高　蘭，郝燕捷，張卓莉

(北京大學(xué)第一醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，北京 100034)

ChinJAllergyClinImmunol，2014，8(3)：259- 262

自身免疫性疾病是一類以適應(yīng)性免疫細(xì)胞異常反應(yīng)導(dǎo)致自身組織炎性損害為特征的疾病[1]。自身免疫性炎性細(xì)胞、炎性細(xì)胞因子、組織細(xì)胞和基質(zhì)蛋白均參與疾病過程，其中基質(zhì)蛋白可介導(dǎo)組織損傷和炎性反應(yīng)[2]。

高半胱氨酸蛋白61(cysteine rich 61，Cyr61)為Cyr61CTGFNOV(CCN)家族成員之一，是一種細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，由 379個(gè)氨基酸殘基組成，相對(duì)分子質(zhì)量為42 000，其中含有38個(gè)保守的半胱氨酸，Cyr61也因富含半胱氨酸而得名[3]。Cyr61基因位于染色體1p22.3[4]。Cyr61蛋白由5個(gè)外顯子編碼而成，包括N末端分泌肽和4個(gè)模塊，4個(gè)模塊分別為胰島素樣生長(zhǎng)因子連接蛋白、C型血漿血管性血友病因子、類血小板凝集蛋白和羧基末端。羧基末端含有10個(gè)半胱氨酸，其中6個(gè)半胱氨酸組成胱氨酸結(jié)[5]。

Cyr61是一種即刻早期基因表達(dá)蛋白，在靜止的細(xì)胞中表達(dá)水平很低，但當(dāng)受到血清生長(zhǎng)因子刺激后可在數(shù)分鐘內(nèi)活化并轉(zhuǎn)錄，且不需要蛋白從頭合成[6]。研究顯示，生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子、維生素D3、他莫昔芬、糖皮質(zhì)激素、G蛋白耦聯(lián)受體激動(dòng)劑等均可誘導(dǎo)Cyr61的表達(dá)[7]。Cyr61可直接與細(xì)胞表面整合素受體結(jié)合而發(fā)揮作用。整合素是由2個(gè)亞單位組成的二聚體，它是一類存在于細(xì)胞表面的信號(hào)受體。Cyr61可與不同細(xì)胞表面的αvβ3、α6β1、α2β3、αMβ2等整合素結(jié)合。例如，Cyr61與αvβ3結(jié)合可以促進(jìn)細(xì)胞增殖、存活和血管形成，Cyr61與α6β1及硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparan sulfate proteoglycans， HSPG)結(jié)合可誘導(dǎo)細(xì)胞衰老和凋亡。一般情況下，Cyr61不同整合素結(jié)合位點(diǎn)獨(dú)立發(fā)揮作用，如α6β1與αvβ3，其中1個(gè)位點(diǎn)的突變不會(huì)影響另1個(gè)位點(diǎn)[8]。Cyr61在自身免疫性疾病中的作用已得到越來越多的研究，包括類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸炎、IgA腎病、糖尿病腎病等。Cyr61可調(diào)節(jié)成人炎性反應(yīng)、創(chuàng)傷修復(fù)和纖維化，其在胚胎發(fā)育過程中同樣發(fā)揮著重要作用。Cyr61異常表達(dá)常與多種癌癥相關(guān)。本文對(duì)Cyr61在自身免疫性疾病中的研究進(jìn)展做一綜述，為今后進(jìn)一步研究提供參考。

Cyr61在自身免疫性疾病中的作用

自身免疫性疾病為慢性炎性疾病。近年來，越來越多的證據(jù)表明，Cyr61參與炎性反應(yīng)過程，如炎性細(xì)胞因子可誘導(dǎo)Cyr61表達(dá)，Cyr61也可作用于炎性細(xì)胞而誘導(dǎo)細(xì)胞因子[如腫瘤壞死因子α、白細(xì)胞介素(interleukin，IL)-1α、IL-1β、IL-6]釋放[9-10]，并進(jìn)一步促進(jìn)血管形成或協(xié)同細(xì)胞因子間的作用。在炎性反應(yīng)刺激下，Cyr61可由外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)產(chǎn)生、分泌，并促進(jìn)PBMC遷移[7]；同時(shí)，可活化巨噬細(xì)胞促炎因子基因表達(dá)，進(jìn)而調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞功能[9]。

