賽 娜，張緒梅，吳蘊(yùn)棠，黃國(guó)偉

（天津醫(yī)科大學(xué)，天津 300070）

研究性學(xué)習(xí)是在素質(zhì)教育的背景下，經(jīng)多年的教育實(shí)踐形成的創(chuàng)造性教育手段。在校大學(xué)生作為我國(guó)今后發(fā)展的生力軍，其素質(zhì)的全面提高關(guān)乎我國(guó)今后的發(fā)展，因此，將研究性學(xué)習(xí)廣泛應(yīng)用到大學(xué)教學(xué)中是十分必要的。研究性學(xué)習(xí)是指學(xué)生在教師的指導(dǎo)下，結(jié)合課程教學(xué)，圍繞專門的課題，以個(gè)人或小組合作的形式通過(guò)類似科學(xué)研究的方式主動(dòng)獲取知識(shí)、應(yīng)用知識(shí)、發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、解決問(wèn)題的學(xué)習(xí)過(guò)程[1-3]。該教學(xué)方法強(qiáng)調(diào)學(xué)生的親自實(shí)踐過(guò)程，使學(xué)生直接獲取經(jīng)驗(yàn)，養(yǎng)成正確的科學(xué)精神和科學(xué)態(tài)度，掌握基本的科學(xué)研究方法，提高綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決實(shí)際問(wèn)題的能力。預(yù)防醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)作為醫(yī)學(xué)院校教育中必不可少的組成部分，已逐漸成為一門臨床、護(hù)理、基礎(chǔ)及口腔、藥學(xué)等專業(yè)本科生的重要課程，具有很強(qiáng)的實(shí)踐性和應(yīng)用性，在該學(xué)科教學(xué)中進(jìn)行研究性學(xué)習(xí)，對(duì)于培養(yǎng)學(xué)生實(shí)踐創(chuàng)新能力具有深刻意義[4-5]。另外，很多高校的實(shí)驗(yàn)室均可對(duì)學(xué)生開(kāi)放，從而使學(xué)生有更多機(jī)會(huì)接觸到大型分析儀器，如高效液相色譜儀、氣相色譜儀、化學(xué)發(fā)光免疫分析儀等，這對(duì)預(yù)防醫(yī)學(xué)專業(yè)教學(xué)引入研究性學(xué)習(xí)提供了便利條件[6-7]。本文借鑒了蘇霍姆林斯基提出的研究性學(xué)習(xí)法，并將其應(yīng)用于預(yù)防醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，達(dá)到了很好的教學(xué)效果?，F(xiàn)將實(shí)驗(yàn)教學(xué)過(guò)程介紹如下。

1 實(shí)驗(yàn)教學(xué)過(guò)程

1.1 教學(xué)模式

根據(jù)研究性學(xué)習(xí)法以及預(yù)防醫(yī)學(xué)課程的教學(xué)特點(diǎn)，筆者將整個(gè)實(shí)驗(yàn)教學(xué)過(guò)程設(shè)置為提出課題→文獻(xiàn)查閱與設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)→點(diǎn)評(píng)設(shè)計(jì)→實(shí)施實(shí)驗(yàn)→實(shí)驗(yàn)總結(jié)→結(jié)果評(píng)價(jià)等幾個(gè)環(huán)節(jié)[8]。下面以“血漿中S-腺苷同型半胱氨酸（SAM）含量測(cè)定”為例進(jìn)行進(jìn)一步說(shuō)明。

1.2 提出課題

給學(xué)生進(jìn)行專題講座，讓學(xué)生了解當(dāng)今預(yù)防醫(yī)學(xué)的研究熱點(diǎn)以及發(fā)展趨勢(shì)，并引出“血漿中SAM含量測(cè)定”這個(gè)課題。近年來(lái)大量研究表明，高同型半胱氨酸血癥與多種疾病相關(guān)，特別是心腦血管的栓塞性疾病。血液中同型半胱氨酸的濃度已被認(rèn)為是這類疾病的一個(gè)新的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，并成為研究這類疾病的病因及預(yù)防等方面的一個(gè)新熱點(diǎn)。同型半胱氨酸通過(guò)S-腺苷同型半胱氨酸水解酶催化，與腺苷縮合成SAM。通過(guò)檢測(cè)SAM的濃度可在一定程度上反映血液中同型半胱氨酸的水平。

