況樹斌 孟建明

陜西省南鄭縣圣水鎮(zhèn)獸醫(yī)站，陜西南鄭723100

做好重大動(dòng)物疫病的監(jiān)測(cè)和預(yù)警是有效防止疫病發(fā)生的措施之一，動(dòng)物血清學(xué)檢測(cè)是動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的重要手段，制備有效合格的血清是動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的首要條件。筆者結(jié)合實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)，就常見(jiàn)動(dòng)物的采血方法及血清制備作了如下總結(jié)，供同仁參考。

1 常見(jiàn)動(dòng)物采血方法

1.1 豬血的采集

采血部位為前腔靜脈（仔豬）或耳靜脈（成年豬）。

1）前腔靜脈采血。該法適用于35～70kg的豬，可采用仰臥或站立保定。助手將豬保定好后，采血者先用75%的酒精對(duì)豬的前腔靜脈窩（位于肩胛內(nèi)側(cè)，手壓有窩狀感）進(jìn)行消毒，再手持采血器，以45～60°的傾斜度朝向心端刺入2～3cm；回抽采血器，在有血回流時(shí)，根據(jù)需要采3～5mL即可。

2）耳靜脈采血。該法適用于較大的豬（如成年母豬或種公豬）或采血較少時(shí)，可采用側(cè)臥或站立保定。助手保定好豬只后，采血者一只手拉直豬耳，另一只手先用75%酒精對(duì)耳靜脈處進(jìn)行消毒，再持采血器從遠(yuǎn)心端平行耳靜脈刺入；采血完畢時(shí)先松開握耳根的手，然后拔出采血器，再用干棉球按壓采血處約1min（直至采血部位不出血）。

1.2 牛、羊血的采集

采血部位通常為頸靜脈。

1）牛的頸靜脈采血。采用站立保定（最好在六柱欄中保定），采血者沿頸靜脈溝（對(duì)于種牛或種羊應(yīng)適當(dāng)剪毛）消毒，用一只手按壓頸靜脈下端，使其充盈怒張；另一只手持16號(hào)針頭，垂直刺入頸靜脈處1～2cm，血液即可流到采血器中；終止采血后，先松手，后拔針頭，并用酒精棉球按壓采血部位約1min。

2）羊的頸靜脈采血。采用騎式保定法保定，助手跨騎在羊背上，兩手抓住羊角或羊耳；采血者對(duì)羊的頸靜脈溝部位剪毛、消毒，一只手按壓頸靜脈下端，使其充盈怒張；另一只手將12號(hào)針頭平行于頸靜脈朝遠(yuǎn)心端刺入0.5～1.0cm，血液即可流到采血器中；采血完畢后，先松手，后拔針頭，并用酒精棉球按壓采血部位約1min。

1.3 雞血的采集

采血部位為雞翅靜脈，保定方法為臥式保定。助手將雞保定好后，采血者將雞翅拉直呈30°傾斜，消毒翅靜脈處，將采血器平行翅靜脈朝遠(yuǎn)心端刺入；血液流出后，固定采血器，回抽活塞；采血完畢后，用干棉球壓緊采血部位并拔出采血器，持續(xù)按壓采血部位直至不出血。

2 血清的制備

2.1 自然析出法

將采集的血樣呈30～45°斜放，靜置2h，待血液完全凝固后可帶回實(shí)驗(yàn)室；再將血樣立放，夏季3～5h后即可得到血清，冬、春季節(jié)由于氣溫較低，血清析出較慢，可于第2天分離到血清。

2.2 離心機(jī)分離法

此法適用于采樣任務(wù)大、時(shí)間緊的情況，將采集的血樣呈30～45°斜放，靜置，血樣凝固后置于離心機(jī)中，以3 500～4 000r／min的速度離心5～8min，即可得到所需的血清。

以上2種方法均可分離出血清，自然析出法較離心機(jī)分離法獲得的血清質(zhì)量好，但較費(fèi)時(shí)。

3 注意事項(xiàng)

3.1 采樣要有隨機(jī)性

采樣要隨機(jī)，不要挑著采，更不要專挑那些不健康、消瘦的牲畜。如果挑著采樣，檢測(cè)的結(jié)果不具有代表性，就失去了檢測(cè)的意義。

3.2 選好采血時(shí)間

由于接種疫苗后，動(dòng)物體內(nèi)要產(chǎn)生穩(wěn)定的抗體需要一定的時(shí)間和過(guò)程。因此，進(jìn)行雞新城疫疫苗、禽流感疫苗、豬瘟疫苗及牛羊口蹄疫疫苗抗體檢測(cè)，在免疫后21d采血較合適；進(jìn)行豬口蹄疫疫苗、高致性豬藍(lán)耳病疫苗抗體檢測(cè)，在免疫后28d采血較好。

3.3 做好標(biāo)記

將血樣進(jìn)行編號(hào)并做好標(biāo)記，分離血清的標(biāo)記應(yīng)與血樣編號(hào)一致；同時(shí)，填寫采樣單，并一一對(duì)應(yīng)。采樣單是對(duì)采樣品種群基本情況的簡(jiǎn)要記錄，包括畜主信息、飼養(yǎng)量、采樣量、采樣時(shí)間、免疫時(shí)間、疫苗種類和生產(chǎn)廠家、接種劑量等，均要一一填寫完整。

3.4 及時(shí)送檢

血清分離好后，有條件的應(yīng)于當(dāng)日連同采樣單一起送交上級(jí)實(shí)驗(yàn)室保存；沒(méi)有條件的則自行冷凍保存，冷藏送檢，避免因血清腐敗變質(zhì)而影響檢測(cè)結(jié)果。