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎

通過基因芯片技術(shù)發(fā)現(xiàn)，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)患者滑膜組織和成纖維樣滑膜細(xì)胞(fibroblast-like synoviocytes，F(xiàn)LS)中Cyr61水平升高，并釋放至滑液，通過自分泌和旁分泌進(jìn)一步促進(jìn)FLS增殖。FLS產(chǎn)生的Cyr61可通過αvβ5AktNF-κB信號(hào)通路促進(jìn)滑膜細(xì)胞分泌IL-6，滑液中高濃度的IL-6進(jìn)一步促進(jìn)輔助性T細(xì)胞(helper T cell，Th)0向Th17細(xì)胞分化增殖和IL-17的產(chǎn)生，滑液中的IL-17又通過NF-kB 和p38MAPK兩條信號(hào)通路上調(diào)滑膜細(xì)胞中Cyr61的表達(dá)，從而形成正反饋調(diào)節(jié)。當(dāng)拮抗FLS的Cyr61后，IL-17誘導(dǎo)的FLS增殖也相應(yīng)被抑制。用抗Cyr61中和抗體處理膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎小鼠后，可觀察到小鼠炎性反應(yīng)明顯減輕，且下調(diào)小鼠體內(nèi)Th17細(xì)胞的表達(dá)[11-12]。由此可見，Cyr61可促進(jìn)RA患者滑膜細(xì)胞增生肥厚，并介導(dǎo)炎性反應(yīng)，是連接Th17和FLS的紐帶。

對(duì)Cyr61表達(dá)的轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，RA患者FLS細(xì)胞中p53-miR22-Cyr61軸調(diào)控Cyr61的表達(dá)。正常情況下，p53啟動(dòng)miR22的活化，活化的miR22對(duì)Cyr61轉(zhuǎn)錄后進(jìn)行降解；但是，RA患者p53基因突變導(dǎo)致miR22活化減少，減少的miR22不足以抑制Cyr61的表達(dá)，從而導(dǎo)致Cyr61過度產(chǎn)生，促進(jìn)滑膜細(xì)胞增殖和RA發(fā)生[13]。

2014年的最新研究發(fā)現(xiàn)，Cyr61可促進(jìn)RA患者滑膜細(xì)胞產(chǎn)生IL-8，進(jìn)而介導(dǎo)中性粒細(xì)胞向關(guān)節(jié)炎性反應(yīng)部位趨化[14]。由此可見，Cyr61不但能介導(dǎo)滑膜細(xì)胞的增殖，還能促進(jìn)滑膜細(xì)胞產(chǎn)生IL-6、IL-8等炎性細(xì)胞因子，并在Th17細(xì)胞分化和中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)中發(fā)揮一定作用[2， 11-12]。

炎癥性腸病

血管形成是炎癥性腸病的病理基礎(chǔ)。在克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎患者的損傷結(jié)腸中發(fā)現(xiàn)，Cyr61、P物質(zhì)及其受體神經(jīng)激肽1三者的表達(dá)水平均升高，后兩者結(jié)合后可促進(jìn)腸上皮細(xì)胞Cyr61表達(dá)，升高的Cyr61與整合素受體αvβ3結(jié)合而促進(jìn)結(jié)腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和血管形成[15]。進(jìn)一步研究證實(shí)，SPNK-1P通過增加組蛋白脫乙酰酶的活性來促進(jìn)Cyr61表達(dá)[16]。