1.3 文獻(xiàn)查閱

將該研究的具體實(shí)施要求明確告訴學(xué)生，為學(xué)生提供幾個(gè)收集文獻(xiàn)的思路以及整理文獻(xiàn)的方法。要求學(xué)生查閱文獻(xiàn)資料，了解和掌握他們所獲得的資料，挑選出有利于了解和實(shí)施該課題的幾篇文獻(xiàn)，并標(biāo)出參考關(guān)鍵點(diǎn)。

1.4 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

在學(xué)生充分消化吸收文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，將學(xué)生每3人分為一組，發(fā)揮學(xué)生的積極性，讓他們充分討論，最終確定出具體的課題設(shè)計(jì)方案，撰寫開(kāi)題報(bào)告，內(nèi)容包括實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c意義、實(shí)驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)的收集與整理、實(shí)驗(yàn)進(jìn)度及實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)等。

1.5 點(diǎn)評(píng)設(shè)計(jì)

每組選出一名學(xué)生，將設(shè)計(jì)方案以答辯的形式進(jìn)行敘述，教師和學(xué)生一起討論課題設(shè)計(jì)方案的可行性。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有條件、經(jīng)費(fèi)等因素對(duì)實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行評(píng)估，讓學(xué)生自己總結(jié)思考，比較各個(gè)方案的優(yōu)缺點(diǎn)。對(duì)于本課題，主要有以下幾種檢測(cè)方法：（1）免疫酶聯(lián)法，其測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)單，但所需試劑昂貴；（2）毛細(xì)管電泳法，其檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、檢測(cè)時(shí)間短，但需要復(fù)雜的衍生過(guò)程；（3）比色法，其檢測(cè)快速，但檢測(cè)靈敏度不高；（4）高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定血液中的SAM，學(xué)生最終選擇了此方法。

1.6 實(shí)施實(shí)驗(yàn)

在教師的指導(dǎo)下，要求學(xué)生熟練掌握高效液相色譜技術(shù)，包括儀器的使用、維護(hù)、軟件操作等。根據(jù)確定的實(shí)驗(yàn)方案，學(xué)生利用課余時(shí)間在實(shí)驗(yàn)室自己動(dòng)手準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料，配制各種實(shí)驗(yàn)試劑。教師負(fù)責(zé)現(xiàn)場(chǎng)指導(dǎo)，解答學(xué)生實(shí)驗(yàn)中遇到的難題，啟發(fā)學(xué)生思考。

1.7 實(shí)驗(yàn)總結(jié)

要求學(xué)生整理實(shí)驗(yàn)過(guò)程中學(xué)到的知識(shí)與技能，概括操作中的注意事項(xiàng)，并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行討論、分析。在討論的過(guò)程中，讓學(xué)生發(fā)表自己的看法，依靠學(xué)生相互之間的討論進(jìn)一步對(duì)知識(shí)進(jìn)行鞏固和補(bǔ)充。教師全程進(jìn)行點(diǎn)評(píng)，并對(duì)學(xué)生不理解或理解不透的內(nèi)容進(jìn)行引導(dǎo)和分析，指導(dǎo)學(xué)生優(yōu)化和處理所得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，明確告訴他們論文的書寫格式，要求每位學(xué)生撰寫一篇小論文。

1.8 結(jié)果評(píng)價(jià)

根據(jù)學(xué)生的平時(shí)表現(xiàn)、自身進(jìn)步、上交的實(shí)驗(yàn)結(jié)果和論文等，對(duì)學(xué)生進(jìn)行綜合實(shí)驗(yàn)?zāi)芰Φ目己?。通過(guò)考核，不僅加強(qiáng)了學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)課的理解和重視，而且有利于進(jìn)一步增強(qiáng)學(xué)生的實(shí)際操作能力、分析問(wèn)題能力和解決問(wèn)題能力。

