張文蘭 王永福 白 力 尹芳蕊 趙劍波 (包頭醫(yī)學(xué)院風(fēng)濕免疫研究所，包頭 014010)

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一種常見的、嚴(yán)重的致畸性自身免疫疾病。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，越早對RA 進(jìn)行治療干預(yù)，就能越有效地控制該病的進(jìn)一步惡化，并有較好的預(yù)后。因此，早期診斷和治療對阻止該疾病對關(guān)節(jié)的破壞非常必要。最早應(yīng)用于RA 臨床診斷的血清學(xué)指標(biāo)為類風(fēng)濕因子(Rheumatoid factor，RF)，雖然其敏感性較高，但特異性較差，在其他風(fēng)濕疾病、感染性疾病及1%～5%的正常人群中均可呈陽性。后來，又陸續(xù)出現(xiàn)了抗核周因子(APF)、抗角蛋白抗體(AKA)等。近年來，抗環(huán)瓜氨酸多肽(anti-cyclic citrullin-ated peptide，anti-CCP)抗體被廣泛用于RA 的早期診斷，具有靈敏度高、特異性好的特點(diǎn)，是早期診斷RA 的血清學(xué)標(biāo)志性抗體。最近，有研究表明，抗突變型瓜氨酸波形蛋白(anti-mutated citrullinated vimentin，anti-MCV)抗體是另外一種診斷RA 的敏感性和特異性都較好的實(shí)驗(yàn)診斷指標(biāo)［1-5］。

Anti-MCV 是1994 年由Despres 等發(fā)現(xiàn)的一種自身抗體，靶抗原波形蛋白是一種重要的細(xì)胞骨架蛋白，主要在中胚層起源的細(xì)胞中表達(dá)，它在凋亡的巨噬細(xì)胞內(nèi)的肽酰精氨酸亞氨酶的作用下瓜氨酸化，這一過程改變了蛋白結(jié)構(gòu)并增加了潛在的抗原決定簇(與RA 相關(guān)的靶抗原瓜氨酸)［6，7］。本文通過對RA患者血清中anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 進(jìn)行檢測，探討anti-MCV 抗體在RA 診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 對象與方法

1.1 研究對象 487 例各種風(fēng)濕性疾病患者均為2013 年3 月至2014 年3 月我院風(fēng)濕科門診及住院病例，其中男性138 例，女性349 例，年齡14～76歲，平均(49±18)歲。

1.1.1 RA 患者組 共359 例，其中男性87 例，女性272 例，年齡24～77(48±18)歲。均符合2009年ACR 和歐洲抗風(fēng)濕病聯(lián)盟(EULAR)提出的新的RA 分類標(biāo)準(zhǔn)和評分系統(tǒng)［8］。

1.1.2 疾病對照組 共128 例，包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)34 例，男性10 例，女性24 例，年齡14～72(46±18)歲;原發(fā)性干燥綜合征(pSS)22 例，男性9 例，女性13 例，年齡16～74(47±17)歲;混合性結(jié)締組織病(MCTD)28 例，男性10 例，女性18 例，年齡18～70 歲，平均(48±18)歲;骨關(guān)節(jié)炎16 例，男性7 例，女性9 例，年齡17～76 歲，平均(50±20)歲;強(qiáng)直性脊柱炎15 例，男性9 例，女性6 例，年齡14～68 歲，平均(44±13)歲;痛風(fēng)13 例，男性6 例，女性7 例，年齡20～69 歲，平均(45±17)歲。

1.1.3 正常對照組 共90 例，其中男性28 例，女性62 例，年齡23～70 歲，平均(46±17)歲。均為我院體檢健康者。

1.2 研究方法 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法定量檢測anti-MCV 和anti-CCP，檢測試劑盒分別由德國ORGENTEC 公司和上?？菩律锛夹g(shù)股份有限公司生產(chǎn)。anti-MCV ＞20 U/ml 為陽性，anti-CCP ＞25 U/ml 為陽性。采用動(dòng)態(tài)免疫散射比濁法檢測RFIgM，＞15 U/ml 為陽性，儀器和試劑均由西門子股份有限公司提供。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 17.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。采用四格表計(jì)算抗體的靈敏度和特異性，兩個(gè)樣本的比較用t 檢驗(yàn)和χ2檢驗(yàn)。

表1 anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在各種疾病中的陽性例數(shù)及陽性率Tab.1 Positive cases and positive rates of anti-MCV，anti-CCP and RF-IgM

2 結(jié)果

2.1 anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在各種疾病中的陽性例數(shù)及陽性率 從表1 中可以看出，anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在RA 患者組中的陽性率均明顯高于疾病對照組和正常對照組(P ＜0.05)。anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在疾病對照組中也有一定的陽性率。anti-MCV 在正常對照組中僅一例陽性，定量測定值為26 U/ml，為低滴度的陽性。RF-IgM 在正常對照組中有8 例陽性，陽性率為8.9%。對這8 例進(jìn)行進(jìn)一步分析得知，它們的定量測定值范圍是(18.9～31.2)U/ml，年齡分布范圍為53～62 歲，其中男性3 例，女性5 例。而anti-CCP在正常對照組中無一例陽性。