其他自身免疫性疾病

一項(xiàng)包括33例IgA腎病患者的研究對(duì)患者腎臟穿刺活檢組織進(jìn)行免疫組化染色，發(fā)現(xiàn)Cyr61特異性地在足細(xì)胞表達(dá)，且腎小球系膜損傷越重，Cyr61表達(dá)水平越低。與正常對(duì)照腎臟組織相比，IgA腎病患者Cyr61表達(dá)量減少，某些足細(xì)胞甚至完全沒有Cyr61的表達(dá)。糖尿病腎病患者腎臟組織中Cyr61也特異表達(dá)于足細(xì)胞，且表達(dá)量較正常對(duì)照腎臟組織少。體外實(shí)驗(yàn)顯示，Cyr61抑制腎小球系膜細(xì)胞的黏附和遷移，并以自分泌和旁分泌的形式促進(jìn)足細(xì)胞分化和維持足細(xì)胞的靜止表型[17]。另外，通過基因芯片技術(shù)和反轉(zhuǎn)錄酶-聚合酶鏈鎖反應(yīng)證實(shí)，在Graves眼病患者的眼眶脂肪組織中Cyr61基因水平升高，其與炎性反應(yīng)相關(guān)的應(yīng)答基因如IL-1β、基質(zhì)金屬蛋白酶3、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子也過度表達(dá)，且Cyr61急性期表達(dá)水平高于慢性期，提示其在眼眶炎性反應(yīng)和脂肪形成中發(fā)揮重要作用，并可作為疾病活動(dòng)度的標(biāo)志物[18]。

Cyr61在其他生理或病理過程中的作用

胚胎發(fā)育

Cyr61缺陷的小鼠會(huì)導(dǎo)致胚胎死亡，大約30%的胚胎死亡是由于胎盤血管發(fā)育不完整所致[19]。在永生的神經(jīng)海馬細(xì)胞系中，Cyr61的表達(dá)可促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞分化[20]。由此可見，Cyr61在胚胎血管形成和神經(jīng)分化過程中發(fā)揮重要作用。另外，Cyr61還可調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育中軟骨正常生長(zhǎng)分化和形態(tài)的形成[21]。

創(chuàng)傷修復(fù)

Cyr61在肉芽組織的肌成纖維細(xì)胞中高表達(dá)，并在創(chuàng)傷修復(fù)后期誘導(dǎo)肌成纖維細(xì)胞衰老，使細(xì)胞外基質(zhì)的合成和沉積出現(xiàn)自限性[22-23]。另外，Cry61也參與了心肌梗死后的心肌重塑和血管損傷、長(zhǎng)骨骨折和肺早期損傷等修復(fù)過程[24-25]。

血管疾病

Cyr61在動(dòng)脈粥樣斑塊損傷部位的血管平滑肌細(xì)胞和球囊擴(kuò)張術(shù)后再狹窄部位的新生內(nèi)膜處均呈過度表達(dá)[26-27]。體外研究發(fā)現(xiàn)，Cyr61可促血管平滑肌細(xì)胞的黏附、遷移和增殖，且作用呈劑量依賴性[26]。

腫瘤

一方面，Cyr61可促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和腫瘤新生血管的形成，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖、侵襲、存活和代謝[28]；且Cyr61表達(dá)水平也與腫瘤分期、大小、是否累及淋巴結(jié)等因素有關(guān)[29]。 另一方面，Cyr61可誘導(dǎo)非小細(xì)胞肺癌中癌細(xì)胞衰老，抑制肝癌細(xì)胞增殖[30]?？梢?，Cyr61在腫瘤中的作用是雙刃劍。

小　　結(jié)

Cyr61作為一種新的前炎性因子，參與了自身免疫性疾病的病理損傷和炎性過程。近年來，針對(duì)Cyr61的研究逐漸深入，尤其是在RA中的作用帶來了新的思路和啟示。Cyr61對(duì)于多個(gè)學(xué)科都存在研究?jī)r(jià)值和臨床意義，它更多的生物學(xué)功能和作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

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