2 實(shí)驗(yàn)教學(xué)效果

2.1 調(diào)動(dòng)了學(xué)生的主觀能動(dòng)性

在整個(gè)教學(xué)過(guò)程中，以學(xué)生為主體，教師通過(guò)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、加強(qiáng)研究性教學(xué)，力求學(xué)生在研究性的學(xué)習(xí)中不僅能夠掌握基本的儀器操作和實(shí)驗(yàn)技能，還能夠在實(shí)踐中積極探討實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果的關(guān)系，激發(fā)學(xué)生內(nèi)在的學(xué)習(xí)興趣，調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)的主動(dòng)性、積極性和創(chuàng)造性。由于實(shí)驗(yàn)方案是自行設(shè)計(jì)并進(jìn)行答辯，所以學(xué)生必須有足夠的理論和實(shí)驗(yàn)資料來(lái)支持，這促使他們查閱資料、研究方法、探索原理、設(shè)計(jì)方案、檢測(cè)結(jié)果，探究每一個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟的可能性與可行性，并從中體會(huì)到把知識(shí)運(yùn)用于實(shí)踐的樂(lè)趣。

2.2 學(xué)生了解并參與了課題研究過(guò)程

學(xué)生通過(guò)文獻(xiàn)調(diào)研、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案、進(jìn)行具體實(shí)驗(yàn)、統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果、撰寫論文等過(guò)程，熟悉了科學(xué)課題研究的全過(guò)程，逐步培養(yǎng)了自身的科學(xué)分析能力、獨(dú)立思考能力和嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)作風(fēng)，這為其今后的科研工作打下了良好的基礎(chǔ)。

2.2.1 HPLC 方法作為分析手段 通過(guò)查閱文獻(xiàn)，學(xué)生了解到HPLC的分析原理和HPLC的一般檢測(cè)流程，利用HPLC紫外檢測(cè)器對(duì)SAM標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行了檢測(cè)。SAM標(biāo)準(zhǔn)品的HPLC分析條件是：Venusil MP-C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5μm），流動(dòng)相為50mmol/L NaH2PO4緩沖液（pH 4.38），進(jìn)樣量為30μL，流速為1.0mL/min，柱溫為30℃，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm。SAM標(biāo)準(zhǔn)品高效液相色譜圖如圖1所示。從圖1可見(jiàn)，SAM出峰時(shí)間為12.6分鐘。

圖1 SAM 標(biāo)準(zhǔn)品高效液相色譜圖

建立的SAM標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖2。從圖2可知，濃度與響應(yīng)值（峰高）成正比，重復(fù)性好。SAM的線性濃度范圍是0.05～2.0 mg/mL，檢出限為0.011mg/mL，定量限為0.027mg/mL。

圖2 SAM標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2.2 HPLC 血漿SAM 檢測(cè)分析方法的建立 在色譜分析中，樣品處理是一個(gè)既耗時(shí)又極易導(dǎo)致誤差的步驟。樣品處理的好壞直接影響色譜分析的最終結(jié)果。本研究中的血漿樣品除含有水分外，還有各種蛋白、無(wú)機(jī)鹽、碳水化合物、激素等成分，復(fù)雜的基質(zhì)背景會(huì)對(duì)被分析目標(biāo)化合物的提取、分離、凈化和測(cè)定等過(guò)程造成干擾。在本研究中，學(xué)生歸納了兩種樣品的處理方法。經(jīng)驗(yàn)證，樣品處理方法具體為：提取200μL血漿置于1.5mL離心管中，加入400 g/L三氯乙酸40μL，冰上靜置30分鐘，以14 000 r/min離心20分鐘，取上清液180μL，用0.22μm針頭過(guò)濾器過(guò)濾，進(jìn)樣分析。

