魏 昕 楊舉倫 (遵義醫(yī)藥高等?？茖W校病理教研室，遵義 563000)

乳腺癌是最常見的困擾中老年女性的惡性腫瘤之一，臨床流行病學研究表明乳腺癌已成為歐美國家發(fā)病率最高的惡性腫瘤。乳腺癌的治療與預防在于乳腺癌的早期診斷，但是由于其發(fā)病隱匿，早期臨床癥狀不明顯，易被患者和醫(yī)生忽視，確診時多已為晚期甚至伴有遠處淋巴轉(zhuǎn)移灶的形成，造成乳腺癌最后保乳手術(shù)率低，低治愈率的結(jié)局［1］。由于乳腺癌部位的特殊性，臨床上乳腺癌治療的主要方式仍為化療或是手術(shù)結(jié)合化療的綜合治療。乳腺癌化療方式目前以蒽環(huán)類化療藥物為主，但是不同患者對化療敏感性不同［2］，為此，本研究利用我院病例資源，探討分析乳腺癌組織中核增殖相關(guān)抗原(Ki-67)及增殖細胞核抗原(PCNA)表達變化與乳腺癌的關(guān)系及其對乳腺癌化療敏感性的關(guān)系，為臨床乳腺癌的有效化療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象為我院近年來就診的已經(jīng)病理確診的84 例原發(fā)性乳腺癌患者。年齡為21～63 歲，平均年齡為(41.2 ±1.4)歲;所有患者均經(jīng)過臨床確診，且無其他心血管或神經(jīng)系統(tǒng)等嚴重疾患，病理診斷及臨床分期參考2010 年中國版乳腺癌NCCN 指南［3］。

1.2 化療方案 所有患者均為首次確診，且無惡性腫瘤病史。所選患者化療CEF 方案共48 例:第1、8 天環(huán)磷酰胺800 mg/m2，第2、3 天吡柔比星60 mg/m2，第4～7 天5-FU 500 mg/m2;CTF 方案36例:第2、3 天吡柔比星30 mg/m2，或第2 天吡柔比星60 mg/m2，其余時間與CEF 方案一致，所有藥物均為靜脈注射，化療時間為2～7 個周期。

1.3 Ki-67 及PCNA 檢測方法［4］采用免疫組化SP 法，實驗步驟按說明書進行。經(jīng)抗原修復，DAB顯色。Ki-67、PCNA 陽性均為核呈棕黃色，計算陽性細胞占腫瘤細胞的百分比，陽性細胞數(shù)＞25%判為陽性。表達陽性以下簡稱陽性，記為“+”，表達陰性以下簡稱陰性，記為“-”。整個切片未見陽性細胞為“-”，陽性細胞數(shù)1%～25%定為“+”，25%～50%為“++”，50%～75%為“+++”，陽性細胞在75%以上定位“++++”。

1.4 化療敏感性評定方法 化療敏感性評定以化療效果決定，而化療效果以原發(fā)灶的變化來衡量，化療前后分別測量腫瘤最大直徑。根據(jù)“實體瘤治療療效評價標準(RECIST)”［5］進行評估，乳腺癌原發(fā)灶臨床緩解分為:臨床檢測手段未發(fā)現(xiàn)腫瘤為完全緩解(CR);腫瘤最長徑之和縮小30%或以上為部分緩解(PR);腫瘤非PR 且非進展(PD)則定義為穩(wěn)定(SD)，PD 為腫瘤最長徑之和增加20%，病灶增加前非CR、非PR 且非SD。本研究中以CR+PR 計算腫瘤化療總有效率。

1.5 統(tǒng)計學處理 研究中所有數(shù)據(jù)均使用SPSS17.0 統(tǒng)計學軟件，計數(shù)資料采用χ2檢驗，計量資料用±s 表示，進行t 檢驗，P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 研究患者一般情況 84 例研究患者中浸潤性導管癌58 例，浸潤性小葉癌8 例，單純癌8 例，其他類型10 例;TNM 分期:Ⅰ期33 例，Ⅱ期38 例，Ⅲ、Ⅳ期13 例。所有患者均于手術(shù)治療后行化療治療。

2.2 Ki-67 及PCNA 表達及其與乳腺癌關(guān)系 通過免疫組化方法檢測到的Ki-67 及PCNA 表達陽性并結(jié)合患者一般臨床資料，Ki-67 陽性率與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤分型分期呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。而PCNA 陽性率與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移成正相關(guān)，P＜0.05，與腫瘤臨床分型分期無關(guān)，P ＞0.05。具體數(shù)值情況見表1。

表1 Ki-67 及PCNA 表達及其與乳腺癌的關(guān)系Tab.1 Ki-67 and PCNA and its relationship with breast cancer

表2 Ki-67 及PCNA 單項及聯(lián)合檢測與乳腺癌化療敏感性關(guān)系Tab.2 Ki-67 and PCNA individual and joint detection and breast cancer chemosensitivity relations

