毛春玲，劉萌萌，侯志廣，趙曉峰，張浩，*

（1.長春職業(yè)技術學院 食品分院，吉林長春130033；2.吉林農(nóng)業(yè)大學資源與環(huán)境學院，吉林長春130118）

食用菌是一種營養(yǎng)豐富并富有食療價值的食品，近年來在人們的餐桌上備受親賴，隨著人們對食用菌生產(chǎn)過程中安全性關注越來越高，一些農(nóng)藥在食用菌生產(chǎn)上的殘留成了關注的焦點[1-4]。本研究初步探尋了去除平菇中3種農(nóng)藥的去除方法。分別研究了貯藏法、紫外照射法、超聲洗滌法、臭氧浸泡和降解酶法去除效果，以有效的去除平菇中農(nóng)藥的殘留，達到安全食用的目的[5-9]。

1 材料

7820A 氣相色譜儀：美國Agilent；1100 液相色譜儀：美國Agilent；KED-98Ⅲ臭氧殺菌消毒機：深圳市凱爾得新綠色環(huán)保科技有限公司；KQ5200DE 超聲波儀：昆山市超聲儀器有限公司；HR2860 高速組織搗碎機：飛利浦（中國）投資有限公司。甲氰菊酯標準品、高效氯氟氰菊酯標準品、吡唑醚菌酯標準品：農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所。乙腈（殘留級）：美國TEDIA 天地公司；丙酮、正己烷、氯化鈉、無水硫酸鈉均為分析純：北京化工廠；弗羅里硅土：DikmaPure。

2 方法

2.1 樣品處理

2.1.1 模擬農(nóng)藥污染平菇的方法

平菇采摘吉林農(nóng)業(yè)大學食用菌生產(chǎn)基地，2.5%高效氯氟氰菊酯乳油、20%甲氰菊酯乳油、25%吡唑醚菌酯乳油按照推薦劑量兌水稀釋至2 L 溶液，將平菇浸泡5 min，取出自來水沖洗1 min，室內陰干備用[10]。

2.1.2 樣品處理方法

2.1.2.1 貯藏法對農(nóng)藥殘留的去除效果

將制備好的帶藥平菇分別放置于溫度為5、20、40 ℃的不同培養(yǎng)箱中，遮光處理。分別于12、24、48 h 進行采樣、分析檢測甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯和吡唑醚菌酯三種農(nóng)藥殘留量。

2.1.2.2 紫外照射法對農(nóng)藥殘留的去除效果

取制備好的帶藥平菇進行兩個處理，處理一：將帶藥平菇置于紫外燈下，分別于2、6、15min 進行紫外照射，然后采樣樣品，進行3種農(nóng)藥殘留檢測；處理二：將帶藥平菇置于室內環(huán)境下，分別于2、6、15 min 后采樣進行分析檢測。

2.1.2.3 超聲波洗滌法對農(nóng)藥殘留的去除效果

超聲波洗滌處理時間的選擇：實驗設置兩個處理，處理一：將帶藥平菇置于裝有500 mL 蒸餾水的燒杯中進行超聲波處理，處理時間分別為5、10、20 min。處理二：將帶藥平菇置于裝有500 mL 蒸餾水的燒杯中進行浸泡處理，處理時間分別為5、10、20 min。處理完畢后取出帶藥平菇自來水沖洗1 min，陰干、采樣分析檢測。

2.1.2.4 臭氧法對農(nóng)藥殘留的去除

將制備好的帶藥平菇進行兩個處理，處理一：將帶藥平菇置于裝有500 mL 蒸餾水的燒杯中，通入臭氧時間分別為5、10、20、30 min。處理二：將帶藥平菇置于裝有500 mL 蒸餾水的燒杯中進行浸泡，適當進行攪拌。浸泡時間為5、10、20、30 min。處理完后取出帶藥平菇自來水沖洗1 min 陰干、采樣分析檢測。

2.1.2.5 降解酶對平菇中農(nóng)藥的去除效果

降解酶液是本實驗室分離得到的。實驗設四個處理，即降解酶的稀釋液分別為5%、10%、20%，CK 蒸餾水。將帶藥平菇浸泡在不同處理中，震蕩浸泡15 min后，取出平菇用自來水沖洗1 min，陰干采樣、分析檢測各種處理下農(nóng)藥殘留量。