2.2 anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在RA 中的診斷意義見表2 從表2 中可以看出，單一指標(biāo)中，anti-MCV 具有最高的靈敏度，其次是RF-IgM，最后是anti-CCP;但是在特異性上，anti-CCP 具有最高的特異性，其次是anti-MCV，最后是RF-IgM;所以綜合來看，anti-MCV 是一個(gè)靈敏度和特異性都還不錯(cuò)的指標(biāo)。聯(lián)合檢測anti-MCV 和anti-CCP，靈敏度降低到70.2%;但特異性增加到98.7%。如同時(shí)檢測anti-MCV 和anti-CCP，并以二者中任何一種指標(biāo)為陽性標(biāo)準(zhǔn)，那么，對RA 的靈敏度和特異性分別為89.5%和97.6%。

表2 anti-MCV、anti-CCP 及RF-IgM 在RA 中的診斷意義Tab.2 Diagnostic significance of anti-MCV，anti-CCP and RF-IgM in RA

3 討論

RA 是一種累及周圍關(guān)節(jié)為主的多系統(tǒng)性炎癥性自身免疫疾病。靶器官主要是關(guān)節(jié)滑膜，出現(xiàn)經(jīng)久不愈的炎癥、增厚、血管翳形成、軟骨及軟骨下骨質(zhì)破壞，最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形及強(qiáng)直而致殘。近年的研究認(rèn)為，早期診斷、早期積極地給予病情緩解藥物能及時(shí)控制病情，減少骨關(guān)節(jié)的破壞并改善預(yù)后［9］。最早應(yīng)用于RA 臨床診斷的血清學(xué)指標(biāo)為RF，臨床主要檢測IgM 型。RF-IgM 雖然敏感性較高，但其特異性較差，限制了它的診斷作用。在RA患者血清中還可以檢測到幾種自身抗體，如抗核周因子抗體、抗角蛋白抗體及抗Sa 抗體等，其表位都含瓜氨酸，提示瓜氨酸是風(fēng)濕疾病自身抗體靶抗原的決定簇。而anti-MCV 與anti-CCP 有共同的抗原表位即瓜氨酸，有可能作為特異性抗體用于RA 的早期診斷。因此，針對瓜氨酸波形蛋白的特異性抗體——anti-MCV 逐漸成了新的研究熱點(diǎn)。

本文研究結(jié)果顯示:anti-MCV、anti-CCP 和RFIgM 單獨(dú)作為RA 的檢測指標(biāo)時(shí)，其敏感度均比較高，分別為85.1%、76.7%和82.7%，特異性分別為93.2%、95.1%和80.1%，并且三個(gè)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)在RA 患者組中的陽性率均明顯高于疾病對照組和正常對照組。anti-MCV 診斷RA 的靈敏度最高，而anti-CCP 的特異性最好;兩者聯(lián)合檢測靈敏度降低，但特異性最高。進(jìn)一步分析RA 患者anti-MCV 與anti-CCP、RF-IgM 的關(guān)系，結(jié)果顯示，anti-MCV 與anti-CCP 有較好的關(guān)聯(lián)性，這可能與anti-MCV 和anti-CCP 有共同的抗原表位有關(guān)。雖然anti-MCV 與RF-IgM 也有關(guān)，但關(guān)系不大。anti-MCV、anti-CCP和RF-IgM 三個(gè)檢測指標(biāo)兩兩組合檢測時(shí)發(fā)現(xiàn)，以anti-MCV 或anti-CCP 為RA 診斷標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，檢測的敏感度和特異性均達(dá)到了理想的水平，分別為89.5%和97.6%。由于RF-IgM 的特異性方面的缺陷，同時(shí)進(jìn)行anti-MCV、anti-CCP 的檢測對臨床診斷顯得非常重要。

綜上所述，作者認(rèn)為，anti-MCV 對RA 有較高的診斷價(jià)值，對于篩查和輔助診斷RA 具有重要意義。

［1］何東儀，程 鵬，李姝玉，等.突變型瓜氨酸波形蛋白抗體在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷中的意義［J］.現(xiàn)代免疫學(xué)，2010，30(4):318-322.

［2］賈淑芳，袁 璐，劉書蓉，等.200 例類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體檢測結(jié)果分析［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10(10):1228-1229.

［3］Ahmed AS，Saif AG，Safla AM，et al.Evaluation of anti-mutated citrullinated vimentin antibodies，anti-cyclic citrullinated peptide antibodies and rheumatoid factor in Omani patients with rheumatoid arthritis［J］.Int J Rheumatol，2012，10(8):1151-1156.

［4］許軍華，劉樹業(yè).血清抗CCP 抗體、抗MCV 抗體與RF 聯(lián)合檢測診斷類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的臨床價(jià)值［J］.山東醫(yī)藥，2013，53(22):38-40.

［5］Ursum J，Nielen MM，van Schaardenburg D，et al.Antibodies to mutated citrullinated vimentin and disease activity score in early arthritis:a cohort study［J］.Arthritis Res Ther，2008，10(1):12-17.

［6］程 鵬，鐘麗民，沈 杰，等.抗突變型瓜氨酸波形蛋白檢測在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的意義［J］.中國免疫學(xué)雜志，2008，24(11):1028-1030.

［7］Bang H，Egerer K，Gauliard A，et al.Mutation and citrullination modifies vimentin to a novel autoantigen for rheumatoid arthritis［J］.Arthritis Rheum，2007，56(8):2503-2505.

［8］Aletaha D，Neogi T，Silman AJ，et al.2010 Rheumatoid arthritis classification criteria:an American College of Rheumatology/European League gainst Rheumatism collaborative initiative［J］.Arthritis Rheum，2010，62(9):2569-2581.

［9］秦白茹，阮福強(qiáng).抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的應(yīng)用［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2010，37(23):4506-4508.