2.3 Ki-67 及PCNA 單項及聯(lián)合檢測與乳腺癌化療敏感性關(guān)系 單項檢測時，Ki-67+總有效率為80.8%明顯高于Ki-67-的56.2%，P＜0.05。PCNA-有效率為72.7%明顯高于PCNA+45.2%，P＜0.05。提示，Ki-67+、PCNA-可為乳腺癌化療敏感性的判定指標。聯(lián)合檢測時，與Ki-67+/PCNA-組相比，Ki-67+/PCNA+有效率無差異，P ＞0.05，而Ki-67-/PCNA+和Ki-67-/PCNA-有效率明顯降低，P＜0.05。見表2。

3 討論

乳腺癌是女性惡性疾病中最常見的一種惡性腫瘤，其好發(fā)年齡為40～60 歲，但隨著流行病學的深入，目前其發(fā)病年齡越來越年輕化，發(fā)病率也呈增長趨勢，其原因仍未完全明了，可能與某些基因的缺失或過表達有關(guān)［6］。乳腺癌由于其發(fā)病部位的特殊性，成為很多女性十分擔憂的原因。一旦發(fā)病，最根本的解決辦法是進行乳房切除及淋巴結(jié)清掃這種根治性手術(shù)，很多患者為追求形體的完美，選擇化療治療。因此，尋找一種有效的化療方式，找到能預測化療敏感性的指標成為臨床工作的重難點。

Ki-67 是在細胞增殖過程中表達產(chǎn)生的一種核抗原，其產(chǎn)生量與細胞有絲分裂有關(guān)。Ki-67 在多種腫瘤細胞中高表達，與多種腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移、預后有關(guān)［7］。本研究中共調(diào)查84 例乳腺癌患者，其Ki-67 檢出陽性例數(shù)為52 例，陽性率為61.9%，并且提示其表達與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤臨床分期有密切正相關(guān)關(guān)系，在腫瘤分期越嚴重的患者中，其陽性表達可能性越大。在腫瘤化療敏感性的實驗中，Ki-67+患者的化療總有效率為80.8%，明顯高于Ki-67-患者的56.2%，差異有統(tǒng)計學意義，P＜0.05。

增殖細胞核抗原PCNA 是細胞核內(nèi)的一種酸性蛋白，是真核細胞DNA 合成所必需的輔酶。PCNA代表著細胞的增殖活性，活性越高其細胞間的張力越大，黏附性越低，越容易脫離原發(fā)灶，使腫瘤細胞向遠處轉(zhuǎn)移及擴散，被很多專家及學者認為是細胞增殖狀態(tài)的理想預后標志物［8］。本研究中顯示，乳腺癌中PCNA 表達陽性例數(shù)為62 例，陽性率為73.8%，研究中還提示PCNA 的表達與腫瘤臨床分型分期無明顯相關(guān)性，P ＞0.05。但是PCNA 表達與淋巴轉(zhuǎn)移情況呈正相關(guān)，即淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性的患者中PCNA 表達多為陽性，這與PCNA 促進腫瘤細胞向遠處轉(zhuǎn)移及擴散的特性是一致的。近年來國內(nèi)外一些研究表明，PCNA 與多種腫瘤的預后關(guān)系密切，有關(guān)PCNA 與乳腺癌預后的關(guān)系研究也有大量的報道［9］，認為PCNA 的表達與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、復發(fā)及預后有關(guān)。

在乳腺癌化療敏感性研究中，Ki-67+總有效率為80.8% 明顯高于Ki-67-的56.2%，P＜0.05。PCNA-有效率為72.7%明顯高于PCNA+45.2%，P＜0.05。提示，Ki-67+、PCNA-可為乳腺癌化療敏感性的判定指標。聯(lián)合檢測時，與Ki-67+/PCNA-組相比，Ki-67+/PCNA+有效率無差異，P ＞0.05，而Ki-67-/PCNA+和Ki-67-/PCNA-有效率明顯降低，P＜0.05。這表明Ki-67+及PCNA-可以作為預測乳腺癌患者化療敏感性的指標。

［1］Farooq A，Naveed AK，Azeem Z，et al.Breast and ovarian cancer risk due to prevalence of BRCA1 and BRCA2 variants in Pakistani population:a Pakistani database report［J］.J Oncol，201l，2011:632870.

［2］Liu M，Lawson G，Delos M，et al.Predictive value of the fraction of cancer cells immunolabeled for proliferating cell nuclear antigen or Ki67 in biopsies of head and neck carcinomas to identify lymph node metastasis:comparison with clinical and radiologic examinations［J］.Head Neck，2003，25(4):280-288.

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［5］楊學寧，吳一龍.實體瘤治療評價標準——RECIST［J］.循證醫(yī)學，2004，4(2):85-90.

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