經(jīng)過(guò)查閱文獻(xiàn)，學(xué)生了解到標(biāo)準(zhǔn)曲線法要求外部環(huán)境嚴(yán)格一致，因此進(jìn)行了外標(biāo)法實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。在外標(biāo)法實(shí)驗(yàn)條件下，不同時(shí)間、不同操作人員對(duì)SAM的測(cè)定和樣品中SAM含量測(cè)定分別進(jìn)行了3次。由表1可見(jiàn)，該方法回收率為94.14%～104.48%，標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于2.00%，重復(fù)性與精密度良好，可以滿足實(shí)驗(yàn)的要求。

表1 SAM回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.3 提高了學(xué)生的合作能力

團(tuán)隊(duì)合作精神是組織文化的一部分，良好的分工與合作可將每個(gè)人安排至合適的崗位，充分發(fā)揮集體的潛能。從實(shí)驗(yàn)時(shí)間的安排、實(shí)驗(yàn)流程以及個(gè)人分工，均需要同組學(xué)生團(tuán)結(jié)合作。此外，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程還培養(yǎng)了學(xué)生的大局意識(shí)、協(xié)作精神和服務(wù)精神，增強(qiáng)了學(xué)生的責(zé)任感及自信心，這些素質(zhì)在今后的社會(huì)實(shí)踐中也是相當(dāng)重要的。

3 存在的問(wèn)題

3.1 需要加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室管理

本教學(xué)法主要是在教師引導(dǎo)下讓學(xué)生自主完成實(shí)驗(yàn)研究工作，從儀器設(shè)備的開(kāi)啟使用到儀器的維護(hù)保養(yǎng)；從溶液的配制到定容、移液管的使用等，均需要學(xué)生正確進(jìn)行操作，否則不僅會(huì)影響實(shí)驗(yàn)成敗，而且容易造成試劑的浪費(fèi)和儀器設(shè)備的損壞。為了確保實(shí)驗(yàn)合理有效進(jìn)行，必須加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室管理，制訂相應(yīng)的管理措施。

3.2 需要投入更多的人力和物力

在本實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，需要保證教師隨時(shí)隨地及時(shí)解決實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的疑難問(wèn)題，因此需要投入的人力、物力要比常規(guī)教學(xué)法大得多。此外，由于受許多因素的限制，如教學(xué)時(shí)間的安排、教學(xué)經(jīng)費(fèi)、師資力量、儀器設(shè)備等，學(xué)生的一些設(shè)計(jì)也不能付諸實(shí)施。因此，不同專業(yè)可根據(jù)自身的條件，合理安排教學(xué)經(jīng)費(fèi)、師資力量、教學(xué)時(shí)間等。

[1]王麗威，閆晗，郭旭穎，等. 研究性學(xué)習(xí)在食品微生物學(xué)課程教學(xué)中的運(yùn)用[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（33）：20833-20834，20836.

[2]周光禮，姜嘉樂(lè). 研究性學(xué)習(xí)：本科教學(xué)改革的主導(dǎo)模式[J]. 中國(guó)高等教育，2009，12（20）：40-42.

[3]葉國(guó)榮，陳達(dá)強(qiáng)，吳碧艷.高校本科生教育中研究型教學(xué)模式探討[J].中國(guó)高教研究，2009，2（3）：90-91.

[4]龍澈婧.預(yù)防醫(yī)學(xué)教學(xué)中存在的問(wèn)題及對(duì)策[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2009（12）：1911-1912.

[5]王曉波，董秀，耿薇.預(yù)防醫(yī)學(xué)教學(xué)中的醫(yī)學(xué)生素質(zhì)教育[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2006（4）：174.

[6]魯奇林. 高效液相色譜課程教學(xué)中的幾點(diǎn)嘗試[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索，2008（8）：117-118.

[7]李麗潔，施瑞.高效液相分析法在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索，2001（2）：14-15.

[8]王春梅，陳慶燕. 研究性學(xué)習(xí)法在操作系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用[J].福建電腦，2008，12（6）：207-208.■