2.1.3 試樣制備

2.1.3.1 樣品提取

取平菇子實體部分切碎后，用組織搗碎機中勻漿。準確稱5.0 g 平菇勻漿樣品于100 mL 燒杯中，加入5 mL 蒸餾水、40 mL 乙腈，在高速勻漿提取2 min 后，將全部樣品轉移至布氏漏斗中進行抽濾，將濾液全部轉移至盛放10.0 g 氯化鈉的100 mL 具塞量筒中，進行勻速震蕩1 min，靜止2 min 再震蕩30 s，靜止90 min，使乙腈相和水相分層。取分層液體的上部乙腈20 mL置于250 mL 圓底燒瓶中，儀旋轉濃縮近干，氮氣吹干后備凈化使用[11]。

2.1.3.2 凈化

凈化采用玻璃層析柱。依次向玻璃層析柱內裝入2.0 g 無水硫酸鈉、2.0 g 弗羅里娃土、5.0 g 無水硫酸鈉。10 mL 正己烷預淋洗后棄去，用正己烷/丙酮（85:15 v/v）70 mL 淋洗，收集淋洗液于圓底燒瓶中，然后旋轉濃縮近干，氮氣吹干，甲氰菊酯和高效氯氟氰菊酯用正己烷定容1 mL，吡唑醚菌酯用甲醇定容1 mL，待儀器分析測定。

2.1.4 農(nóng)藥去除公式

農(nóng)藥去除率（%）=（樣品去除前農(nóng)藥殘留量-樣品去除后農(nóng)藥殘留量）/樣品去除前農(nóng)藥殘留量×100%

2.2 儀器條件

氣相色譜條件：HP-5（30 m×0.32 mm×0.25 μm）石英毛細管柱；進樣口溫度：280 ℃；檢測器溫度：320 ℃；程序升溫：150 ℃保持1 min，30 ℃/min 升到270 保持5 min；進樣量1 μL。

液相色譜條件：紫外檢測器C18 反相色譜柱，波長275 nm，流動相，甲醇：水=7:3（體積比），柱溫30 ℃，流速0.8 mL/min；進樣量：10 μL。

3 結果與分析

3.1 添加回收率測定

在空白平菇樣品中分別添加供試藥品的標準溶液。甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯添加水平0.005、0.05、0.5 mg/kg；吡唑醚菌酯添加0.01、0.1、1 mg/kg，每個處理五次重復，結果見表1。

表1 三種供試農(nóng)藥在平菇中的添加回收結果Table1 Recoveries of three kinds of pesticides in pleurotus ostreatus

甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、吡唑醚菌酯在平菇中的平均回收率分別為95.94 %～93.16 %、88.74 %～95.28%和95.32%～92.20%，變異系數(shù)分別為5.4 %～11%、5.3%～5.6%和2.5%～6.3%。甲氰菊酯，高效氯氟氰菊酯在平菇中的最小檢出濃度0.005 mg/kg，吡唑醚菌酯在平菇中的最小檢出濃度為0.006 mg/kg，表明該方法符合農(nóng)藥殘留檢測要求[12]。

3.2.1 貯藏溫度及時間對三種農(nóng)藥不同去除效果

貯藏溫度分別為5 ℃、20 ℃和40 ℃，分別于12、24、48 h 進行采樣分析檢測樣品中農(nóng)藥殘留量，實驗結果見表2。

表2 貯藏處理對平菇中供試農(nóng)藥殘留的去除率Table2 Effects of storage treatment on removal ratios of pesticide residues

由表2可以明顯看出，在不同溫度時，甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、吡唑醚菌酯3種農(nóng)藥隨貯藏時間增加，農(nóng)藥殘留量隨著時間的延長降解緩慢；而溫度對三種降解率的影響較大。3種農(nóng)藥經(jīng)過48 h 在5 ℃貯藏溫度時降解率14.1%～23.5%；貯藏溫度為40 ℃降解率為45.3%～55.2%。

3.2.2 紫外線照射對農(nóng)藥的去除效果

帶藥樣品經(jīng)紫外線分別照射2、6、15 min 后，測定樣品中農(nóng)藥殘留量，結果見表3。

表3 紫外照射對平菇中3種農(nóng)藥殘留的去除效果Table3 Effects of UV-light e treatment on removal ratios of pesticide residues

由表3可知，紫外照射處理去除率與對照比有明顯的差異。當照射時間為2 min 時，三種農(nóng)藥在平菇上的去除率僅為7.8%～10.2%；當照射時間6 min 時去除率為14.8%～20.6%；紫外照射達15 min 時，去除率達26.3%～36.3%。

3.2.3 超聲波洗滌法對農(nóng)藥的去除效果

樣品經(jīng)超聲波處理5、15、20 min 后，3種農(nóng)藥的去除率見表4。

表4 超聲波處理不同時間對平菇三種農(nóng)藥殘留的去除效果Table4 Effects of ultrasonic time treatment on removal ratios of pesticide residues

