腔醫(yī)學(xué)雜志，2001，36(6)：421-423.

[8]余艷崧，伍 虹，陳偉良，等.酪蛋白磷酸多肽對牙釉質(zhì)齲再礦化作用的初步研究[J].實用醫(yī)學(xué)雜志，2002，l8(10)：1054-1055.

[9]伍虹，鄭美華，葉劍濤，等.磷酸多肽對牙釉質(zhì)齲再礦化作用的研究[J].實用醫(yī)學(xué)雜志，2003，l9 (12)：1336-1337.

[10]李 梅,章錦才,許曼波,等.酪蛋白磷酸多肽牙膏抑制釉質(zhì)脫礦和促進釉質(zhì)再礦化的實驗研究[J].口腔醫(yī)學(xué)，2004，24(4)：199-201.

[11]周春華,孫新華,黃洋,等. CPP-ACP與氟促進脫礦牙釉質(zhì)再礦化的顯微放射定量分析[J].吉林大學(xué)學(xué)報,2008，34（6）：1022-1026.

[12]劉燁,陳溯,張振庭.含氟酪蛋白磷酸肽-磷酸鈣復(fù)合物對酸蝕牙釉質(zhì)顯微硬度的影響[J].北京口腔醫(yī)學(xué),2012,20(1):22-24.

[13]劉興榮,徐皚，李艷萍，等.酪蛋白磷酸肽鈣磷復(fù)合體對變形鏈球菌生長、產(chǎn)酸的影響[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2006，33（10）：1815-1817.

[14]劉興榮,徐皚，李艷萍，等.酪蛋白磷酸肽鈣磷復(fù)合體對變形鏈球菌產(chǎn)酸影響的實驗研究[J].現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志，2007，21（1）：63-65.

[15]李艷萍,劉興榮, 徐皚，等.酪蛋白磷酸肽鈣磷液對發(fā)酵乳桿菌產(chǎn)酸影響的實驗研究[J]，牙體牙髓牙周病學(xué)雜志，2006，16（11）：627-629.

[16]嚴焱，盛江筠，劉艷玲,等.酪蛋白磷酸多肽體外抑菌實驗研究[J]，口腔醫(yī)學(xué)縱橫雜志，2000，16（4）：260-261.

[17]魏華,石四箴．酪蛋白磷酸多肽聯(lián)合鈣磷的抗齲作用[J].復(fù)旦大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2003，30(3)：297-298.

[18]廖福琴,厲松,盛敏，等．酪蛋白磷酸多肽－無定形磷酸鈣在正畸治療中預(yù)防牙釉質(zhì)脫礦的體外研究［J].現(xiàn)代口腔醫(yī)學(xué)雜志，2008，22(5): 524-527.

[19]付洪,梁芮,肖悅,等.護牙素在正畸治療中減少對牙齒脫礦及促進再礦化的功效研究[J].華西口腔醫(yī)學(xué)雜志，2008,26(3):301-305.

[20]姜濤,楊東偉.護牙素在固定矯治術(shù)中對牙釉質(zhì)脫礦的應(yīng)用研究[J].臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志，2008,24（3）：166-167.

[21]嚴維,王洋. 護牙素在預(yù)防正畸患者釉質(zhì)脫礦中的應(yīng)用研究[J].當代醫(yī)學(xué),2011,36(17):29-30.

[22]韓元華,石晶,嚴芳,等.正畸治療患者使用 GC護牙素預(yù)防釉白斑的護理[J].護理學(xué)雜志,2013,28(6):38-39.

[23]陳琛,韓亞琨,程敏,等.GC 護牙素聯(lián)合 Beyond 冷光美白治療氟斑牙術(shù)后敏感性的評價［J］.中國地方病防治雜志，2011，10（5）：390-392.

[24]易黔林.GC護牙素治療牙本質(zhì)敏感的8周臨床療效觀察［J］.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(8):1841-1842.

[25]許建芳,姚成林.護牙素對烤瓷全冠預(yù)備后基牙敏感程度的影響［J].廣東醫(yī)學(xué)，2012,33（7）:2177-2178.

[26]劉燁,陳溯,張振庭.含氟酪蛋白磷酸肽-磷酸鈣復(fù)合物對牙齒耐磨性的影響［J］.北京口腔醫(yī)學(xué),2012,2(20):74-76.

[27]李海清,馬晟利,劉永紅.酪蛋白磷酸肽鈣磷復(fù)合體對鄰面去釉牙釉質(zhì)再礦化的研究［J］.中國傷殘醫(yī)學(xué),2012,20(6):57-58.

[收稿日期]2014-03-14[修回日期]2014-04-15

編輯/李陽利