從表4可以看出，處理15 min 高效氯氟氰菊酯去除率能達到92.3 %，比其它兩種農(nóng)藥要高，而在20 min 后高效氯氟氰菊酯、甲氰菊酯和吡唑醚菌酯的去除率達分別達到93.1%、96.2%和86.7%，因此超聲波處理20 min 對于三種農(nóng)藥去除具有很好效果。

3.2.4 臭氧浸泡法對農(nóng)藥殘留的去除效果

將帶藥樣品通臭氧5、10、20 和30 min 后，測定農(nóng)藥去除效果，結果見表5。

表5 臭氧處理對平菇中供試農(nóng)藥的去除率Table5 Effects of ozone treatment on removal ratios of pesticide residues

從表5可以看出，臭氧對供試農(nóng)藥有很明顯的去除效果。臭氧對三種供試農(nóng)藥的去除率是隨著通入臭氧的時間增加而增加的，30 min 后甲氰菊酯、高效氯氰菊酯和吡唑醚菌酯去除率分別達到88.1%、85.4%和79.5.5%；因此，臭氧對三種農(nóng)藥具有明顯去除作用。

3.2.5 降解酶對平菇中農(nóng)藥的去除效果

降解酶對三種農(nóng)藥降解效果見表6。

表6 降解酶對平菇中3種供試農(nóng)藥的去除率Table6 Effects of degrading enzyme treatment on removal ratios of pesticide residues

由表6可以看出，本實驗選擇的降解酶液對甲氰菊酯具有較好的降解效果；當降解酶液濃度為20%，降解率達到92.5%，而對高效氯氟氰菊酯和吡唑醚菌酯降解僅為35.5%和21.7%；降解效果不明顯。

4 結論

本文選取了貯藏法、紫外照射法、超聲波處理法、臭氧處理和降解酶處理五種方式，研究了平菇中的甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯和吡唑醚菌酯三種農(nóng)藥殘留去除方法。實驗結果表明，紫外照射和貯藏法去除農(nóng)藥效果較為低。超聲波、臭氧法的去除效果最為理想，甲氰菊酯在超聲波和臭氧中的平均去除率均達到83.3%以上，高效氯氟氰菊酯72.9%以上，吡唑醚菌酯65%以上，而降解酶僅對甲氰菊酯降解效果比較好，降解率達92.5%。因此，在平菇中去除甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯和吡唑醚菌酯三種農(nóng)藥最佳選擇方法是采用超聲波和臭氧法。

[1] 黃文清,張俊飚.我國食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展的SWOT 分析(一)[J].食藥用菌,2011,19(3):1-5

[2] 李太平,食品中農(nóng)藥最大殘留限量標準的安全漏洞分析[J].食品科學,2011,32(3):266-271

[3] 管道平,胡清秀.食用菌藥殘留限量與產(chǎn)品質量安全[J].中國食用菌,2008,27(2):3-6

[4] 楊慧,趙志輝,王瑞霞,等.食用菌中農(nóng)藥殘留安全及風險預測[J].食用菌學報,2011,18(3):105-110

[5] 梁斌,張玲.加工方法及加工后的存放對蔬菜中亞硝酸鹽含量的影響[J].中國基層藥,2003,10(1):39-40

[6] 孫紅杰,張志群.超聲降解甲胺磷農(nóng)藥廢水[J].中國環(huán)境科學,2002,22(3):210-213

[7] 陳梅蘭,陳金媛,蔣傳慶,等,TiO2光催化降解低濃度溴氰菊醋[J].環(huán)境污染與治理,2000,22(1):13-15

[8] Soon-Dong Kim,LL-Doo Kim.Effect of ozone water on Pesticide residual contents of soybean sprouts cultivation [J],Korean J.Food.Sci.Technol,2000,32(2):277-283

[9] 邵成斌, 譚冬梅.生化法降解白菜中氯氰菊酯的殘留[J].農(nóng)藥,2006,45(4):265-268

[10] 劉春媛,徐英黔,胡君一等,黃瓜中有機磷農(nóng)藥殘留去除方法[J].食品研究與開發(fā),2013,34（21）:116-118

[11] 劉洋,楊麗麗,張?zhí)傻?食用菌中25種農(nóng)藥多殘留分析[J].分析實驗室,2013,32(增刊):61-66

[12] 農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所.農(nóng)藥殘留量實用檢測方法手冊（第三卷）[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社,2005